罗文鸿
- 作品数:73 被引量:354H指数:12
- 供职机构:汕头大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部“优秀青年教师资助计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生理学生物学环境科学与工程更多>>
- 固相萃取-液相色谱/质谱法测定全血中环孢素A的血药浓度被引量:3
- 2004年
- 目的:建立高效液相色谱/质谱联用测定全血中环孢素A的血药浓度的分析方法。方法:样品用固相萃取小柱提取处理。液相色谱:流动相为乙腈-甲醇-0.01 mol·L-1乙酸铵水溶液(47:33:20),流速0.5 mL·min-1;色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6 mm×12.5 mm,5μm),柱温60℃。质谱:电喷雾电离源(ESI),选择性监测质荷比(m/z)为1203(环孢素A),1217(内标,环孢素D)带正电荷的分子离子峰。结果:线性范围为25-500μg·L-1,回收率94.7%-105%,日内、日间的RSD均小于5%。结论:本方法取样量少(0.2 mL全血),灵敏度高,操作简便,适用于临床上环孢素A的血药浓度监测及药动学研究。
- 李慧林哲绚张源罗文鸿
- 关键词:质谱法全血环孢素A血药浓度
- 免疫荧光技术中不同固定剂对细胞p65核移位观察效果的影响被引量:6
- 2012年
- 目的观察免疫荧光技术中不同固定剂以及Triton X-100不同渗透时间对小鼠腹腔巨噬细胞p65蛋白核移位的影响,找出最适合观察p65蛋白移位的固定方法及Triton X-100渗透时间。方法采用免疫荧光的方法观察使用不同固定剂(甲醇,1%~4%甲醛)固定,0.1%Triton X-100渗透3~15min的条件下,观察脂多糖刺激2h后,p65蛋白细胞内定位的情况。结果 p65蛋白在对照细胞主要定位于细胞质,脂多糖(LPS)刺激后p65蛋白移入胞核。甲醇固定后细胞荧光染色显色很弱且核区不明显,染色弥散;1%、2%甲醛固定不良可引起细胞收缩;4%甲醛固定后,核区与胞质p65蛋白荧光染色对比明显。0.1%Triton X-100作用3~5min效果最佳,而作用10~15min对照细胞核内也有较强荧光。结论本实验表明,在免疫荧光技术中采用4%甲醛固定20min,0.1%Triton X-100渗透3~5min可更好的观察LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞p65核移位。
- 林哲绚罗红军李慧张源罗文鸿
- 关键词:免疫荧光测定巨噬细胞
- 石墨炉原子吸收光谱法测定镉中毒小鼠尸体中大头金蝇体内的镉和金属硫蛋白被引量:1
- 2012年
- 目的:研究尸食性蝇类大头金蝇体内的镉(Cd)浓度能否反映所寄生尸体生前的Cd投毒量。方法:大头金蝇初产卵接入Cd中毒小鼠尸体,分别于产卵后3 d(幼虫)、7 d(幼虫)、9 d(蛹)收集幼虫(蛹)样本,用微酸量消化处理测Cd,用Cd-血红蛋白饱和法处理测金属硫蛋白(MT)。塞曼效应校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定。结果:方法检出限分别为:Cd0.024μg/L和MT 0.027μg/L。回收率实验分别为Cd 94.3%~105.0%,MT 90.2%~108.0%。大头金蝇幼虫随着生长时间增加Cd蓄积也增加,但蛹期Cd浓度减少,MT表达也表现类似规律,各个生长期的Cd浓度与投毒量呈线性相关。结论:检测昆虫体内的Cd,可用于判断尸体生前摄入的Cd是否达到致死量。
- 林哲绚张源罗红军朱光辉李慧罗文鸿
- 关键词:大头金蝇镉金属硫蛋白石墨炉原子吸收光谱
- 高效液相色谱法同时测定血清中苯妥英、卡马西平的浓度被引量:6
- 2000年
- 目的 :建立HPLC法同时测定血清苯妥英 (PHT)与卡马西平 (CBZ)浓度。方法 :以C18反相柱为色谱柱 ,甲醇 水 (5 5∶45 )为流动相 ,检测波长 2 40nm ;用乙酸乙酯作为提取剂。结果 :PHT、CBZ平均回收率各为 99.5 %和 10 0 .5 % ,日内和日间RSD均低于 6 .6 % (n =5 ) ;分析方法的定量测定下限 :PHT为 1.2 μ犂·ml-1,CBZ为 0 .2 μ犂·ml-1。分析方法的检测下限 :PHT为 0 .4μ犂·ml-1;CBZ为 0 .1μ犂·ml-1。PHT在 5~ 40 μ犂·ml-1浓度范围线性关系良好 ,r=0 .998;CBZ在 2 .5~ 2 5 μ犂·ml-1浓度范围线性关系良好 ,r=0 .998。结论 :方法灵敏、准确 ,可用于PHT和CBZ临床血药浓度监测。
- 陈玲罗文鸿李慧张源
- 关键词:苯妥英卡马西平血药浓度高效液相色谱法
- 短刺小克银汉霉菌对马兜铃酸A的代谢转化被引量:12
- 2006年
- 选取短刺小克银汉霉菌(Cunninghamella blakesleana AS3.910)用微生物转化的方法对马兜铃酸A(Aristolochic acid)进行了代谢转化研究并比较了微生物转化产物和哺乳动物体内的代谢产物的异同。考察了影响微生物转化产物形成的各种因素,并对该转化体系进行了优化,采用高效液相色谱、质谱对代谢产物进行了检测和分析。多种因素条件会对微生物的转化产生影响,发酵液中主要的转化产物是马兜铃酸A的O去甲基化物,该产物和报道的哺乳动物在摄入马兜铃酸A后尿中发现的一种代谢产物结构相同。利用小克银汉霉菌的转化可以方便地制备马兜铃酸A在哺乳动物体内的某些代谢产物,它可以作为研究马兜铃酸A代谢物的一个体外模型进行探索。
- 郭永超林哲绚罗文鸿
- 关键词:马兜铃酸A微生物转化药物代谢
- 石墨炉原子吸收光谱法测定血铅方法的改进被引量:21
- 2000年
- 张源罗文鸿李慧
- 关键词:血铅石墨炉原子吸收光谱法
- 石墨炉原子吸收法测定全血中的锰和铝被引量:9
- 2001年
- 研究了石墨炉原子吸收法测定全血中锰和铝的方法。并提出测锰采用含硝酸镁和氨水为基体改进剂 ,测铝采用含硝酸铜和氨水为基体改进剂。按 1∶ 5体积比稀释血样 ,建立无干扰的加入法基体匹配校准曲线。本法检出限低 ,灵敏度高 ,实测样品具有良好的准确度和精密度。
- 张源罗文鸿李慧李伟秋
- 关键词:锰铝
- 高效液相色谱/质谱/质谱法测定血浆中3种常用药物的浓度被引量:5
- 2005年
- 目的:建立测定血浆中卡马西平、苯妥英钠、茶碱浓度的高效液相色谱/质谱/质谱分析方法.方法:①液相色谱流动相为甲醇-0.01 mmol/L乙酸铵水溶液(60:40),流速0.2 mL/min;色谱柱为SYMMETRY(R) C18(2.1 mm×50 mm,3.5 μm),柱温30 ℃.②质谱 电喷雾电离源,采用多反应监测方式进行检测,卡马西平质荷比237→194,苯妥英钠253→182,茶碱181→124.血浆样本经固相萃取小柱萃取处理后进样分析.结果:卡马西平在(1~20) μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率100.9%~107.0%.日内误差(RSD)小于2.0%;苯妥英钠在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率96.5%~102.4%.RSD小于1.9%;茶碱在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率95.8%~106.0%,RSD小于3.0%.结论:本方法具有特异性高,灵敏度好,测定快速等优点.
- 李慧林哲绚张源罗文鸿
- 关键词:卡马西平苯妥英钠茶碱固相萃取
- 彗星电泳法检测H_2O_2对人淋巴细胞DNA损伤及其激光扫描共聚焦显微境下的观察和三维重建被引量:5
- 2003年
- 目的 :应用彗星电泳法于荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察人淋巴细胞经H2O2 作用后的DNA损伤情况。 方法 :人淋巴细胞经不同浓度H2O2(0、10、20、40、80μmol/L)作用20min,或20μmol/LH2O2 作用不同时间(0、10、20、30min)后 ,采用彗星电泳法 ,荧光显微镜下观察、照相 ,对尾长、总彗星长度、尾距进行测量和分析。同时采用激光共聚焦显微镜(LSCM)进行观察和三维重建 ;比较了不同染料(PI、AO、EB、Hochest33258)的染色效果。 结果 :H2O2 作用浓度为0、10、20、40、80μmol/L时 ,尾距( x- ±s)分别为0.001±0.002、0.31±0.35、1.23±0.96、2.82±1.38、3.52±0.96(P<0.01) ;作用时间为0、10、20、30min时 ,尾距( x- ±s)分别为0.05±0.09、0.22±0.30、1.62±0.93、1.89±1.09(P<0.01)。尾长、总彗星长度也有显著性增加 ,经统计学检验 ,P<0.01。与荧光显微镜相比 ,LSCM下的"彗星"轮廓十分清晰 ;PI和EB染色效果较好。 结论 :H2O2 能剂量依赖性和时间依赖性地导致人外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤。利用LSCM构建"彗星"的三维图像将更有利于DNA损伤的准确测量。鉴于染色效果的差异 。
- 张俏忻罗文鸿李慧林哲绚
- 关键词:彗星电泳淋巴细胞DNA损伤激光扫描共聚焦显微镜
- GFAAS测定氧化砷处理移植性食管癌大鼠后各组织的砷浓度被引量:3
- 2004年
- 用石墨炉原子吸收法测定了大鼠各组织中的砷浓度。在大鼠移植性肿瘤组织内一次性注射 10 μg砷后 ,观察不同时间大鼠各脏器砷的分布。组织通过 80℃水浴用硫酸 硝酸 高氯酸混酸体系封闭消解 2h后 ,滴加 30 %双氧水 ,得到定容的消化液。用 0 1%TritonX 10 0 0 2 %AgNO3溶液作消化液的基体改进剂 ,D2 灯校正背景 ,标准加入法校准曲线测定。此法相对标准偏差为 3 2 %~ 8 7%之间。检出限为 1 5 7μg·L- 1 。回收率为 81 7%~ 10 5 %。分析结果表明 ,注射到肿瘤组织内的砷 2h内扩散到其他组织达最大值 ,而后随机体代谢活动的结果 ,砷浓度随时间延长又渐渐减少。
- 张源罗文鸿李慧沈忠英
- 关键词:GFAAS氧化砷食管癌原子吸收法