高江明
- 作品数:13 被引量:10H指数:2
- 供职机构:吉林大学更多>>
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- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途
- 本发明涉及一种旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途,其特征在于具体的制备方法如下:旋毛虫与肿瘤相关抗原加等量的完全福氏佐剂乳化后,常规方法皮下首免小鼠、兔或牛、驴等动物,两周后以旋毛虫与肿瘤相关抗原加等体积的福氏不...
- 张西臣李建华任保彦宫鹏涛张楠高江明李赫吕强张国才杨举
- 文献传递
- 旋毛虫Tsp_05904重组蛋白抗原及其制备方法
- 本发明提供了一种旋毛虫Tsp_05904重组蛋白抗原及其制备方法,利用间接ELISA方法确定A549肺癌细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与A549肺癌细胞阳性血清间存在相关抗原;利用多克隆抗体从旋毛虫cDNA文库中免...
- 张西臣李建华高江明宫鹏涛张楠李赫张国才杨举杨正涛
- 与乳腺癌细胞MCF-7相关的旋毛虫TS498基因的克隆与表达被引量:5
- 2012年
- 目的克隆与乳腺癌MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,并进行原核表达。方法从含TS498基因的噬菌体文库中PCR扩增TS498基因,亚克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-TS498,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。结果扩增的旋毛虫TS498基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TS498经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约23 000,表达量约占菌体总蛋白的20%,能够被兔抗旋毛虫肌幼虫阳性血清识别。结论成功克隆并在大肠杆菌中表达了与MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,为进一步研究其特性和功能奠定了基础。
- 任保彦左绍志高江明付成福张旭宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词:旋毛虫克隆原核细胞基因表达乳腺癌
- 旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法
- 本发明提供了一种旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法,提供了旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B基因,并提供了该基因抗体的制备方法,分别制备旋毛虫和H7402肝癌细胞的抗血清,利用间接ELISA方法确定H7402...
- 张西臣李建华徐晓芳宫鹏涛高江明杨举李赫张楠张国才
- 文献传递
- 大肠杆菌侵入肠道肌纤维母细胞
- 2011年
- 将携带绿色荧光蛋白基因的质粒转化E.coli K12中,体外分离培养肠肌纤维母细胞,将E.coli K12与肠肌纤维母细胞体外共培养,观察大肠杆菌是否侵入肌纤维母细胞并在细胞内存活。结果表明:在感染后2 h,大肠杆菌可粘附并侵入肌纤维母细胞,有大量成簇状和散状的大肠杆菌侵入细胞,感染后24 h细胞内仍有少量细菌存活。2h感染率和24 h感染率分别为20.3%和3.25%。本试验首次证实大肠杆菌透过细胞膜进入肌纤维母细胞细胞质,为研究肠道肌纤维母细胞在免疫防御中的作用奠定了一定的基础。
- 刘丽丽吴腾飞魏静元高江明张佳莹黄清花陈伟李静陈福广李文华张巧玲刘波
- 关键词:肌纤维母细胞大肠杆菌存活
- 旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法
- 本发明提供了一种旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法,提供了旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B基因,并提供了该基因抗体的制备方法,分别制备旋毛虫和H7402肝癌细胞的抗血清,利用间接ELISA方法确定H7402...
- 张西臣李建华徐晓芳宫鹏涛高江明杨举李赫张楠张国才
- 文献传递
- 巨型艾美耳球虫ADF基因的克隆及原核表达被引量:2
- 2012年
- 目的克隆巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)的ADF基因,并进行原核表达。方法采用RT-PCR方法扩增ADF基因,并将其与原核表达载体pET-28a连接,构建原核表达载体pET-28a-ADF,转化入大肠埃希菌Rossata(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定结果正确。表达分子质量单位为17ku的融合蛋白。Western blot检测融合蛋白能被抗E.maxima多克隆抗体识别。结论构建的原核表达载体pET-28a-ADF能表达具有反应原性的蛋白,为其免疫原性研究奠定了基础。
- 高江明刘兆辉宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣
- 关键词:巨型艾美耳球虫原核表达
- 安氏隐孢子虫交叉保护性核酸疫苗及其制备方法
- <B>本发明涉及一种安氏隐孢子虫交叉保护性核酸疫苗及其制备方法,</B>其特征在于:以真核表达质粒pVAX1为载体,将安氏隐孢子虫与微小隐孢子虫同源性较高的囊壁蛋白编码基因定向插入到pVAX1真核表达载体的多克隆位点区,...
- 宫鹏涛郑君张西臣李建华张楠高江明李赫吕强张国才杨举
- 文献传递
- 肺癌细胞A549抗原相关旋毛虫Tsp06172基因的克隆及原核表达被引量:3
- 2013年
- 目的克隆旋毛虫(Trichinella spiralis)与肺癌细胞A549相关抗原Tsp06172基因,并进行原核表达。方法采用RT-PCR方法扩增Tsp06172基因,连接原核表达载体pET-28a,转化入感受态细胞BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定正确。表达分子质量单位约为16ku的融合蛋白。Western blot检测融合蛋白能被抗A549细胞的多克隆抗体识别。结论构建的原核表达载体pET-28a-Tsp06172表达具有A549细胞反应原性的蛋白,为旋毛虫Tsp06172重组蛋白功能的研究了奠定基础。
- 高江明徐晓芳吕萌左绍志宫鹏涛杨举李赫李建华张国才张西臣
- 关键词:旋毛虫原核表达肺癌细胞A549
- RNA干扰IDH2基因对HCT-8细胞增殖能力的影响
- 2012年
- 目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HCT-8细胞空白对照组。构建靶向基因IDH2的siRNA真核绿色荧光载体重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2,利用FuGENE HD转染剂转染HCT-8细胞,通过荧光定量PCR检测IDH2mRNA的表达情况及MTT法检测结肠癌HCT-8细胞增殖变化。结果:在荧光显微镜下进行细胞计数,细胞转染率为74%。实时荧光定量PCR检测,siRNA重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2对IDH2基因表达的抑制率为85.02%,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT检测,干扰质粒转染组细胞的增殖能力明显低于空白对照组(P<0.05)。结论:抑制IDH2基因的表达可影响结肠癌细胞的增殖能力,提示IDH2基因在结肠癌的发生发展中起重要作用,抑制IDH2基因的表达可能成为一种治疗结肠癌的方法。
- 徐晓芳宋晗星邢沈阳吕强高江明赵娜常乐高峰宫鹏涛李建华张国才张西臣
- 关键词:RNA干扰