顾俊彦
- 作品数：26 被引量：46H指数：3
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多普勒组织成像检测基因转染猪慢性缺血心肌的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨多普勒组织成像 (DTI)技术检测基因转染猪慢性缺血心肌的价值。方法 在猪冠状动脉左旋支放置Ameroid环建立慢性心肌缺血模型 ;4周后分组注射携带血管内皮生长因子 -B基因的重组腺病毒液 (Ad .VEGF B)或磷酸盐缓冲液 (PB) ;再 4周后取心进行病理学检查。观察术前、置环后 2周、4周及注射后 2周、4周左心室侧后壁心肌彩色二维和M型速度图的变化 ,检测各阶段DTI频谱 (收缩期峰值速度VS,舒张早、晚期峰值速度VE 和VA)的变化。结果 正常心肌色彩充盈明亮 ,分层清晰 ;缺血心肌色彩暗淡缺失 ,分层模糊 ;基因转染后心肌较对照组色彩明亮 ,缺失减少 ,分层较清晰。对照组正常心尖四腔观VS 大于左心室乳头肌短轴观 (P <0 .0 1) ,VE 小于乳头肌短轴观 (P <0 .0 5)。置环后 2周 ,两者VS、VE 均显著减小 (P <0 .0 5) ,心尖四腔观VS 减小幅度大于乳头肌短轴观。以后各阶段VS、VE 均继续减小 ,以心尖四腔观VS 减小幅度最大。基因转染组治疗前DTI频谱变化同对照组 ,注射后 2周乳头肌短轴观和心尖四腔观VS、VE 均较对照组增加 ,以前者VE 和后者VS 增加显著 (P <0 .0 5) ;注射后 4周两者VS 和乳头肌短轴观VE 较对照组有明显增加 (P <0 .0 1)。结论 DTI技术可快速。
- 徐静赵宝珍顾俊彦王忠赵旭升陆世萍廖继安
- 关键词：多普勒组织成像基因转染慢性心肌缺血
- 酸性成纤维细胞生长因子基因转染改善缺血心肌血流灌注的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)基因重组腺病毒 (Ad .aFGF)转染改善缺血心肌血流灌注的作用。方法 小型猪左冠回旋支 (Lcx)放置Ameroid环后 4周 ,注射Ad .aFGF(n =7)、空病毒 (Ad .Null,n =6 )、磷酸盐缓冲液 (PBS ,n =6 )于Lcx供血区域 ,每头 10点 ,每点 1× 10 9pfu或 10 0 μl的PBS。 4周后 ,单光子计算机断层扫描 (SPECT )和心脏超声分别检测局部血流灌注和心功能。注射点心肌Ⅷ因子免疫组织化学染色观察血管新生。结果 SPECT显示Ad .aFGF组心肌核素摄取评分 ( 76 .1± 2 .9)显著高于Ad .Null组 ( 6 4.6± 3 .0 ,P <0 .0 1)和PBS组( 6 5 .4± 3 .9,P <0 .0 1) ;超声显示Ad .FGF组节段性室壁收缩期增厚率 ( 34.1± 1.8) %显著高于Ad .Null组 [( 2 4.2± 2 .3) % ,P <0 .0 1]和PBS组 [( 2 3 .7± 2 .2 ) % ,P <0 .0 1] ;免疫组织化学显示Ad .aFGF组心肌中血管密度 [( 32 .8± 1.9)个 /每高倍视野 (HPF) ]显著高于Ad .Null组 [( 18.2±1.5 )个 /HPF ,P <0 .0 1]和PBS组 [( 17.3± 1.7)个 /HPF ,P <0 .0 1]。结论 Ad .aFGF转染慢性缺血心肌可增加血流灌注 ,改善心功能。
- 顾俊彦梅举黄盛东徐志云张宝仁蔡凯华朱泉芳
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子腺病毒载体心肌缺血基因转染
- aFGF基因转染改善猪慢性缺血心肌心功能的实验研究被引量：1
- 2002年
- 为探讨携带人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)基因的重组缺陷型腺病毒载体 (Ad .aFGF)转染对缺血心肌心功能改善的作用 ,采用小型猪 ,开胸后于左回旋支起始部放置Ameroid环 ,4周后 ,Ad.aFGF(n =7)、Ad.Null(n =5 )、PBS(n =6 )直接注射到左回旋支供血区域心肌 ,每只注射 10点 ,每点注射病毒 10 9pfu或PBS 10 0 μl;注药后 4周进行心脏超声检测。结果显示 ,Ad.aFGF组动物心功能较Ad.Null组和PBS组有显著改善。研究表明 ,Ad.aFGF能改善缺血心肌的心功能 ,可用于缺血性心脏病的治疗。
- 顾俊彦梅举黄盛东徐静张宝仁朱泉芳李白翎
- 关键词：基因转染病理性新生血管化心功能心肌再血管化
- 酸性成纤维细胞生长因子的浓度对其促血管内皮细胞增殖影响的实验研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨不同浓度的酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞生长的影响。方法 :通过组织块培养法获取主动脉内皮细胞。将浓度分别为 5ng/ml ,10ng/ml ,2 0ng/ml的aFGF加入内皮细胞的培养液中作为实验组 (Ⅰ～Ⅲ组 ) ,不加aFGF的组作为对照组。分别在 2 4h、48h和 72h应用MTT法进行细胞计数。结果 :从大鼠主动脉成功地获取了内皮细胞。 3d内 ,实验组和对照组的主动脉内皮细胞都有不同程度的增殖 :培养 2 4h ,实验各组与对照组比较 ,P >0 0 5 ;48h和 72h ,Ⅱ、Ⅲ组与对照组以及与Ⅰ组两两比较 ,P <0 0 0 1;各时间段内 ,Ⅰ组与对照组 ,Ⅲ组与Ⅱ组比较 ,P >0 0 5。结论 :一定浓度的aFGF有非常明显的促进血管内皮细胞生长的作用 。
- 章斌梅举黄盛东张宝仁顾俊彦
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子细胞分裂心肌缺血血管内皮细胞
- 超声背向散射积分评价基因转染慢性缺血心肌治疗价值
- 2003年
- 目的 研究超声背向散射积分(IBS)技术检测基因转染慢性缺血心肌治疗价值。 方法在猪冠脉左旋支放置Ameroid环建立慢性心肌缺血模型;4周后分组注射携带血管内皮生长因子-B基因的重组腺病毒液或磷酸盐缓冲液:再4周后取心进行病理学检查。检测正常、置环后2周、4周及注射后2周、4周左室侧后壁标化平均背向散射积分(％AⅡ)、IBS周期变化幅度(CVIB)及CVIB跨壁梯度(TGI)的变化。 结果 对照组正常％AⅡ为2.29±0.32,CVIB为9.69±2.22dB,跨壁梯度指数(TGI)为0.22±0.08。置环后2周,％AⅡ增至3.64±1.03(P<0.01),CVIB减至7.11±1.89dB(P<0.01),其中心内膜下心肌CVIB减小幅度大于心外膜下,TGI减至0.17±0.04(P<0.05)。以后各阶段％AⅡ逐渐增加,CVIB逐渐减小,心内膜下CVIB减小幅度大于心外膜下,使TGI亦渐减小,置环后2-4周减小幅度最大,至注射后4周跨壁梯度消失(P<0.01)。基因转染组注射前％AⅡ和CVIB变化同对照组。注射后2周％AⅡ、CVIB及TGI分别为4.54±0.54、8.11±1.83dB及0.10±0.03(P>0.05),4周％AⅡ减至2.48±0.40(P<0.01),CVIB增至8.41±1.63dB,以心内膜下CVIB增加更明显,TGI增至0.14±0.05(P<0.01)。 结论 IBS技术能早期快速检测慢性缺血及基因转染治疗后各时期心肌结构和运动功能的改变.并可提供心肌各层?
- 徐静赵宝珍王忠顾俊彦陆世萍蒋栋
- 关键词：超声背向散射积分IBS基因心肌缺血
- 大鼠胎心细胞的分离培养技术被引量：3
- 2003年
- 目的 :介绍一套高效率的大鼠胎心细胞的分离培养方法及其应注意的事项。方法 :无菌条件下取胎心 ,经酶解消化法分离胎心细胞 ,通过差速贴壁和添加Brdu来提高胎心细胞纯度。结果 :培养的心肌细胞的纯度可达 94% ,活细胞数 >85 % ,形态典型 ,可同步自律搏动达 2～ 3周。结论 :该方法可为实验研究提供纯度高、活细胞数较多。
- 章斌梅举张宝仁李志刚顾俊彦
- 关键词：胎心细胞培养心肌
- 酸性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞增殖的实验研究被引量：5
- 2003年
- 目的探讨酸性成纤维细胞因子 (aFGF)对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞生长的影响。方法通过组织块培养法获取主动脉内皮细胞。将aFGF(10ng/ml)加入内皮细胞的培养液中作为实验组 ,不加aFGF的作为对照组。分别在2 4、48和 72小时行细胞计数。结果从大鼠主动脉成功地获取了内皮细胞。 3天内 ,实验组和对照组的主动脉内皮细胞都有不同程度地增殖 ,2 4小时内两组无明显区别 ,48小时和 72小时两组相比有非常明显的统计学差别 (P <0 .0 1)。结论aFGF有非常明显的促进血管内皮细胞生长的作用 。
- 章斌梅举张宝仁顾俊彦
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子血管内皮细胞冠心病组织块培养法
- aFGF重组腺病毒载体的构建、转染效率和使用安全性的初步研究被引量：3
- 2002年
- 目的 旨在构建人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)重组腺病毒载体 ,为基因转染的研究作准备。方法 将用于转染的重组粘粒和DNA TPC混合后 ,以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞 2 93细胞 ,获取重组腺病毒。结果 重组腺病毒DNA经酶切鉴定为正确 ,所得重组腺病毒为E1缺陷型并带有aFGF基因。同时证明重组腺病毒体外转染效率高且使用安全。结论 此重组缺陷型腺病毒载体可用于体内基因治疗研究。
- 顾俊彦黄盛东李白翎梅举张宝仁
- 关键词：AFGF酸性成纤维细胞生长因子腺病毒粘粒基因转染
- 酸性成纤维细胞生长因子基因转染猪慢性缺血心肌促进侧支血管的增生被引量：1
- 2003年
- 目的 :探讨人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)基因重组腺病毒载体 (Ad .aFGF)转染缺血心肌后促进侧支血管增生的作用。 方法 :实验用小型猪开胸于左冠回旋支 (Lcx)放置Ameroid环 ,4周后 ,将Ad .aFGF(n =7)、Ad .Null(n =6 )、PBS (n =6 )直接注射到Lcx供血区域 ,每只 10点 ,每点 10 9pfu或 10 0 μl;4周后心脏超声检测局部心功能的改善 ,体外冠状动脉造影观察侧支血管的增生 ,注射点心肌Ⅷ因子免疫组化染色检测心肌中的新生血管。 结果 :冠状动脉造影显示Ad .aFGF组较其他两组心肌中有明显的侧支血管增生 ,局部室壁功能显著提高 ;Ⅷ因子免疫组化染色显示Ad .aFGF组心肌中新生血管的密度显著高于另两组 (P <0 .0 1)。结论 :Ad .aFGF转染慢性缺血心肌后可促进侧支血管增生 。
- 顾俊彦黄盛东梅举朱泉芳张宝仁蔡凯华徐志云
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子腺病毒载体生理性
- 人酸性成纤维细胞生长因子基因重组腺病毒粘粒载体的构建
- 2002年
- 目的 :构建人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)重组腺病毒粘粒载体。方法 :抽取人胎脑组织mRNA ,经RT PCR获取aFGF基因 ,测序后将其插入腺病毒粘粒载体pAxCAwt的SwaI位点。结果 :RT PCR合成的DNA片段经克隆、测序后证实为aFGF基因 ,酶切结果显示 ,aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)中aFGF的插入方向正确。结论 :构建的aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)可用于进一步的基因治疗的研究中 。
- 章斌梅举张宝仁顾俊彦
- 关键词：人酸性成纤维细胞生长因子AFGF基因重组CHD
