姜成刚 作品数:77 被引量:186 H指数:7 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 哈尔滨市科技攻关计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染对仔猪致病性的评估 被引量:24 2007年 本研究通过猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强毒共感染3周龄健康仔猪来评价其致病性。试验动物随机分为3组,空白对照组(n=3头),PRRSV单独感染组(n=3头),PCV2和PRRSV共感染组(n=6头),从而比较相互之间的差异。通过临床症状、病理学变化、病原学和血清学检查,对二者混合感染仔猪的致病性进行了研究。结果表明PCV2和PRRSV共同感染能引起仔猪断奶后多系统消耗性综合征,表现为淋巴组织肿大、出血,肉芽肿性炎症,坏死性肝炎,仔猪消瘦、生长缓慢等特征性病变;混合感染能加重PRRSV对仔猪引起的间质性肺炎的严重程度。混合感染可以出现支气管肺炎和明显的肝病变,淋巴结多呈界限明显的块状出血等典型病变。 温永俊 吴国军 蔡雪辉 刘永刚 王洪峰 姜成刚 尹训南关键词:猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征 猪链球菌乳酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的反应原性研究 2015年 为了验证双向电泳筛选出的7型猪链球菌WH分离株免疫相关蛋白乳酸脱氢酶的反应原性,本实验采用克隆表达的方法对其进行研究。根据质谱鉴定的NCBI登录号查找乳酸脱氢酶基因序列,并设计特异性引物,对乳酸脱氢酶基因进行扩增,克隆入p ET30a载体,构建重组质粒p ET30a-LDH,测序后转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析结果显示表达的重组融合蛋白相对分子量为41ku;Western blot分析结果显示该重组蛋白可与7型猪链球菌WH分离株多克隆抗体发生特异性血清学反应。这表明表达的重组LDH蛋白具有良好的反应原性,为预防和控制猪链球菌病提供有效的疫苗候选分子奠定基础。 高明明 王淑杰 王俊 金家民 张璐 刘永刚 李爱东 陶冶 李莉 姜成刚 王刚 申红关键词:猪链球菌 乳酸脱氢酶 反应原性 原核表达 猪链球菌对大环内酯类药物耐药机制研究 随着养猪业的迅猛发展,猪链球菌病也在世界范围内广泛传播。猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种重要人畜共患病,尤其是血清2型猪链球菌,不仅对猪的致病性最强,而且可感染特定人群并致死,给人类公共卫生和养猪业带来巨大影响。猪链球菌... 姜成刚关键词:猪链球菌 大环内酯类药物 耐药性 耐药机制 耐药基因 慢病毒跨膜蛋白的研究进展 被引量:1 2009年 姜成刚 周建华 华育平 刘娣关键词:慢病毒 跨膜蛋白 囊膜蛋白 抗原变异 基因变异 氨基酸序列 地塞米松对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪的影响 被引量:1 2015年 为研究地塞米松(DEx)对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP—PRRSV)感染仔猪造成的免疫系统和呼吸系统损伤的影响,本实验在断奶仔猪感染HP-PRRSVHuN4株前后,肌肉注射不同剂量的DEX。观察临床症状,检测其免疫系统相关指标的变化。结果显示:不同剂量DEX注射组实验猪均表现典型临床症状,虽然其外周血中的促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF—d水平降低,CD4+CD8‘T淋巴细胞亚群比例较HuN4单独感染组升高,CD8+CD4-T细胞比例较HuN4单独感染组降低,但DEX注射组仔猪体温始终维持在40℃-42℃,肺部、胸腺和淋巴组织病变加重,死亡率达到100%(10/10),而HuN4单独感染组仔猪死亡率仅为25%(1/4)。表明DEX对HP—PRRSV感染的断奶仔猪虽具有一定的抑制炎症反应作用,但加重了HP-PRRSV感染的不利影响。本研究为全面防控HP—PRRSV提供新的实验依据。 佟杰 王刚 于颖 张冲 常亚飞 刘永刚 涂亚斌 汤艳东 姜成刚 王淑杰 蔡雪辉关键词:地塞米松 促炎性细胞因子 猪链球菌对红霉素的耐药表型及耐药机制的研究 目的:研究猪链球菌对红霉素的耐药表型和耐药机制。方法:从发病猪体内分离并鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌6株,用双纸片法确定耐药猪链球菌的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因... 李艳华 姜成刚 蔡雪辉 童光志 佟恒敏关键词:猪链球菌 红霉素 耐药表型 耐药机制 文献传递 中国株EIAV S2基因逆向突变感染性克隆的构建及体外感染性评价 被引量:3 2009年 以中国株EIAV的驴强毒株EIAVDV115与疫苗株EIAVFDDV15的S2基因变化规律为依据,利用反向遗传技术对EIAV弱毒疫苗株全基因组感染性克隆pFDDV3-8的S2基因区进行逆向突变,构建了含有强毒株EIAVDV115S2基因区内4个稳定点突变的克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5,将该质粒转染FDD后进行体外继代盲传,经RT-PCR、逆转录酶活性、间接免疫荧光等检测后,显示经EIAV克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5转染的FDD盲传3代后,可在转染的FDD细胞培养物的上清液中检测到EIAV逆转录酶活性;该细胞培养物经RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈EIAV阳性;在电镜下可观察到典型EIAV粒子。证明已成功拯救经EIAVS2基因逆向突变后的衍生病毒vpFDDVS2r1-3-4-5。比较vpFDDVS2r1-3-4-5衍生病毒与亲本克隆衍生病毒的复制动力学,表明前者的复制比后者略滞后。以上结果提示,对疫苗株S2基因的突变未明显影响EIAV的体外复制。 高旭 姜成刚 韩秀娥 赵立平 沈荣显 相文华 周建华关键词:马传染性贫血病毒 S2基因 感染性克隆 免疫抑制对EIAV弱毒疫苗免疫马体内疫苗弱毒株载量的影响 被引量:4 2008年 为了研究马传染性贫血弱毒疫苗EIAVFDDV在体内的生物学特性,特别是在免疫马血浆中低拷贝存在状态的形成原因,使用连续给予地塞米松的方法,对EIAVFDDV免疫马匹进行了免疫功能抑制.连续给药10天后,以植物血凝素(PHA)作为刺激原的淋巴细胞非特异性增殖实验表明,实验马匹的免疫系统功能受到了明显抑制.使用实时RT-PCR对免疫抑制前后实验马匹体内EIAVFDDV的载量进行了定量检测.结果显示,EIAVFDDV免疫马匹体内的病毒载量在2匹马中未见升高,1匹马体内略有增高,但仍处于EIAVFDDV在免疫马匹体内载量的正常范围.作为对照,强毒株隐性携带马的病毒载量提高了约25000倍,并出现了典型的临床症状.实验结果提示,致弱后病毒特有的生物学特性,而非免疫压力,是EIAV疫苗株在宿主血浆中低拷贝存在的主要原因.同时,在免疫系统功能受抑制状态下,疫苗株在免疫马体内仍然表现出了相对稳定的低拷贝复制状态,进一步显示了EIAVFDDV在应用中的安全性. 马建 姜成刚 林跃智 郭亮 郭巍 孔宪刚 沈荣显 邵一鸣 张哓燕 周建华关键词:减毒疫苗 免疫抑制 病毒载量 大环内酯类药物对链球菌耐药性及耐药机制研究进展 菌(Streptococcus)是化脓性球菌的一类常见的细菌,广泛存在于自然界和人及动物粪便、鼻咽部以及泌尿生殖道,致病性链球菌可引起多种动物和人的化脓性炎症.尤其是肺炎链球菌和猪链球菌对大环内酯类药物的耐药性日趋严重,... 姜成刚 李艳华 蔡雪辉 佟恒敏关键词:链球菌 耐药性 耐药机制 大环内酯类药物 中药复方制剂抗猪传染性胃肠炎病毒活性的研究 被引量:18 2004年 通过体外细胞培养试验,采用3种作用方式:先加药物后加病毒、药物和病毒先作用一段时间后加入、先加病毒后加药物,较系统地研究了抗猪传染性胃肠炎病毒有效单味中草药板蓝根、鱼腥草和败酱草所组成的复方制剂对细胞毒性强度及对猪传染性胃肠炎病毒抗吸附、直接灭活和抑制复制作用机理,筛选出同时具有3种方式抗病毒的有效复方制剂,为筛选抗病毒的有效中草药制剂提供新方法。 姜成刚 张秀英 龙忠臣关键词:中药复方制剂 传染性胃肠炎病毒