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干旱胁迫下黄檗消减文库的构建及Ⅱ型MT基因的克隆: 黄檗是古热带区孑遗植物，经历了从第三纪炎热到寒冷等一系列的气候变迁，对自然界的非生物胁迫(如高温、干旱、寒冷)有很强的适应力，为国家二级保护植物。为研究干旱胁迫下黄檗的基因表达情况，本论文以干旱胁迫下的黄檗幼...; 王延兵; 关键词：干旱胁迫黄檗抑制性消减杂交消减文库抗性育种; 文献传递

干旱胁迫下黄檗幼苗cDNA消减文库的构建和分析被引量：10: 2008年; 以干旱胁迫下的黄檗幼苗cDNA为tester,正常生长的黄檗幼苗cDNA为driver,利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了干旱胁迫下黄檗幼苗的消减文库并对其进行了EST序列分析。从消减文库中随机挑取20个阳性克隆,提取质粒进行酶切和PCR鉴定,显示丈库克隆的重组率大于95%,插入片段大小大部分集中在300～800bp之间。随机挑取816个克隆进行测序,得到265个基因。将其进行同源性分析,划分为16类。获得了热激蛋白70、脱水响应蛋白(RD22)、通用胁迫蛋白、金属硫蛋白(MTII),晚期胚胎丰富蛋白(LEA14)等44种与干旱胁迫相关的基因,它们涉及了植物的渗透调节、信号传递、转录调控、活性氧清除等方面。本研究为抗逆基因克隆和系统研究干旱胁迫下黄檗基因的表达奠定了重要的理论基础。; 王慧梅王延兵祖元刚孙莲慧; 关键词：干旱胁迫黄檗抑制性消减杂交 EST序列分析

黄檗(Phellodendron amuranse)叶片总RNA提取方法研究被引量：7: 2007年; 以黄檗(Phellodendron amuranseRupr.)叶片为材料,分别利用改进的盐酸胍法、Trizol法、CTAB法提取黄檗叶片总RNA,通过RNA产率、纯度、电泳图谱等分析,确立了1种从黄檗叶片中快速分离总RNA的方法。研究结果表明,改进盐酸胍法所提取的总RNA的A260/A280为1.928,28S和18S条带清晰谱图完整性好,而且具有产率高、时间短、成本低的特点,所提取的总RNA适用于mRNA分离、cDNA文库的建立、Northern杂交等分析。; 祖元刚王延兵王慧梅孙莲慧; 关键词：黄檗叶片 RNA

匀浆法提取沙棘果中总黄酮的工艺研究被引量：22: 2006年; 为了建立一种高效提取沙棘果中总黄酮的方法,对匀浆法提取沙棘果中总黄酮的工艺进行了研究,确定了最佳的工艺参数:提取原料为含水率85%的沙棘果,溶剂为85%的乙醇,匀浆时间10 m in,液固比为5∶1(mL∶g)。将该法与常规的回流提取法进行了比较。结果表明,在优化的条件下,匀浆法对沙棘果总黄酮的提取率为0.76%,与回流提取相当。匀浆提取法所用提取时间短,提取溶剂用量少,该法是一种高效、快速提取沙棘果总黄酮的方法。; 赵春建祖元刚付玉杰李春英王延兵侯春莲; 关键词：沙棘果匀浆总黄酮

正交试验法优选沙棘总黄酮的超声波提取工艺被引量：29: 2005年; 以沙棘叶为原料,用正交试验法优化了沙棘总黄酮(TFH)的超声波提取工艺,考察了超声波作用时间、超声波温度、液料比和提取次数4个因素对沙棘总黄酮提取率的影响,确立了沙棘总黄酮的优化超声波提取工艺条件为:提取溶剂85%乙醇,液料比25∶1(mL∶g,下同),超声波温度46℃,超声波作用时间25min,提取1次。将该法与索氏提取进行了对比。结果表明,超声波提取沙棘总黄酮的提取率为1.72%,与索氏提取的提取率相当,但超声波提取所用提取时间短,提取溶剂用量少,因此超声波法具有明显的优势。同时对超声波提取进行了数学模拟,模拟值与试验结果吻合良好。; 祖元刚赵春建付玉杰李春英杨磊王延兵; 关键词：沙棘叶总黄酮超声波提取

沙棘不同部位总黄酮含量的测定及比较被引量：24: 2005年; 考察了引种于俄罗斯的大果沙棘不同部位总黄酮含量的差异。用超声提取作为沙棘总黄酮的制备方法;以芦丁为对照品,采用分光光度法作为沙棘总黄酮的测定方法。实验结果表明,沙棘叶、果肉和果皮中总黄酮含量分别为1.71%、0.76%和0.55%,叶中总黄酮含量分别是果肉和果皮的2.3倍和3.1倍,因此引种于俄罗斯的大果沙棘叶具有较大的开发价值和应用前景。; 李春英王微赵春建刘晓娜王延兵赵博祖元刚; 关键词：沙棘总黄酮分光光度法生物活性超声技术

鲜茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯的高效提取技术研究被引量：6: 2006年; 采用鲜磨匀浆提取、负压空化混悬组合技术对新鲜老龄茶叶中的没食子酸酯(EGCG)进行了高效提取,并与干燥老龄茶叶的传统提取工艺进行了对比。结果表明:组合工艺的最佳提取条件为新鲜老龄茶叶高温杀青后,再经常温水匀浆萃取,固液比为1:10,匀浆萃取时间为1min,滤渣再经负压空化混悬固液提取,固液比为1:10,空化时间为15min,空化提取2次。新鲜老龄茶叶最佳组合工艺的EGCG提取量为502·85mg,优于传统干燥老龄茶叶工艺。; 高彦华祖元刚杨磊王磊朱磊王延兵; 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯匀浆

原子力显微镜在植物学研究中的应用被引量：4: 2006年; 原子力显微镜(AFM)是一种探测样品表面信息的有力工具,它可以在空气和接近样品生理条件下成像,同时也可以在皮牛(pico-Newton,10-12N)至微牛(micro-Newton,10-6N)水平上测量力的大小。本文主要介绍了自AFM发明以来,其在植物大分子、细胞器、细胞、叶片等方面的应用,并列举了目前AFM存在的几点不足。; 祖元刚张宇亮刘志国王延兵梁慧丽刘红梅; 关键词：原子力显微镜植物

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王延兵