王慧萍 作品数:58 被引量:192 H指数:7 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 建筑科学 更多>>
利用磁珠分离联合MALDI-TOF-MS技术判定早期IgA肾病的病理表现 2013年 目的利用尿蛋白质组学的新方法,寻找无创性尿液标记物,用以判断临床早期IgA肾病的病理表现。方法对55例早期IgA肾病患者[其中23例病理表现较重(重病理损伤组),32例病理表现较轻(轻病理损伤组)]及14例病理检查完全正常者(正常对照组)的尿液,利用阳离子磁珠分离技术联合基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)分析尿液蛋白质质谱。结果建立了3个尿蛋白质/多肽模型。发现潜在的生物标志物及其诊断模型可以区分重病理损伤组和轻病理损伤组,其敏感性和特异性分别为90.48%和96.77%。区分轻病理损伤组和正常对照组的诊断模型,其敏感性和特异性分别为93.55%和85.71%。区分重病理损伤组和正常对照组的诊断模型,其敏感性和特异性分别为100%和92.86%。结论利用磁珠分离联合MALDI-TOF-MS的尿蛋白质组技术在判定早期IgA肾病的病理表现显示出较大潜力。 邵丽娜 何强 余捷凯 王慧萍 陈江华关键词:IGA肾病 磁珠 Decorin在糖尿病肾病中的作用 李红 张哲 董凤芹 姚航平 吴芳 寿成珉 朱峰 王慧萍 本研究将突破多年来糖尿病肾病只有药物治疗或到晚期只有经透析治疗的局限性。开发出独特的对糖尿病肾病的治疗手段和方法。正准备申请专利,同时进一步完善基础研究,在时机成熟的时候申请进入临床使用,可望成为具有我国自主知识产权的专...关键词:关键词:糖尿病肾病 DECORIN 基于慢病毒的SHARP-2特异的RNA干扰延长肾移植受者大鼠存活时间 被引量:3 2009年 目的研究SHARP-2(rat enhancer of split-and hairy-related protein-2)特异性基因沉默后对白细胞介素2(IL-2)和1干扰素(IFN-γ)基因表达及肾移植受者大鼠存活时间的影响。方法采用基因重组、转染、共转染等分子生物学方法将针对SHARP-2的短发夹式RNA干扰序列导入到第3代自失活慢病毒载体Vira Power packaging mix,以构建重组慢病毒;有限稀释法确定病毒滴度;实时定量PCR法研究基因表达变化;原位大鼠肾移植模型研究SHARP-2基因沉默后受者存活时间变化。结果在正常大鼠肾脏细胞中,重组慢病毒LV-SHARP-2iC对SHARP-2的基因沉默效率达84%。在复感染指数(MOI)=20时,用spinoeulation法可使57%的T细胞受转染。在活化T细胞中,SHARP.2基因沉默后对IL-2和IFN-γ的基因表达抑制率分别达61.3%和68.7%。和空白对照以及随意序列对照组相比,5×10^7TUSHARP。2特异的RNA干扰重组慢病毒LV-SHARP-2iC灌注供肾后,肾移植受者大鼠的中位存活时间延长4~5d。移植肾局部组织分析发现SHARP-2基因沉默效果达61%,IL-2和IFN-γ的基因表达则分别下降了47.3%和58.2%。结论成功构建了以第3代自失活慢病毒为载体的、针对SHARP-2基因的短发夹式RNA干扰重组病毒LV—SHARP-2iC,该体系能使SHARP-2基因表达有效沉默,进而抑制活化T细胞中与排斥相关的IL-2和IFN-γ的基因表达,在肾移植模型中延长受者大鼠存活时间。 寿张飞 肖华婴 徐义芳 王远志 杨毅 姜虹 王慧萍 陈莹 李一文 陈江华关键词:慢病毒属 慢病毒感染 RNA干扰 肾移植 白细胞介素2 肾小球上皮细胞蛋白1在肾脏疾病中的表达改变及临床意义 目的:分析肾小球上皮细胞蛋白1(GLEPP1)在不同病理类型原发性肾脏疾病中的分布及表达情况,探讨其临床意义。方法:研究对象为92例病理证实的原发性肾小球疾病患者,其中微小病变10例,FSGS 10例,IgA 50例,膜... 王慧萍 金娟 田炯 茅幼英 陈江华文献传递 肾移植受者术前血清抗血管内皮细胞抗体与急性排斥反应的关系 被引量:1 2009年 目的研究肾移植受者术前血清抗内皮细胞抗体(AECA)的水平对术后6个月内发生急性排斥(AR)的预测作用。方法将1998年12月至2003年8月在本中心行同种异体肾移植并存有血标本的495例受者纳入研究。回顾总结术后6个月内AR发生情况及相关资料。健康对照(阴性对照)40例。采用细胞一ELISA法,以EA.hy926细胞(人脐静脉内皮细胞株)为底物榆测血清AECA水平。结果采用比值表示,P(患者)/N(阴性对照)=(A患者标本—A空自对照)/(A阴性对照—A空自对照)。P/N大于健康对照组均值加2个标准差者为阳性。结果495例患者血清中,AECA阳性93例(18.8%)。维持血透时间大于12个月患者血清AECA水平(1.43±0.37)显著高于未透析患者(1.27±0.32,P=0.013)及维持血透时间≤12个月患者(1.31±0.32,P=0.029)。血清AECA水平与透析时间呈正相关(r=0.218,P=0.018)。AECA阴性、阳性患者术后6个月内AR发生率分别为23.4%、38.7%,差异有统计学意义(P=0.002)。AECA阳性患者细胞性AR、体液性AR的发生率均显著升高(P=0.035,P=0.002)。多元Logistic回归分析显示AECA阳性、群体反应性抗体(PRA)≥10%、高淋巴毒反应为发生AR的独立危险囚素,优势比(OR)分别为2.056、1.751、1.764(P值分别为0.004、0.029、0.050)。结论肾移植受者术前血清AECA阳性预示术后发生急性排斥反应的风险增加:术前血清AECA水平随透析时间延长而升高。 韩飞 吕蓉 金娟 吴建永 陈莹 王慧萍 陈江华关键词:肾移植 内皮细胞 抗体 急性排斥反应 甲巯咪唑致ANCA相关性小血管炎肾损害并文献复习 <正>患者,女,22岁,湖南省常德市汉寿县工人,高中学历,因'甲状腺功能亢进',6年来口服甲巯咪唑(赛治片,Thiamazole Tablets)10mg qd,近半年来改为为5mg qd,每月化验甲状腺功能和血常规。8... 瞿立辉 梁倩 李夏玉 王慧萍 姜虹 陈江华文献传递 骨髓瘤管型肾病合并晶体及间质异物肉芽肿形成 <正>病例报道患者,男性,61岁,退休职工,因'咽痛、发热1周,尿量减少5天'入院。患者入院前一周开始咽痛、咳嗽,体温达38.0℃,伴恶心、呕吐及尿量减少,每日约100-500mL,SCr:456mmol/L,来院。入院... 李恒 王慧萍 毕艳 陈江华文献传递 结直肠腺瘤的微卫星不稳定状态与相关基因表达的研究 被引量:7 2004年 应用微切割-聚合酶链反应-单链长度多态性(PCR SSLP)的方法,检测59例62个结直肠腺瘤,包括散发性腺瘤及家族性腺瘤性息肉病(FAP)腺瘤在BAT26等16个微卫星基因座在结直肠腺瘤标本的微卫星不稳定性(MSI)状态;并应用免疫组织化学SP法检测β 连接素(β catenin)、TP53、BAX等的表达情况,初步探讨错配修复(MMR)基因在结直肠癌发生的早期即腺瘤阶段的作用及其意义。结果显示:(1)腺瘤16个基因座的总MSI发生率为14.4%;同一病人的不同腺瘤在某些相同的基因座表现出不同的MSI状态;(2)5例FAP病人均表现为MSI L,其中有3例在hMSH3基因座表现为MSI阳性;(3)β 连接素在腺瘤和腺癌细胞膜阳性率分别为42.9%和11.4%,表达差异有显著统计学意义(P<0.001);(4)TP53、D5S346、TCF4(A)9、TGFβRⅡ(GT)3、TGFβRⅡ(A)10等微卫星基因座的MSI改变与相应的免疫组织化学指标TP53、β 连接素、TGFβRⅡ等在腺瘤及腺癌中的阳性表达有密切关系。可以推断:(1)在结直肠癌发生发展的早期即腺瘤阶段即可表现微卫星不稳定性,腺瘤中存在1p染色体的改变、APC基因的改变及TGFβ信号转导途径的异常;(2)随着腺瘤向腺癌的进展,β 连接素的阳性着色由细胞膜转移至细胞内,而且胞浆阳性强度增加;可以推断腺瘤中APC β 联蛋白 TCF4信号转导途径的异常。 程蕾 王慧萍 黄琼 来茂德关键词:结肠直肠癌 腺瘤 免疫组织化学 微卫星不稳定性 结直肠腺瘤的微卫星不稳定状态与相关基因表达的研究 程蕾 王慧萍 黄琼 来茂德 应用微切割—聚合酶链反应—单链长度多态性(PCR-SSLP)的方法,检测59例62个结直肠腺瘤,包括散发性腺瘤及家族性腺瘤性息肉病(FAP)腺瘤在BAT26等16个微卫星基因座在结直肠腺瘤标本的微卫星不稳定性(MSI)状...关键词:关键词:腺瘤 免疫组织化学 微卫星不稳定性 结肠直肠癌 慢性移植肾肾病不同病理类型的预后 【目的】慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)是晚期移植肾失功的首要原因,其病因复杂。Banff2005在病理诊断上删除了CAN这一大的概念,引入了两个新的病理类型:慢性抗体... 王佳鑫 王仁定 王慧萍 周静仪 江艳 陈江华