罗杰 作品数:14 被引量:64 H指数:5 供职机构: 华中科技大学生命科学与技术学院中英 HUST-RRes 基因工程和基因组学联合实验室 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 化学工程 更多>>
种子中Puroindoline蛋白的SDS-PAGE分析 被引量:2 2005年 Puroindoline蛋白是小麦中特殊的TritonX-114可溶性蛋白质,对小麦籽粒硬度有着决定性的影响。从二倍体、六倍体小麦材料及小麦近缘种粗山羊草成熟种子中提取Puroindoline蛋白,就对该蛋白的SDS-PAGE及染色条件进行了优化和讨论,建立了浓缩胶T(凝胶浓度)为4、C(交联度)为2.6、电泳电压为128V;分离胶T为13.5、C为2.6、电泳电压240V,分离胶电泳时间1.5h的结果稳定且重复性好的优化的SDS-PAGE条件。同时为降低电泳染色的实验成本,简化实验步骤,用蓝染法代替常用的银染法,并获得了良好的效果,为小麦中Puroindoline蛋白质的进一步研究奠定了实验基础。 霍华蕾 郭坚 罗杰 何光源关键词:籽粒硬度 种子 小麦 细胞通透性的改变及其应用 被引量:14 2001年 罗杰关键词:细胞通透性 酶活测定 蛋白质提取 生物转化 补料培养与溶氧控制联合应用对红豆杉细胞培养的影响(英文) 2002年 为进一步提高红豆杉 (Taxuschinensis (Pilg.)Rehd .)细胞培养过程中紫杉醇的产量 ,采用细胞悬浮培养方法研究了补料培养与溶氧控制联合应用对紫杉醇产量的影响。 5L反应器中补料培养研究表明 ,培养过程中第 16天添加含 2 0g/L蔗糖的补料培养液有利于细胞的生长及紫杉醇的合成。 2 0L反应器中补料培养的研究结果表明 :2 0 %饱和度培养时紫杉醇含量最高 (0 .98mg/gDW) ,但 4 0 %~ 6 0 %溶氧饱和度能提高紫杉醇的产量。进一步研究表明 ,细胞在 6 0 %溶氧饱和度培养 2 0d后转入 2 0 %溶氧饱和度继续培养 12d ,能显著提高紫杉醇产量。补料培养与溶氧控制联合应用时 ,2 0L反应器中红豆杉细胞培养紫杉醇产量可达 18.7mg/L。 罗杰 梅兴国关键词:红豆杉 细胞培养 紫杉醇 粗山羊草高分子量谷蛋白亚基组成分析 被引量:5 2007年 为了发现能够用于小麦品质改良的优异高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS),应用SDS-PAGE技术分析了47份粗山羊草Glu-Dt1位点的HMW-GS组成,分别检测到5种x-型亚基(1.1t、1t、1.5t、2t、3t)和4种y-型亚基(10.1t、11t、12t、12.4t)。其中,1Dx1.1t是1种新的x-型亚基,它的迁移率比普通小麦的1Ax1亚基稍慢,这是目前在粗山羊草中发现的分子量最大的HMW-GS。供试粗山羊草中有8种HMW-GS组合类型:1.1t+11t、1t+11t、1.5t+12t、2t+10.1t、2t+11t、2t+12t、2t+12.4t和3t+11t。其中,1.1t+11t和2t+12.4t未见报道。 张常娥 刘勇 方斌 罗杰 何光源关键词:粗山羊草 高分子量谷蛋白亚基 SDS-PAGE 产脂肪酶假丝酵母的筛选及其研究 被引量:16 2001年 从武汉油污样中分离获得一株高产脂肪酶的假丝酵母R 2 .发酵研究表明 ,最适培养基为蛋白胨2 0 g/L,蔗糖 10 g/L ,橄榄油 5 g/L ,(NH4 ) 2 SO4 1g/L ,MgSO4 ·7H2 O 1g/L ,K2 HPO4 1g/L和吐温 80 1g/L ;最适产酶条件为 30℃ ,初始 pH7.0 ,转速 2 0 0r/min ,培养 32h .最高产酶活力达到 1437u/mL ,酶作用最适温度40℃ ,最适 pH7.5 . 金波 罗杰 余斐 Mei Xingguo 梅兴国关键词:脂肪酶 假丝酵母 产酶条件 培养基 蛋白胨 蔗糖 前体和诱导子对紫杉醇合成影响的优化研究 被引量:6 2002年 用响应面方法对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的几种前体及诱导子进行了优化 .首先 ,用部分因素实验对苯丙氨酸、脱落酸、硝酸银、苯甲酸钠、醋酸钠、壳聚糖、甘氨酸对紫杉醇含量的影响进行评价 ,并找出其中主要影响因子壳聚糖、硝酸银和脱落酸 ;其次 ,用最速上升法逼近最大响应区 ;最后用中心组合设计和响应面分析确定主要影响因子的最适浓度 .经优化后的紫杉醇体积质量达到 6 0 .5mg/L ,较优化前提高 1倍 .利用以上结果进行 5L反应器放大培养 ,紫杉醇体积质量达 5 4 .6mg/L . 罗杰 梅兴国关键词:紫杉醇 前体 诱导子 抗癌药 转基因小麦株系后代遗传稳定性的快速确证 被引量:3 2004年 转基因材料的遗传稳定性是基因工程成败的关键内容之一 ,快速确证其多代遗传特性是进行大量后代材料分析的技术保证。该文主要研究了从半粒转基因小麦B73- 6 - 1种子中提取小麦基因组DNA的方法 ,并利用多重PCR技术以提取出的DNA作为模板对外源基因进行扩增 ,从而鉴定外源基因的遗传特性。对提取出的DNA进行琼脂糖凝胶电泳分析 ,实验结果表明 ,提取出的DNA产量和质量较高 ,而PCR的结果表明 ,所研究的方法可以同时扩增出两个外源基因 ,并利用该方法快速确证了转基因小麦B73- 6 - 1外源udiA基因和bar基因的遗传稳定性。 马明 何光源 李克秀 罗杰 常俊丽 陈明洁关键词:转基因小麦 DNA提取 外源基因 多重PCR 山羊草四个组高分子量麦谷蛋白亚基组成分析 被引量:1 2004年 利用SDS PAGE技术对山羊草属 1 8个种的 4 6份材料进行高分子谷蛋白亚基电泳分析 .1 8个种各电泳出 2~ 5条带 ,共有 2 4种不同的电泳条带 ,2 6种不同的麦谷蛋白亚基类型 ,每个种有 1~ 3种类型 .山羊草与小麦的麦谷蛋白亚基存在着较大的差异 。 罗杰 林刚 刘勇 何光源关键词:山羊草属 高分子谷蛋白亚基 SDS-PAGE 溶氧水平对红豆杉细胞悬浮培养的影响研究 被引量:7 2001年 The effect of dissolved oxygen controlled level on the taxol production by suspended cell culture of Taxus chinensis was examined in shake flasks and in a 20L aerated and agitated bioreactor with a six\|flat\|bladed turbine.It was found in shake flasks that oxygen supply exhibited significant influence on the production of taxol.Further investigation in bioreactor showed that noly 1.5mg/L taxol was produced when DO(dissolved oxygen)level was 20%.Taxol production increased when DO level was increased to 40%~60%.Moreover,taxol accumulation was remarkably improved by the cultivation of cells initially at the DO level of 60% during the growth phase for 14 days followed by changing the DO level to 20%~40% during the taxol production phase for another 10 days.An optimum taxol level of 7.2mg/L was obtained by the dissolved oxygen controlled process. 罗杰 余斐 刘凌 吴诚德 梅兴国关键词:红豆杉 紫杉醇 细胞培养 红豆杉细胞培养产物提取策略及其对紫杉醇的影响 被引量:3 2003年 研究了硫酸铈铵及原位提取对红豆杉细胞悬浮培养过程中细胞生长、紫杉醇合成及释放的影响。红豆杉细胞悬浮培养过程中培养第 12 d添加 2 mg/ L 硫酸铈铵能获得最大紫杉醇产量 8.3mg/ L,其中 2 .4 mg/ L 释放到细胞外 ,分别为对照组的 4倍及 12倍。同时添加 2 mg/ L 硫酸铈铵、5 %油酸 (v/ v)时胞外紫杉醇产量达到 9mg/ L,为对照组的 4 5倍。将硫酸铈铵及原位提取与补料培养相结合 ,最高紫杉醇产量可达 2 4 .5 mg/ L,其中 6 0 %释放到胞外。 罗杰 刘凌 胡道伟关键词:红豆杉 紫杉醇