叶寅
- 作品数：19 被引量：148H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金河北省科技厅科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 天花粉蛋白基因克隆、序列分析及在Ecoli中表达
- 1992年
- 采用聚合酶链式反应方法(PCR)以栝楼(Trichosanthin Kirilowii Maximowicz)基因组DNA为模板,扩增出了两DNA片段:一个为编码成熟天花粉蛋白的DNA片段(0.741 kb称gene_2);另一个则包含gene_2和编码23个氨基酸组成的分泌型信号肽及19个氨基酸组成的羧基端延伸因子的DNA片段(0.867 kb称gene_1).将gene_1gene_2分别克隆到载体pUC18上并进行序列分析.与已报道的序列相比其同源性达99.3%.Western blotting检测证明gene_2在E.coli中能表达天花粉蛋白的融合蛋白,gene_1则不能表达,原因在进一步研究之中.
- 汪丽琴叶寅王永潮姚启智田波
- 关键词：天花粉蛋白基因聚合酶克隆
- 藻类污染生物防治新策略被引量：49
- 2001年
- 韩继刚孟颂东叶寅田波
- 关键词：藻类污染生物防治水体
- 黄瓜花叶病毒外壳蛋白质进入叶绿体与症状发生的关系被引量：15
- 1992年
- 由感染黄瓜花叶病毒(CMV)、健康和转外壳蛋白(CP)基因的烟叶以原生质体法制备纯化的叶绿体。经SDS—PAGE电泳,银染色,比较其蛋白质图谱。用CMV外壳蛋白游离亚基制备的抗血清进行Western blotting。结果发现:1.CP存在于CMV侵染的烟叶绿体中。2.叶绿体中CP的浓度和花叶症状严重程度呈正相关;3.表达CP的转基因烟草叶绿体中未测出CP存在。根据以上结果,认为CMV侵染的烟花叶症状产生与CP进入叶绿体有直接相关性。
- 朱水芳叶寅赵丰田波John RandleR.I.B.Francki
- 关键词：黄瓜花叶病病毒叶绿体
- 转基因油菜中核酶介导的对花椰菜花叶病毒的高度抗病性被引量：13
- 1997年
- 设计了特异切割花椰菜花叶病毒(CaMV,ds DNA病毒)35S RNA的锤头型核酶基因(Rz);同时将核酶保守区内的一个G碱基以U代替构成核酶突变体(mRz)作为对照.体外切割实验表明.Rz可按设计要求高效特异地切割355 RNA,而mRz则完全没有切割活性.将Rz和mRz克隆到pROK2构建成植物表达载体pROK2-Rz和pROK2-mRz.采用转化下胚轴法转化油菜,通过筛选获得转Rz和mRz基因油菜植株、攻毒实验证明Rz当代转化植株表现出对CaMV的高度抗病性,75%的植株不表现任何症状,也测不出CaMV的存在,其抗病植株的T_1后代的抗病性按孟德尔定律3:1分离.mRz当代转化植株及其T_1后代植株只具有极其微弱的减轻症状的作用.
- 王苏燕叶寅赵淑珍田波
- 关键词：油菜转基因油菜花椰菜花叶病毒抗病性
- 番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达
- 1992年
- 香木瓜环斑病毒(PRV)外壳蛋白(CP)基因cDNA克隆到pUC18上构建成大肠杆菌(Escherickia coli)表达载体。Westrn blot检测结果表明该表达载体在B.coli DH5 a中有两种特异蛋白表达,分于量为34 kd的蛋白与推测的表达产物大小相符,且与PRVCP的一个“组分”大小相似;面分子量为16 kd的蛋白可能是34 kd蛋白的降解物或者是PRV CP基因不完全表达产物。
- 叶寅叶长明骆学海田波范怀忠
- 关键词：番木瓜环斑病毒CP基因大肠杆菌
- 番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因的构建被引量：23
- 1991年
- 以番木瓜环斑病毒黄斑分离物(PRV—YS)RNA为模板,在人工合成的两端引物引导下,反转录合成了外壳蛋白(CP)基因cDNA第一链并通过PCR扩增获得双链cDNA。用重组有cDNA的pUC19转化E.coli DH52,采用双脱氧链终止法进行了cDNA序列分析,结果表明CP基因为861nt,与文献报道的相比,同源率90%,且少连续的6nt。
- 叶长明叶寅骆学海田波范怀忠
- 关键词：番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因
- 植物抗病毒基因工程研究进展和展望被引量：6
- 1992年
- 利用植物的转化系统将外源基因导入植物体内并插入到染色体上,经过组织培养及植株再生,可获得插入有外源基因并具生物活性功能且稳定遗传的工程植株。对不同植物,外源基因的导入系统不同。
- 叶寅田波
- 关键词：植物抗病毒基因工程
- 卫星RNA研究新进展:结构与功能表达被引量：1
- 1992年
- 植物病毒卫星通常是指那些如果没有特定辅助病毒的帮助就不能复制,而它本身对于辅助病毒的复制是不必需的,且与辅助病毒的基因组无序列同源性的一类RNA分子。到目前为止,已报道有六组共26种植物病毒带有卫星。这些植物病毒卫星有的具有编码自身外壳蛋白的遗传信息,称卫星病毒;有的无此编码功能称为病毒卫星RNA。病毒卫星RNA在其发现的早期,其生物学功能尚不为人重视。然而,七十年代早期,在法国阿尔萨斯爆发的由黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV)侵染引起的番茄作物坏死病被确定与CMV卫星RNA有关,至此。
- 叶寅郝麟惠田波
- 关键词：卫星RNA植物病毒
- 番木瓜环斑病毒Ys CP基因的序列分析和植物表达载体的构建被引量：5
- 1997年
- 用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒（PRV）Ys株系外壳蛋白（CP）基因的序列，结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现，YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高（94．44％～97．68％），而与国外株系或分离物CP基因的同源性较低（88．88％～92．70％）。CP基因之间的差异主要靠近基因5’端，特别是在YSCP基因第63nt后连续缺失6nt，SmGTHAI和SRI的CP基因也在此处缺失3nt。将YsCP基因插入中间质粒pRokⅡ的CaMV35S启动于和nos终止序列之间形成CP基因的植物表达载体pRPCY，通过三亲交配使pRPCY进入农杆菌LBA4404，与其中的pAL4404构成双元载体系统。
- 叶长明范怀忠叶寅田波
- 关键词：番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因植物表达载体
- 水稻条纹叶枯病毒基因组含vRNA_2 ORF片段的克隆、序列分析及其在原核中的表达被引量：12
- 1997年
- 水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus,RSV)是柔丝病毒组的典型代表,其基因组由4种ss-RNA及相应低含量的4种dsRNA组成,其中,RNA1为负链性质,编码RNA多聚酶;RNA2～4均为双义编码性质(ambisense-coding strategy)。为研究该病毒RNA非编码区等调控元件在病毒基因组双义表达过程中的功能,采用反转录-聚合酶链式反应方法(RT-PCR),扩增出覆盖RSV RNA2 5′末端非编码区、vRNA2OrFT区、基因间非编码区及vcRNA2 ORF部分区域的REPI片段(1 159bp)。将此扩增产物克隆于载体pGEM-7Zf(+)的Sma Ⅰ位点上并进行了核苷酸序列测定。结果表明,中国分离物与日本分离物的REPI片段具极高的序列同源性。
- 王晓红叶寅王苏燕田波
- 关键词：水稻条纹叶枯病毒核苷酸无性系
