王英英
- 作品数:147 被引量:140H指数:9
- 供职机构:中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 一株鳢科鱼源弹状病毒的分离及鉴定被引量:10
- 2013年
- 为研究近来鳢科鱼类疫病频发的病因,实验对采集的患病杂交鳢病料分别从细菌学和病毒学两方面进行病原分离和鉴定。排除细菌感染的可能后,通过细胞培养技术、回归感染实验、电镜技术、分子生物学技术等进行病毒学分析,最终分离到一株弹状病毒,命名为HSHRV-C1207(Hybrid Snakehead Rhabdovirus-C1207)。实验结果显示,该病毒在EPC、FHM、GSB、SFC、CIK等8种细胞中都能复制,并对其中6种细胞产生明显的细胞病变效应(CPE)。用分离的病毒进行回归感染实验,可使感染的杂交鳢复制出自然发病鱼的相同症状,且死亡率达90%。感染病料组织液的EPC细胞固定后经电镜观察,发现细胞质内有大量子弹状病毒聚集,直径约60 nm,长度约为160 nm,形态和排列方式与已报道的鱼类弹状病毒相似。参考OIE中传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)的检测引物及根据乌鳢弹状病毒(SHRV)、鳜鱼弹状病毒(SCRV)、比目鱼弹状病毒(HIRRV)的G蛋白基因设计特异性引物,分别对自然发病病料组织、接种病料组织的细胞进行RT-PCR扩增,仅针对SCRV的引物能扩增出大小约350 bp的片段。对HSHRV-C1207株的G基因进行序列测定和分析,结果表明其核苷酸序列同SCRV和SHRV的同源性分别为93.8%和20.4%,推导的氨基酸序列同源性分别是93.7%和18.3%。用G基因推导氨基酸序列与其它弹状病毒的G蛋白进行系统进化树分析,表明该毒株与水泡性病毒属聚为一支,其中与SCRV的亲缘关系最近,而与属于诺拉弹状病毒属的SHRV相距甚远,可能为SCRV的变异株或一个新的毒株。
- 曾伟伟王庆王英英刘春谭爱萍石存斌吴淑勤
- 关键词:杂交鳢弹状病毒
- 一种便于排污的鱼缸
- 本发明公开了一种便于排污的鱼缸,其包括缸体,所述缸体的底壁整体向下凹陷,且在凹陷处设有排水孔,所述排水孔设有阀门机构。本发明的缸体底壁整体向下凹陷,并在凹陷处设置排水孔,这样的话,在养殖鱼类过程中所产生的污物就可以沉积并...
- 李凯彬刘春吴淑勤王芳王庆石存斌常藕琴梁慧丽曾伟伟王英英马必勇林韶丰
- 检测罗非鱼血清中抗罗湖病毒IgM特异性抗体间接ELISA方法的建立及应用
- 前期研究表明罗非鱼湖病毒(Tilapia lake virus,TiLV)基因节段8(S8)编码蛋白是一种具有高免疫原性的结构蛋白,大小约为20kD,暂命名为VP20.目前,由于缺乏TiLV免疫原性抗原和易获取的抗罗非鱼...
- 曾伟伟胡虎子王英英王庆尹纪元李莹莹吴杰兴高彩霞张德峰刘春任燕石存斌
- 关键词:免疫球蛋白M
- 剑尾鱼脑细胞系的建立及细胞色素P4501A的诱导表达被引量:2
- 2013年
- 为了构建剑尾鱼脑细胞系并探讨其细胞色素P4501a(CYP1A)基因的诱导效应,实验通过胰蛋白酶消化法对剑尾鱼脑组织进行体外培养,经连续继代培养,建立了可稳定传代的脑细胞系,命名为SFB。SFB最适培养液为含有15%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12和L-15等比混合培养液,培养条件为27℃,5%CO2。生长特性研究表明,第65代细胞的群体倍增时间为43.048h,显示出旺盛的生长和分裂能力。染色体分析发现,培养细胞的染色体众数为48条,SFB核型公式为2n=2st+46t,臂指数(NF)=48,与剑尾鱼一致。诱导实验表明,SFB在10-8~10-5mol/L的苯并(a)芘诱导下,CYP1A mRNA表达量显著提升,且表现出良好的剂量效应关系。脑细胞系的建立为剑尾鱼的毒理学评价研究提供了便利,也为其系统的生态毒理学应用打下基础。
- 王英英李凯彬刘春王庆曾伟伟石存斌吴淑勤
- 关键词:剑尾鱼
- 一种锦鲤脑细胞系的构建方法及其应用
- 本发明公开了一种锦鲤脑细胞系的构建方法及其应用,将锦鲤脑组织先放入含胶原酶和胰蛋白酶消化液A中进行消化,收集细胞,再加入含EDTA-4Na的消化液B中进行消化,收集消化后的细胞进行原代培养和传代培养即可获得锦鲤脑细胞系;...
- 王英英王庆曾伟伟李莹莹石存斌吴淑勤
- 一株尼罗罗非鱼脑细胞系的建立及应用
- 由罗非鱼湖病毒(Tilapia Lake Virus,TiLV)引起的病毒性疾病,对全球的罗非鱼养殖产业造成了巨大的威胁.为给罗湖病毒提供病毒分离、鉴定的工具,该研究建立了一株源于罗非鱼脑组织的细胞系TiBC(Tilap...
- 王英英曾伟伟王庆李莹莹任燕石存斌朱新平
- 关键词:病毒感染细胞培养
- 一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用;所述细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2023121;该细胞系的染色体为56条,为永久细胞系,可以无限增殖,并可对其进行冷冻保存;而且YL03‑S细胞对大口黑鲈易...
- 王英英王庆李莹莹尹纪元张德锋莫绪兵任燕石存斌
- II型草鱼呼肠孤病毒VP4-NS38融合蛋白基因、表达载体、菌株及其应用
- 本发明公开了一种II型草鱼呼肠孤病毒VP4‑NS38融合蛋白基因、表达载体、菌株及其应用。本发明通过融合PCR的方式将能够引起草鱼产生不同方式免疫应答反应的VP4和NS38蛋白以柔性linker连接,构建能够在枯草芽孢杆...
- 尹纪元王庆王英英李莹莹吴斯宇石存斌张德锋
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT-PCR检测引物组、试剂盒及其应用
- 本发明公开了草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR检测引物组、试剂盒及其应用。本发明设计得到草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR引物组,并基于该引物组,通过特定法扩增体系和条件检测草鱼呼肠孤病毒II型。其PCR反应第一次扩...
- 王英英王庆曾伟伟李莹莹尹纪元吴斯宇石存斌
- 文献传递
- 一种基于锦鲤疱疹病毒ORF149的碳纳米管载核酸疫苗及应用
- 本发明公开了一种基于锦鲤疱疹病毒ORF149的碳纳米管载核酸疫苗及应用,本发明成功构建了单壁碳纳米管载pcDNA‑ORF149核酸疫苗系统,提高鱼体抗体水平,其相对免疫保护率为81.9%,免疫水平远远高于其他免疫系统,具...
- 李莹莹王高学王庆胡峰朱斌曾伟伟王英英尹纪元
- 文献传递