王大江 作品数:59 被引量:271 H指数:10 供职机构: 中国农业科学院果树研究所 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 经济管理 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
苹果部分种质资源分子身份证的构建 被引量:40 2015年 【目的】以国家果树种质兴城梨、苹果圃保存的131份苹果地方品种、育成品种及其野生近缘种为试材,利用TP-M13-SSR标记构建苹果种质分子身份证。【方法】基于TP-M13-SSR指纹图谱,筛选可以将苹果种质区分的引物组合,并对其等位基因进行编码建立种质分子身份证。【结果】(1)从131份材料中随机选取两份材料,对第一次PCR条件进行优化和引物筛选,从32对合成引物中筛选出16对稳定性高和重复性好的TP-M13-SSR引物用于131份苹果属植物指纹图谱构建。(2)16对SSR引物在供试种质间共检测出等位基因326个,每对引物平均检测到等位基因数为20.3个。CH05d04对种质扩增的等位基因数最多为49个,位点期望杂合度最高为0.878;其次是CH01f07a为48个。利用Pop Gen32软件计算引物的多态性信息含量,16对引物的平均多态性信息含量为0.7558。16对SSR引物可区分供试苹果种质资源数量从11份到71份不等,平均每对SSR引物可区分49份苹果种质,区分率为8.09%—52.21%。其中对苹果种质区分率最高的是CH01f07a,最低的为BGT23b。(3)根据引物扩增的多态性信息含量和对苹果种质的区分率,将两者均较高的引物CH05d04、CH01f07a、CH03d07、CH04e03、CH04h02和CH04g07两两组合,CH04h02和CH01f07a引物组合分辨率最高,可以区分120份苹果种质。继续增加组合中引物数量,在增加到3对引物时,即可将全部苹果种质区分开来。(4)把可以将全部供试苹果种质资源材料全部区分的3对核心引物CH04h02、CH05d04和CH01f07a获得等位基因按照从大到小的顺序排列,并用阿拉伯数字从01开始赋值;将每份材料在3个位点获得的等位基因按照赋值数字编码获得每份供试材料独有的字符串,利用条码技术将每对引物的分子身份证转化成可被机器快速扫描的条码分子身份证。【结论】依据引物扩增的多态性信息含量和对苹果种质的区分率,筛选核心引物组� 高源 刘凤之 王昆 王大江 龚欣 刘立军关键词:苹果 种质资源 分子身份证 河北省苹果地方品种果实多酚组分和含量特性及遗传背景分析 被引量:4 2017年 利用超高效液相色谱(UPLC)及液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)研究12个河北省苹果地方品种果实多酚组分及含量特性,并分析其遗传背景。结果表明:河北省苹果地方品种中共检测到5类22种多酚组分,原花青素为主要酚类物质,不同品种间多酚组成和含量存在显著差异,变异系数为40.48%~151.68%。‘红海棠’中原花青素和二氢查耳酮的含量较高,‘沙果’中羟基肉桂酸和黄酮醇含量较高,‘热磙子’有较高的花青苷含量。聚类分析结果表明,同类或遗传背景相似的品种聚为一类,推测‘晚白海棠’携带‘沙果’、‘中国彩苹’或‘香果’的基因,或者同时携带以上二者或三者的基因,‘红海棠’携带‘沙果’的基因。从多酚组分间的相关性分析可以看出,同类物质或者具有相同代谢途径的多酚物质相关性较强,基本聚为一类。本文研究结果为河北省苹果地方品种的开发应用和遗传背景研究提供了依据。 王大江 王昆 王昆 赵继荣 高源 李连文 赵继荣关键词:苹果 多酚 一种利用田间小区鉴定苹果火疫病抗性的方法 本发明属于苹果抗病鉴定技术领域,具体涉及一种利用田间小区鉴定苹果火疫病抗性的方法。本发明通过对待鉴定的多品种苹果个体进行扩繁,得扩繁苗;待扩繁苗生长高度至50cm时,选择生长势一致的扩繁苗,放置在鉴定池中,接种火疫病菌,... 王大江 高源 王昆 张玉刚 张校立 孙思邈 郭绍霞 田雯 路翔 李连文文献传递 一种海棠果多酚的提取方法 本发明提出的是一种海棠果多酚的提取方法。经过原料预处理,冻干,粉碎,一次提取,取料液,二次提取,取料液,浓缩回收,纯化和浓缩干燥工序完成。具有操作方便、条件可控、提取定量准确、提取多酚纯度高,便于海棠果多酚的快速提取,在... 赵继荣 王昆 王大江 高源 刘立军 李连文文献传递 苹果地方品种资源苹果斑点落叶病抗性调查与评价 被引量:10 2015年 苹果地方品种是苹果种质资源中一个较为特殊的群体,研究潜力巨大。连续3年调查了苹果地方品种苹果斑点落叶病田间自然发病情况,并通过病叶率和病情指数进行抗性综合评价。结果表明:苹果地方品种资源苹果斑点落叶病抗性极为丰富,同种不同类型品种抗性表现亦有差异;筛选出太原海棠、富平楸子、早白海棠、郝家村柰子、热磙子、大果林檎、南岔沙果1#、南岔沙果2#、酒泉沙果、隰县海棠、海棠花等高抗资源11份。同时对苹果资源病害的鉴定方法进行了讨论,并对苹果地方品种的抗性利用提出了建议。 王昆 龚欣 刘立军 王大江 高源关键词:苹果 苹果斑点落叶病 苹果属植物种质多样性的SLAF-seq分析 被引量:10 2020年 利用简化基因组测序技术—特异性位点扩增片段测序技术(Specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)对509份苹果属植物种质进行测序,获得586454个SLAF标签,其中多态性SLAF标签463612个;经过序列比对,根据完整度>0.94、次要等位基因频率(MAF)>0.05,过滤筛选得到46460个多态性单核苷酸(SNP)位点;基于这些SNP位点构建苹果属植物不同种的系统发生树并分析主成分。结果表明,通过SLAF-seq技术能够在全基因组范围内快速开发高通量的SNP标记,并直接用于苹果属植物种质资源遗传多样性研究中。34种509份苹果属植物的多样性水平较高(He=0.318,I=0.488,Ae=1.520),在多于1份试材的种群中,变叶海棠的遗传多样性水平最高,中国苹果的遗传多样性水平最低。综合聚类分析和主成分分析结果表明,供试苹果属植物分为5个基本的类群,Ⅰ山荆子类群,Ⅱ苹果属植物野生种类群,Ⅲ苹果栽培品种类群,Ⅳ以中国苹果、八棱海棠、花红、楸子和海棠花为主的类群,Ⅴ新疆野苹果类群。野生种丽江山荆子、山楂海棠、陇东海棠、变叶海棠、花叶海棠、滇池海棠和沧江海棠聚类比较紧密,栽培种之间的亲缘关系相对较近,栽培品种与东方苹果和森林苹果等野生种聚在一起,新疆野苹果与中国原产苹果属栽培种的亲缘与起源演化关系有待于进一步考究。 高源 王大江 王昆 丛佩华 李连文 朴继成关键词:苹果属 SNP 河北省苹果地方品种果实多酚组成和含量研究 苹果果实多酚含量为果实品质评价的重要指标之一,前人围绕苹果野生资源和栽培品种的果实多酚含量进行了较多的研究,但关于中国原产,特别是河北原产的地方品种果实多酚含量的研究较少。评价河北原产的苹果地方品种果实多酚的组成和含量,... 王大江 李静 王昆 高源 刘立军 龚欣关键词:苹果 多酚 82份苹果属资源SFB基因克隆及不同生态居群基因频率分析 2023年 为了明确不同苹果属资源的SFB基因及在各居群中SFB基因的类型和分布频率,本研究以奎花等栽培苹果及新疆野苹果等野生资源共82份为试验材料,利用3对苹果属SFB基因特异性引物,以叶片DNA为模板进行PCR扩增。特异扩增结果显示:所有试材中均只鉴定出单一的SFB基因片段。经GenBank同源性比较分析,发现这些片段分属5种不同的SFB等位基因,分别为SFB1、SFB2、SFB3、SFB7、SFB9。同时对不同生态种群中SFB基因的分布频率进行了分析,结果表明不同SFB基因出现的频率不同,SFB3出现的频率最高为43.90%,其次为SFB1(39.00%),而相同的SFB基因在不同苹果种间及种内出现的频率亦不同。此外,系统进化树分析显示,新疆野苹果与土库曼苹果及栽培苹果的驯化起源有关。 刘昭 高源 王昆 冯建荣 孙思邈 路翔 李青山 李连文 王大江关键词:苹果属 种质资源 克隆 美国苹果砧木育种历史、现状及其商业化砧木特性 被引量:7 2018年 综述美国苹果砧木的育种历史和现状,简介美国选育的苹果砧木特性,以期为我国苹果砧木的选育提供参考。美国从1968年开始苹果砧木育种,早期进行了资源的广泛评价和筛选,随后根据美国具体气候条件,将育种目标主要定为矮化和半矮化、抗火疫病、抗颈腐病、抗苹果绵蚜、抗重茬、早产丰产等,杂交后代进行深入、多层次的评价和筛选,最终成功选育出目前商业化和科研应用较广泛、已申请专利的14个苹果砧木品种,包括1个极矮化砧木、5个矮化砧木、8个半矮化砧木。主要特性:树体本身为小灌木,抗火疫病和苹果绵蚜,耐颈腐病和重茬,易繁殖;嫁接品种后致矮、早实丰产。可见,美国在矮化砧木选育之前的评价筛选及选育后的鉴定方面都具有系统的手段和方法,为苹果砧木选育的重要部分,可以作为我国苹果砧木育种的参考。 王大江 Bus Vincent G M 王昆 高源 赵继荣 刘立军 李连文 朴继成关键词:苹果 砧木 新疆野苹果叶绿体DNA变异与遗传进化分析 被引量:14 2020年 利用4对叶绿体DNA引物对来源于新疆巩留、霍城和新源3个地区的242份新疆野苹果种质资源的4个非编码区trnH-psbA、trnS-trnG spacer+intron、trnT-5′trnL和5′trnL-trnF进行了扩增,基于4个叶绿体基因间区的序列变异,从母系遗传的角度评价了遗传变异和不同居群的遗传进化关系。结果表明:4个叶绿体DNA非编码区经测序、拼接、比对和合并之后的片段长度为3812 bp,共有171个多态性变异位点,其中包含6个单一突变位点、16个简约信息位点和149个插入-缺失位点。在242份新疆野苹果种质中,trnH-psbA、trnS-trnG spacer+intron、trnT-5′trnL和5′trnL-trnF区域的变异位点的数量分别为68个、25个、77个和1个,单倍型数量分别为36个、6个、6个和2个,合并之后的叶绿体DNA片段的单倍型为52个。核苷酸多样性和单倍型多样性最高的区域均为trnH-psbA(Hd=0.773,Pi=0.01982),最低的为5′trnL-trnF(Hd=0.025,Pi=0.00002)。242份新疆野苹果种质4个叶绿体DNA区域合并后的遗传多样性较高(Hd=0.806,Pi=0.00291)。Tajima′s D检验中,4个cpDNA区域合并后片段在P<0.05水平上显著,4个cpDNA区域整体不遵循中性进化模型,自然选择的压力是新疆野苹果遗传进化的主要动力。新疆野苹果的遗传变异主要存在于居群内部,新疆巩留和新源居群间的遗传距离较近,与霍城居群间遗传距离相对较远,居群间的遗传分化与地理距离相关。3个地区的新疆野苹果各自经历着遗传分化但又存在频繁的基因交流,有向新疆新源的新疆野苹果演化的趋势。 高源 王大江 王昆 丛佩华 张彩霞 李连文 朴继成关键词:新疆野苹果 叶绿体DNA 遗传进化