魏亚琴
- 作品数:84 被引量:127H指数:5
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- 发文基金:甘肃省科技计划项目国家自然科学基金甘肃省应用技术研究与开发专项计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 腾冲嗜热厌氧杆菌Cmr3的生物信息学分析及原核表达被引量:1
- 2021年
- 本研究旨在阐明腾冲嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)Ⅲ-B型CRISPR-Cas系统Cmr蛋白在嗜热机制中的作用,利用PCR方法扩增出腾冲嗜热厌氧杆菌的cmr3基因,构建原核表达载体,将其转化至大肠杆菌(Escherichia coli)中,通过诱导表达出Cmr3蛋白;并利用生物信息学软件分析比较cmr3基因在腾冲嗜热厌氧杆菌和两种常温菌中编码氨基酸的基本理化性质和蛋白三级结构。结果显示,腾冲嗜热厌氧杆菌Cmr3蛋白在大肠杆菌中表达,分子质量为43.4 kDa;生物信息学分析发现,腾冲嗜热厌氧杆菌cmr3基因序列长1134 bp,共编码377个氨基酸,Cmr3蛋白具有亲水性,且与常温菌相比更具有热稳定性,蛋白三级结构更为紧凑。本研究可以为了解嗜热菌CRISPR-Cas系统在嗜热过程中的作用提供科学依据。
- 毛耀芳魏亚琴杨宇泽孙康永杰郑航辉王川万学瑞
- 关键词:CRISPR
- 牦牛瘤胃厌氧真菌与甲烷菌共培养物的多样性及其纤维降解特性研究
- 青藏高原牦牛终年以放牧方式生活在海拔3000米以上的极端生态环境,栖息在瘤胃中的大量微生物使牦牛瘤胃成为高效降解木质纤维素的天然发酵罐。其中,厌氧真菌是一种重要的木质纤维素降解微生物。有研究认为,与瘤胃真菌共生的一些甲烷...
- 魏亚琴
- 关键词:牦牛瘤胃厌氧真菌甲烷菌共培养多样性
- 一种厌氧发酵玉米秸秆生产木聚糖酶的方法
- 本发明公开了一种厌氧发酵玉米秸秆生产木聚糖酶的方法。该方法中使用的发酵菌剂是从青藏高原的天祝南泥湾牧场全放牧牦牛瘤胃液中分离的自然共存的厌氧真菌和反刍兽甲烷短杆菌共培养物(<I>Piromyces</I>Yak TZ+<...
- 魏亚琴周剑平王治业
- 一种自然共生的混合培养物降解粗饲料生产柠檬酸的方法
- 本发明涉及生物技术可再生能源领域,具体为一种自然共生的混合培养物降解粗饲料生产柠檬酸的方法,所述的混合培养物YakQH5由厌氧真菌(Neocallimastix frontalis)和甲烷菌(Methanobreviba...
- 魏亚琴王治业赵疆
- 牛瘤胃纤维素酶eg基因在乳酸菌中的克隆表达及酶学性质分析被引量:2
- 2021年
- 为构建高效表达的内切葡聚糖酶基因工程菌,本研究以牛瘤胃液中微生物全基因组为模板,通过PCR扩增方法得到eg片段,将其克隆至表达载体pMG36e中获得分泌型表达载体pMG36e::eg;将测序正确后的重组质粒电转导到乳酸菌(Lactococcus lactis NZ9000)中,得到L.lactis NZ9000/pMG36e::eg重组菌株,将发酵上清液通过10%三氯乙酸(Trichloroacetic acid,TCA)/丙酮沉淀法浓缩蛋白后,用刚果红染色法和3,5-二硝基水杨酸(3,5-Dinitrosalicylic acid,DNS)法检测该蛋白酶活性,使用滤纸酶活力(filter paper enzyme activity,FPA)法检测该蛋白酶的总酶活,并对重组内切葡聚糖酶进行酶学性质研究。结果表明:从牛瘤胃微生物中克隆得到一个基因大小为1500 bp左右的条带,该酶分子量为50 kDa左右,经刚果红染色有明显水解圈,水解圈直径为2.32 cm;采用DNS法测定该重组蛋白的酶活为12.4019 U·mL^(−1),用FPA法测定总酶活为12.2469 U·mL^(−1);重组蛋白酶对羧甲基纤维素钠、滤纸、微晶纤维素、脱脂棉均有酶活性;最适反应温度为90℃;最适反应pH为6;其中Cu^(2+)、Mn^(2+)、Ba^(2+)、Zn^(2+)、Co^(2+)等均可以提高重组酶的酶活力,而Fe^(2+)可抑制重组内切葡聚糖酶活力。本试验纤维素酶eg基因在L.lactis NZ9000中的稳定高效表达为提高青贮饲料的营养价值和消化率提供了技术支持。
- 邹爱爱魏亚琴杨宇泽曹磊孙康永杰万学瑞王川
- 关键词:内切葡聚糖酶乳酸菌酶学性质
- 实时荧光定量PCR构建牛源粪肠球菌esp标准曲线
- 2019年
- 为了快速检测牛源粪肠球菌,本实验建立了粪肠球菌esp基因实时荧光定量PCR标准曲线。首先参照esp基因在Genbank中的序列进行引物的设计与合成,利用PCR扩增目的基因并将其连接到pMD18-T载体上,并转化进入大肠埃希菌TOP10感受态细胞,经测序鉴定成功后,提取重组质粒并以10倍系列稀释后作为标准模板,进行实时荧光定量PCR。成功建立了牛源粪肠球菌esp基因荧光定量PCR标准曲线及其直线回归方程,所得熔解曲线峰值单一,表明引物具有很好的特异性;标准曲线相关系数r^2=0.9998,说明线性关系良好,目的基因的荧光定量PCR的标准曲线构建成功。本研究为快速检测牛源粪肠球菌奠定了基础。
- 樊杰孙康永杰魏亚琴杨宇泽万学瑞丁巨财王川
- 关键词:粪肠球菌ESP实时荧光定量PCR
- 一种含有双歧杆菌包埋珠或包埋块的酸乳及其制备方法
- 本发明公开了一种含有双歧杆菌包埋珠或包埋块的酸乳及其制备方法,以解决双歧杆菌乳饮料产品中双歧杆菌活力低、保存期短、不易贮存的问题。该酸乳含有双歧杆菌包埋珠或包埋块,其制备方法分为两个环节:一是双歧杆菌包埋珠或包埋块制备;...
- 邵建宁张文齐刘彩云麻和平赵昊星魏亚琴彭章普
- 文献传递
- 一种梨囊鞭菌发酵秸秆生产阿魏酸酯酶的新方法和应用
- 本发明涉及生物技术可再生能源领域,具体涉及一株梨囊鞭菌及其发酵秸秆生产阿魏酸酯酶的方法和应用。本发明公开了一种公开了梨囊鞭菌Piromyces CY1厌氧发酵秸秆生产阿魏酸酯酶的方法,所述的梨囊鞭菌Piromyces C...
- 魏亚琴王治业杜军国祁宏山张静荣
- 文献传递
- 牦牛瘤胃厌氧真菌和甲烷菌共培养物降解秸秆功效研究
- 2019年
- 青藏高原耗牛终年以放牧方式生活在海拔3000米以上的极端生态环境,栖息在瘤胃中的大量微生物使耗牛瘤胃成为高效降解木质纤维素的天然发酵罐。其中,厌氧真菌是一种重要的木质纤维素降解微生物。有研究认为,与瘤胃真菌共生的一些甲烷菌能够提高厌氧真菌纤维素降解活性,并促进木质纤维素降解代谢转化生成乙酸和甲烷。
- 无魏亚琴王治业张静荣
- 关键词:放牧方式牛瘤胃瘤胃真菌甲烷菌代谢转化
- 牦牛瘤胃厌氧真菌和甲烷菌自然混合培养物发酵液在改善牦牛肉品质中的应用
- 本发明涉及饲料添加剂技术领域,具体涉及牦牛瘤胃厌氧真菌和甲烷菌自然混合培养物发酵液在改善牦牛肉品质中的应用,自然混合培养物YakQH5于2020年3月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGM...
- 魏亚琴何国琳马稳霞李斌薛花明