顾欣昕
- 作品数：4 被引量：36H指数：2
- 供职机构：四川农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家大学生创新性实验计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 草莓MDHAR及AO基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 从新鲜幼嫩‘丰香’草莓(Fragaria×ananassa cv.Toyonaka)果实中提取分离总RNA,反转录成cDNA,根据已报道的其他植物单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)及抗坏血酸氧化酶(AO)基因的保守区分别设计一对引物,通过PCR扩增均得到目的条带。序列分析发现:mdhar基因片段长372 bp,与刺梨同源性最高达96%,该片段编码123个氨基酸,推导的氨基酸序列与苹果属植物同源性为91%,与其他植物该基因编码的氨基酸序列也有较高相似性;ao基因片段长842 bp,编码280个氨基酸,该片段与其他多种植物的ao基因均具有较高同源性,与甜瓜和黄瓜ao基因的同源性最高,均为70%,编码的氨基酸序列与其他多种植物均具有70%左右的相似性。
- 林源秀顾欣昕汤浩茹侯艳霞代小娟张勇罗娅刘泽静
- 关键词：草莓克隆
- 植物谷胱甘肽还原酶的生物学特性及功能被引量：30
- 2013年
- 谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR:EC 1.6.4.2)是植物体内一种重要的抗氧化酶类,其主要的生理功能是将氧化型谷胱甘肽(oxidaized glutathione disulfide,GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH),从而为活性氧(reactive oxygen species,ROS)的清除提供还原力,保护植物免受伤害.文中主要从Gr基因及其氨基酸序列的比较等方面分析了该酶的生物学特性;又对植物逆境响应,酶基因的缺失等方面的研究进行综述,阐释了GR酶在植物体内的作用原理、在逆境胁迫中抗逆表达调控途径及其作用机制;并对已有的研究成果进行总结分析,探讨了GR酶可能的起源及系统进化过程,为今后该酶的研究提供理论参考.
- 林源秀顾欣昕汤浩茹
- 关键词：谷胱甘肽还原酶生物学特性进化分析
- 草莓FaMDHAR和FaGR的克隆与表达分析被引量：2
- 2015年
- 为了探讨草莓中单脱氢抗坏血酸还原酶(Monodehydroascorbate reductase,MDHAR)和谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)基因的功能,采用同源克隆的方法从‘丰香’草莓中克隆得到c DNA全长序列,并采用实时定量PCR方法对其在不同组织和不同发育阶段果实中的表达模式进行分析。结果表明:草莓MDHAR基因c DNA(Fa MDHAR,Gen Bank登录号:KP025946)全长1 305 bp,编码434个氨基酸,分子量约为47 k D,含有保守的FAD结合结构域,定位于细胞质中。GR基因c DNA(Fa GR,Gen Bank登录号:JQ339738)开放阅读框全长1 491 bp,编码496个氨基酸,分子量为53 k D,定位于细胞质中。Fa MDHAR在各组织中均有表达,在成熟果实中表达量最高,叶和花次之,根中最低;在果实发育过程中Fa MDHAR在绿果期有相对较高的表达,随后急剧增加,到白熟期最高,之后下降并维持在相对稳定水平。Fa GR在叶和花中表达较高,在成熟果实中较低;在果实发育过程中,表达量从小绿期呈现增加趋势,至转红果期达最高,随后逐渐下降,在成熟果实中较低。果实发育过程中酶活性变化呈现出与各自基因表达量相似的变化规律。经过4℃低温处理24 h后的草莓叶片中,Fa MDHAR相对表达量较对照显著增加,而Fa GR无显著变化。草莓中Fa MDHAR和Fa GR表达存在时空差异,并对低温逆境响应存在差异。
- 林源秀顾欣昕吴宛玲侯艳霞汤浩茹
- 关键词：草莓谷胱甘肽还原酶克隆
- 不同低温胁迫下草莓叶片FaGR基因表达分析被引量：3
- 2015年
- 为进一步探明草莓谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)基因在低温胁迫下的表达调控模式,以揭示其作用机理和抗逆机制,该研究以草莓栽培品种‘丰香’植株为对象,分别用0、2、4、6、8、10℃低温胁迫以及室温(25℃)作为对照处理24h,从处理植株的新鲜幼嫩叶片中提取总RNA并反转录成cDNA,采用半定量PCR及荧光定量PCR两种定量方法,分析FaGR基因在不同低温胁迫下的表达差异。结果表明:半定量PCR方法与荧光定量PCR方法的结果基本一致。FaGR的相对表达量受到不同低温胁迫和不同程度的诱导,在8℃和10℃低温胁迫下表达量上调,均高于对照水平,且在8℃低温胁迫下相对表达量最高;当温度为6℃时,FaGR表达量急剧下降,当温度低于6℃时,FaGR表达量随着温度的降低而逐渐降低,并低于对照水平;在0℃相对表达量时降至最低水平,约为最大表达量的一半。这说明半定量PCR结果准确可靠,可广泛应用于基因表达研究,而且FaGR表达量受到低温诱导,但不同低温处理对FaGR的表达量诱导程度不同。FaGR相对表达量在一定范围内的低温胁迫下增加,但在此低温范围外的低温胁迫下则降低,该研究表明6℃低温为临界值。以上结果为进一步调控该基因表达提供了科学依据,同时为提高植物抗逆能力提供了基础资料。
- 林源秀顾欣昕于定群余昊唯陈清汤浩茹
- 关键词：草莓低温胁迫荧光定量PCR
