柴洪亮 作品数:74 被引量:172 H指数:7 供职机构: 东北林业大学 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 国家林业公益性行业科研专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
东北虎α干扰素及其编码基因和应用 本发明公开了一种东北虎α干扰素及其编码基因和应用。本发明从东北虎基因组中克隆获得了东北虎α干扰素家族,其成熟肽的氨基酸序列为SEQ ID No.1‑11所示,编码基因的核苷酸序列为SEQ ID No.12‑22所示。本发... 邢明伟 姜广顺 孙潇 侯志军 杨思远 柴洪亮文献传递 黑龙江大兴安岭地区鸟类禽流感病毒监测研究 2019年 为了解黑龙江大兴安岭地区鸟类携带禽流感病毒(AIV)的情况,于2015~2017年春、秋季候鸟迁徙重点时期,在该地区双河国家级自然保护区、南瓮河国家湿地公园等重点区域,采集雀形目等林栖鸟咽、肛拭子2547份,采用SPF鸡胚分离病毒,通过血凝试验筛选疑似阳性样品后再对其进行RT-PCR鉴定。在2 547份被检样品中,有4份样品呈血凝阳性,其余样品的血凝效价结果均为阴性。RT-PCR检测结果显示所有样品均为禽流感病毒核酸阴性。该研究结果为了解黑龙江大兴安岭地区鸟类AIV带毒情况以及候鸟迁徙路线上禽流感的监测提供了基础数据。 彭鹏 初冬 耿海东 秦思源 孙贺廷 杨思远 柴洪亮关键词:鸟类 禽流感 H9N2亚型AIV鼠肺适应株的获得及其氨基酸变异分析 被引量:2 2015年 【目的】将H9N2亚型禽流感病毒在豚鼠体内连续性传播9代后,能够稳定的在豚鼠间传播,可见H9N2亚型禽流感病毒对哺乳动物的感染能力以及在哺乳动物间传播的能力还是很强的。因此,使用此株病毒A/Chicken/Jinan/Li-2/2010(H9N2)简称JN,应用小鼠动物模型,研究H9N2亚型流感病毒在小鼠肺内适应性传代后对小鼠的致病力,以及传代过程中流感病毒的变异。检测和筛选流感病毒致病性变异的关键氨基酸位点,探索H9N2亚型流感病毒变异的分子机制。【方法】将一株H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Jinan/Li-2/2010(H9N2)在小鼠的肺脏进行传代,将小鼠解剖、摘除肺部、研磨离心后经滴鼻接种下一代小鼠,传播九代后,用MDCK细胞扩繁病毒,得到鼠肺适应株JN-P9-2-M1;扩增、克隆传代病毒JN-P5-2-M1和JN-P9-2-M1的全基因测序,推断各基因编码的氨基酸,与JN原代病毒(P0)的核苷酸和氨基酸相比对,得到各代次病毒核苷酸与氨基酸变化的位点;解剖小鼠,获得小鼠的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、脑和肠,滴定各组织中的病毒滴度,检测病毒的组织噬性;乙醚麻醉小鼠后,每个病毒稀释度鼻内接种3只小鼠,检测小鼠的幸存率和发病率;采集攻毒小鼠的肺部,固定后进行病理切片和免疫组化,比较JN原代病毒与JN-P9-2-M1对小鼠肺部的损害。【结果】JN-P9-2-M1对小鼠的致病性明显提高,其MLD50为103.5EID50,106EID50、105EID50、104EID50攻毒剂量的小鼠幸存率是0,而原毒JN对小鼠不致死,JN-P9-2-M1对小鼠的致病性比原毒提高了至少1 000倍;攻入JN-P9-2-M1病毒剂量为106—103EID50的小鼠,体重明显减少,临床症状也很明显,攻毒后3—8 d,小鼠表现精神萎靡、被毛零乱、呼吸急促、弓背等症状,而原毒JN在106EID50时,小鼠的体重变化率都跟阴性对照组相似;JN-P5-2-M1和JN-P9-2-M1同原毒JN的受体结合特性相同,都是只能特异性结合SAa-2,6Gal受体,具有人样流感病毒 丁洁 高玉伟 桑晓宇 程凯慧 于志君 张坤 柴洪亮 王铁成 夏咸柱 华育平关键词:禽流感 H9N2 致病力 通用引物鉴定野鸟源禽流感病毒HA亚型 2011年 准确、方便快捷的禽流感病毒亚型鉴定方法对于野鸟流感病毒感染与流行状况的调查监测是十分必要的。本研究参照Phipps L P等人建立的通用引物RT-PCR HA亚型鉴定方法,分别对已知为H1、H2、H3、H4、H6和H11亚型的22株野鸟流感病毒毒株以及6株未知亚型的野鸟流感病毒毒株进行了HA亚型分型的验证性试验。即利用1对通用引物对所有病毒样品进行RT-PCR扩增,将各PCR产物进行核苷酸序列测定并与GenBank上参考毒株序列进行同源性比较,以确定其HA亚型。BLAST分析显示,22株已知亚型毒株的PCR扩增产物的序列测定结果与GenBank公布的相应亚型毒株序列比较其核苷酸序列同源性均在99%~87%之间,而6株未知亚型的野鸟流感病毒毒株测得的核苷酸序列经BLAST比对分别确立为1株H4、1株H5、2株H7、2株H11亚型。利用该通用引物HA亚型鉴定方法对于已知亚型所获得的鉴定结果均与实验室原亚型鉴定结果一致,对于未知亚型能准确的确定其HA的亚型。因此相较于其他HA亚型鉴定方法,该方法简便易行,更适合于野鸟流感病毒的亚型鉴定。 张苗 柴洪亮 杨思远 侯志军 邢明伟 孙颖 华育平关键词:禽流感 通用引物 禽流感H11N9亚型病毒东方白鹳分离株的基因特征 被引量:1 2010年 根据已知禽流感病毒(AIV)的8个基因序列设计合成12对特异引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,分别成功扩增出分离于东方白鹳(Ciconia boyciana)的1株H11N9亚型禽流感病毒的全基因序列,将其分别克隆到pMD18-T载体后进行序列测定。同时将8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较,绘制各基因的进化树。结果表明:所克隆到的8个片段均包含相应病毒基因的完整开放阅读框架,长度分别为2280、2274、2151、1692、1497、1413、759、838bp核苷酸,分别编码759、757、716、563、498、470、252/97、230/121个氨基酸。该毒株HA有7个潜在糖基化位点;在HA裂解位点序列为PAIASR↓GLFG,无连续的多个碱性氨基酸插入,具有典型的低致病性禽流感病毒特征。根据该毒株与参考毒株的序列比较分析结果推测,该分离株可能是不同亚型禽流感病毒通过互相基因交换所形成的基因重组体。 张兰兰 柴洪亮 曾祥伟 张进 郭亮 华育平关键词:禽流感病毒 基于野生动物医学特色的兽医微生物学课程建设探索 被引量:2 2013年 基于传统动物医学专业人才培养体系中《兽医微生物学》课程缺乏传达人兽共患疾病与野生动物保护关系的理念,野生动物医学特色的兽医微生物学课程建设在国内处于相对空白状态,本研究从课程建设思路、师资队伍建设、课程教学内容和体系建设、教学方法和手段、实践教学体系等方面入手,围绕野生动物医学特色进行创新改革研究,建设有野生动物医学特色的《兽医微生物学》教学体系。 田丽红 曾祥伟 邢明伟 华育平 柴龙会 薛原 柴洪亮关键词:动物医学 兽医微生物学 课程建设 5株野鸭源H6N1亚型禽流感病毒NA基因的克隆和进化分析 被引量:1 2011年 根据GenBank已知的H6N1亚型流感病毒的NA基因序列,设计扩增NA基因的特异性引物,通过RT-PCR技术扩增5株H6N1亚型禽流感病毒NA基因序列,并将其克隆到pMD18-T载体后进行了测序分析。同时通过生物学软件对5株禽流感病毒NA基因进行了分析研究。结果表明:5株禽流感病毒NA基因全长1 410 bp,编码470个氨基酸,不存在氨基酸缺失现象;抗原位点和糖基化位点与参考序列野鸭源N1亚型禽流感病毒相比变化不大。5株禽流感病毒NA基因与参考序列的同源性为79.6%~97.6%,其中与参考序列野鸭源H1N1亚型的同源性最高。结合进化树分析结果推测,5株禽感病毒与野鸭源H1N1亚型禽流感病毒的亲缘关系密切。 张玉稳 程成 柴洪亮 曾祥伟 华育平关键词:野鸭 禽流感病毒 NA基因 进化 基于传统形态分类学和DNA条形码技术确定东方田鼠在贺兰山的新分布 被引量:5 2015年 运用传统形态分类学和现代分子系统学两种方法鉴定在内蒙古贺兰山国家级自然保护区内新发现的啮齿动物,通过传统形态分类学初步鉴定为东方田鼠,进一步利用分子系统学中的DNA条形码技术,通过细胞色素b基因(cytochrome b,cytb)序列,构建分析系统进化树。结果表明:所有比较的21种田鼠基因序列的cytb基因,大致可分为3组。本次试验个体与沼泽田鼠的亲缘关系最近,而沼泽田鼠即为东方田鼠的别称。且在NCBI中使用BLAST相似性检索进行物种序列比对,得到了可供最后比较分析的高质量序列各10条,最终发现与之同源性最高的鼠种为东方田鼠,从而确定本研究中物种为东方田鼠。 庞博 侯志军 柴洪亮 滕丽微 刘振生 杨云天 王晓勤 王亮关键词:东方田鼠 DNA条形码技术 鸡新城疫病毒弱毒株、灭活疫苗及其应用 本发明公开了鸡新城疫病毒弱毒株、灭活疫苗及其应用,属于鸡新城疫病毒株的分离和应用领域。本发明从鸡病料中分离得到一株鸡新城疫病毒弱毒株(DL11株),其微生物保藏编号为:CGMCC?NO.7958;经过血凝和血凝抑制试验证... 邢明伟 柴洪亮 曾祥伟 侯志军 田丽红文献传递 一种基于无人机的机械臂抓取用物品存储盒 本实用新型涉及一种基于无人机的机械臂抓取用物品存储盒,包括主存储盒,所述主存储盒的下端固定连接有固定连接柱,所述固定连接柱的下端设置有缓冲顶板,所述缓冲顶板的下端设置有缓冲底板,所述主存储盒的两侧均开设有物品穿过孔,所述... 刘一琦 孙源 李振杰 徐艳春 柴洪亮 郑钧元文献传递