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杜江: 作品数：165 被引量：650H指数：12; 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学自然科学总论化学工程更多>>

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反向点杂交快速检测流感嗜血杆菌被引量：1: 2004年; 目的　研究以分子杂交为基础的流感嗜血杆菌 (Hi)的快速检测方法。方法　将Hi探针固定在尼龙膜上 ;用标记有地高辛的细菌通用引物聚合酶链反应 (PCR)扩增不同细菌DNA ,产物分别与点有探针的膜条杂交。结果　 8种细菌均扩增出 4 6 8bp目的带 ,而人白细胞及轮状病毒DNA扩增均阴性。 6株Hi杂交阳性 ,7株其他临床常见菌杂交结果阴性。结论　反向点杂交法简便、快速、准确 ,是检测Hi的一种理想方法。; 沈德新封志纯杜江; 关键词：反向点杂交寡核苷酸探针流感嗜血杆菌

VEGF真核表达载体构建及其转染骨髓间充质干细胞的表达: 2011年; 目的构建大鼠血管内皮细胞生长因子164(vascular endothelial growth factor,VEGF164)真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)转染pcDNA3.1(-)/VEGF164基因后,外源性基因VEGF在蛋白水平的表达,为其在治疗肺组织损伤中的应用奠定基础。方法应用DNA重组技术构建VEGF164真核表达载体。采用脂质体介导的转染方法将pcDNA3.1(-)/VEGF164转染大鼠MSCs,并设立空质粒对照组(转染pcDNA3.1空载体)、脂质体对照组,用细胞免疫组化和Western blot检测大鼠MSCs中VEGF164蛋白的表达情况。结果重组质粒pcDNA3.1(-)/VEGF164测序结果与基因库(GENEBANK)中序列一致。细胞免疫组化检测显示pcDNA3.1(-)/VEGF164转染组MSCs中可见散在黄色颗粒,而空质粒对照组和脂质体对照组均未见明显黄色颗粒。Western blot检测pcDNA3.1(-)/VEGF164转染MSCs 72 h后,细胞裂解产物中VEGF含量明显高于空质粒对照组和脂质体对照组。结论成功构建了大鼠VEGF164真核表达载体,实现VEGF164基因在大鼠MSCs的成功转染,并有外源性基因及蛋白的表达,具有促进肺组织损伤修复的应用前景。; 刘茹陈春芳杜江李秋平王斌; 关键词：血管内皮细胞生长因子真核表达载体转染

反义胰岛素样生长因子Ⅱ与胞壁酰二肽联合抗肝癌实验研究: 2001年; 目的　探讨反义胰岛素样生长因子Ⅱ (反义IGF Ⅱ )与胞壁酰二肽 (MDP)联合抗肝癌作用。方法　化学合成人IGF Ⅱ 5′端部分cDNA片段 ,克隆于真核表达载体 pcDNA3 ;将反义IGF Ⅱ、MDP包裹于脂质体中 ,同时转导入体外培养的HepG2 人肝癌细胞株中、注射于裸鼠皮下人肝癌移植瘤内 ,观察两者联合应用对肝癌细胞生长的影响。结果　反义IGF Ⅱ与MDP同时转导入体外培养的HepG2 人肝癌细胞株后 ,细胞增殖处于停滞状态 ,同时注射于裸鼠皮下人肝癌移植瘤内 ,5只裸鼠中有 2只肿瘤完全消散。结论　反义IGF; 宁晓燕杨冬华徐重杜江崔俊毕向军; 关键词：胞壁酰二肽脂质体肝癌药物疗法

人组织因子基因RNA干扰载体的构建与鉴定被引量：1: 2007年; 目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序。将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况。结果测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制。结论成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。; 唐雯熊石龙杨红玲包杰杜江花少栋孙学刚封志纯; 关键词：RNA干扰载体内皮细胞

妊高征母胎界面血管紧张素Ⅱ水平测定及意义被引量：3: 2007年; 目的检测血管紧张素(ANG)Ⅱ在妊高征(PIH)及正常孕妇母血、脐带血以及胎盘母面和子面的水平,探讨PIH发病因素及胎儿宫内生长迟缓(IUGR)的发生机制。方法选取PIH和正常孕妇各30例,以ELISA法检测母血、脐带血、胎盘母面及子面组织中ANGⅡ的含量,对两样本进行t检验和Pearson相关分析。结果妊高征和正常孕母外周血ANGⅡ含量分别为(46.44±8.48)pg/ml、(32.43±5.87)pg/ml,两者差异显著(P<0.001);妊高征和正常孕母脐带血ANGⅡ含量分别为(68.83±8.68)pg/ml、(72.47±8.51)pg/ml,两者无统计学差异(P>0.05);妊高征和正常孕母胎盘母面ANGⅡ含量分别为(8.51±4.01)pg/ml、(7.76±3.47)pg/ml,两者无统计学差异(P>0.05);妊高征和正常胎盘子面ANGⅡ含量分别为(11.82±3.92)pg/ml、(9.64±2.63)pg/ml,两者差别显著(P<0.05);妊高征脐带血ANGⅡ水平与母亲外周血ANGⅡ水平相关系数为0.7379,P<0.05。结论妊高征患者外周血及胎盘子面ANGⅡ水平升高,其脐带血中的ANGⅡ水平与母血的ANGⅡ水平正相关。; 陶少华封志纯杜江; 关键词：血管紧张素妊娠高血压综合征宫内发育迟缓

新生兔机械通气肺损伤肺超微结构的改变: 目的：观察新生兔机械通气肺损伤不同时点肺组织超微结构的改变,研究机械通气肺损伤的发生机制。方法：72只新生兔随机分配在高浓度氧、低浓度氧两组,每组又分为高吸气峰压、低吸气峰压共四组进行机械通气,选取1h、6h 两个时间点...; 花少栋杜江王斌洪小杨封志纯; 文献传递

不同年龄人鼻中隔软骨细胞生物学特性观察被引量：4: 2005年; 目的观察年龄因素对体外培养的人鼻中隔软骨细胞生物学特性的影响。方法体外培养不同年龄组人鼻中隔软骨细胞,观察其生物学形态、细胞增殖周期、甲苯胺蓝异染和Ⅱ型胶原的免疫组化染色,并测定35S-Na2SO4掺入量以观察对软骨细胞蛋白多糖合成量的影响,在细胞特性和增殖特征方面进行比较。结果各组间软骨细胞的形态、传代特征及传代数、组织学检测无明显差异,细胞倍增时间随年龄增大而下降,软骨细胞蛋白多糖合成量随体外时间延长而上升,不依赖年龄。结论人鼻中隔软骨细胞生物学特性总体上不依赖年龄,其作为软骨组织工程的潜在种子细胞来源具有广泛的年龄段。; 程友黄金中李景红杜江; 关键词：鼻中隔软骨不同年龄蛋白多糖细胞增殖周期细胞特性组织学检测

富含RNA酶组织总RNA提取方法的改良被引量：7: 2005年; 目的:简化富含RNA酶组织RNA的抽提方法. 方法:健康SD大鼠10只,随机分成液氮组及改良组,每组5只,用乙醚麻醉后,分别取胰腺组织约50 mg,液氮组组织迅速放入液氮中,改良组组织放入一预装RNAguard 100μL的1.5 mL EP管中,放入-70℃冰箱保存.液氮组将胰腺组织从液氮中取出,立即放入预装适量液氮的研钵中迅速研磨至粉末(研磨过程中始终保持研钵内有适量液氮),移入另一1.5 mL EP管中,加入1 mL Trizol, 按Trizol法提取总RNA;改良组取眼科剪在酒精灯上消毒后冷却,从-70℃冰箱中取出冻存的组织,在冰盒上,加入1 mL Trizol,用眼科剪迅速剪切3 min(剪切过程组织不解冻),剧烈振荡混匀30 s,以后步骤按Trizol法. 结果:改良法抽提RNA的效果与液氮研磨法无显著差异(P>0.05),但方法简单方便. 结论:改良法提取RNA简单方便,结果稳定。; 张传仓刘卫鹏朱德新杜江封志纯; 关键词：酶组织胰腺组织抽提方法冰箱保存消毒后

儿童还原叶酸载体基因多态性与急性淋巴细胞性白血病易感性关系: 2010年; 目的研究还原叶酸载体基因(Reduced folate carrier,RFC1)A80G多态性与儿童急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)易感性的关系。方法本研究为病例对照研究,采用DNA直接测序法对30例ALL儿童(ALL组)及70名健康儿童(对照组)进行RFCl80A→G基因型的测定,分析该基因型在ALL组与对照组之间的分布差异。结果与携带80GG基因型者比较,携带80AA基因型者ALL风险增加4.5倍(OR=4.50,95%CI:1.17-17.30);以携带80GG和GA基因型者为参照,80AA变异基因型者ALL风险增加3.22倍(OR=3.22,95%CI:1.24-8.41)。结论RFC1A80G多态可能是儿童急性白血病发病的易感因素之一。; 余晶王斌兰和魁邓兰杜江杨丽华; 关键词：急性淋巴细胞白血病儿童还原叶酸载体基因多态性

新生儿常见感染病原菌的16SrDNA寡核苷酸阵列快速诊断被引量：5: 2004年; 目的　探讨PCR结合寡核苷酸阵列杂交快速诊断常见新生儿感染病原细菌方法。方法　通过对 4 0多种常见病原菌的 16SrDNA序列比较分析 ,在中间找到一段两端高度保守中间相对变异的序列。依据其保守序列设计一对通用引物 ,用于扩增细菌 16SrDNA目的基因。同时依据相对变异区域的序列设计常见的 8种病原细菌的探针 ,阵列于带正电的尼龙膜上 ,与通用引物的PCR产物杂交 ,在一个反应体系中 1次可检测出标本中可能存在的常见致病菌。结果　设计的通用引物能有效扩增出常见的细菌目的序列。实验结果表明寡核苷酸阵列均能特异地与其检测细菌的通用引物PCR产物杂交 ,而不与其它所试细菌通用引物PCR产物杂交 ,说明探针具有很强的特异性。进一步采用寡核苷酸阵列对临床分离的菌株进行鉴定 ,以细菌自动鉴定仪做对比 ,结果表明寡核苷酸阵列能检出常见的 8种病原菌。; 沈德新杜江封志纯; 关键词：寡核苷酸病原菌通用引物病原细菌新生儿感染 PCR产物

杜江

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