李振秋
- 作品数:27 被引量:191H指数:7
- 供职机构:河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学化学工程医药卫生更多>>
- 四倍体大白菜小孢子培养获得初级三体的细胞学观察被引量:21
- 2000年
- 研究结果表明 :(1)由于同源四倍体大白菜的花粉母细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型配对的同源染色体发生不规则分离 ,后期Ⅰ、Ⅱ部分染色体落后和向两极分配不均衡 ,致使后期Ⅱ形成染色体数目变化于 15~ 2 4的各类细胞 ,以染色体数为 2 0的细胞为主 ,其次是 19和 2 1的细胞。 (2 )具有 2 1条染色体的小孢子 (2x +1)再生植株能力与正常小孢子 (2x)再生植株能力相近。 (3)减数分裂的各种异常频率和三体株获得率品系间存在差异。
- 申书兴陈苏李振秋张成合梁会芬刘世雄王彦华任清尚爱芹
- 关键词:大白菜四倍体小孢子培养初级三体细胞学
- 黄芪皂苷生物合成关键基因的克隆
- 李振秋曲占良赵金莉倪志华张书玲
- 利用同源克隆技术克隆黄芪鲨鲨烯合酶基因cDNA序列,并对黄芪中鲨烯合酶进行了半定量分析。通过对鲨烯合酶蛋白进行疏水性分析,选择部分片段连接到pET-32a(+)载体中构成重组载体,并在表达菌株Rosseta中进行了原核表...
- 关键词:
- 关键词:鲨烯合酶基因克隆
- 一种基于PCR扩增反应的T载体的简易制作方法
- 本发明属于基因工程领域,特别是指一种基于PCR扩增反应的T载体的简易制作方法。对出发载体A的一处碱基进行突变获得出发载体B,再分别以出发载体A和B为模板设计合成引物,利用合成引物分别进行PCR扩增反应,扩增出的产物等量混...
- 李振秋赵金莉穆淑梅王晓明
- 文献传递
- 中华锯齿米虾卵黄蛋白原部分cDNA序列的克隆被引量:2
- 2010年
- 卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vg)是广泛地存在于卵生脊椎和无脊椎动物体内的雌性特异性蛋白,是卵黄蛋白(vitellin,Vn)的前体,本文通过同源克隆的方法从成熟中华锯齿米虾的卵巢中克隆到了一条长474 bp的Vg cDNA序列。用DNAMAN中的Blast功能将此片段与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、高背长额虾(Pandalus hypsinotus)的Vg部分序列进行比对,结果发现中华锯齿米虾与罗氏沼虾和高背长额虾的同一性分别为64%与62%。此片段为中华锯齿米虾Vg cDNA全长序列的克隆及其表达奠定了基础。
- 闫冀斌穆淑梅李振秋张晗康现江
- 关键词:中华锯齿米虾卵黄蛋白原同源克隆
- 黄芪鲨烯合酶基因的克隆和序列分析被引量:3
- 2011年
- 参照豆科其他植物的鲨烯合酶基因序列设计了引物,通过逆转录PCR方法,从荚膜黄芪(Astragalus mem-branaceus(fish.)Bge)中克隆了鲨烯合酶基因cDNA序列(GenBank登录号HQ829974)。通过BLAST发现黄芪鲨烯合酶推测的氨基酸序列与大豆鲨烯合酶(BAA22559.1)序列相似性最高,达到了88%。黄芪鲨烯合酶的克隆为以后通过基因转化提高黄芪皂苷含量亦或通过生物工程手段生产黄芪皂苷打下基础。
- 李振秋王晓明金亚明王波
- 关键词:鲨烯合酶分子克隆
- 青蒿高产株系001法呢基焦磷酸合酶基因的克隆、原核表达及酶活性测定被引量:2
- 2008年
- 法呢基焦磷酸合酶(FPS)是治疗疟疾的特效药物——青蒿素生物合成途径的关键酶。运用RT-PCR方法从青蒿高产株系001中克隆法呢基焦磷酸合酶基因;构建His标签融合蛋白FPS表达载体,进行原核诱导表达、蛋白纯化及酶活性测定的研究。结果表明:克隆的FPS基因和文献已报道的2个青蒿FPS基因编码的氨基酸序列的同源性分别为98.83%和99.42%;原核诱导表达的His标签融合蛋白FPS的表达量高、可溶性好,具有FPS酶活性。
- 韩军丽李振秋叶和春李国凤
- 关键词:原核表达蛋白纯化
- R262K点突变将紫穗槐二烯合酶变为(3R)-(E)-nerolidol合酶被引量:2
- 2015年
- 倍半萜合酶家族催化单一底物法尼基焦磷酸形成近300多种链式、单环、双环和三环倍半萜烯、醇,进一步的加工修饰产生种类更加繁多的倍半萜衍生物。详细了解倍半萜合酶产物特异性性决定机制将会为倍半萜合酶的理性设计,定向生成新型化合物打下基础。本研究利用定点突变技术,对紫穗槐二烯合酶RxR基序及相关的D300位点进行了点突变,发现保守基序中R262K单点突变后其酶促反应主产物为(3R)-(E)-nerolidol,而R262L突变使酶失去活性,R264K突变则对产物比例无影响,显示保守基序中第一个精氨酸在活性中心疏水环境的维持中非常关键。D300突变结果显示此氨基酸对酶的活性维持非常必要,结合R262突变结果,推测R262和D300间的非键相互作用对酶活性的维持起重要作用。由于RxR基序在倍半萜合酶家族中非常保守,因此其作用是否具有普遍性值得进一步验证。
- 李振秋高瑞平程隆斌刘秀华朱华结
- 关键词:定点突变
- 青蒿α-bisabolol合酶产物绝对构型的确定
- 2020年
- 建立气相和液相色谱方法用于鉴定α-没药醇(α-bisabolol)绝对构型,确定青蒿α-bisabolol合酶产物的绝对构型.手性液相方法分离并制备α-bisabolol的4种立体异构体,结合旋光度测定、气相色谱和标准品确定4种立体异构体的绝对构型.分别建立气相和液相色谱2种方法来鉴定α-bisabolol的4种立体异构体混合物.化学合成酶促反应的底物法尼基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate,FPP),原核表达、蛋白纯化后进行体外催化,鉴定2个α-bisabolol合酶体外催化产物α-bisabolol的绝对构型.甜舌草α-bisabolol合酶(Lippia dulcis bisabolol synthase,LdBOS)体外催化FPP,产物构型为(+)-epi-α-bisabolol,与文献报道一致.青蒿α-bisabolol合酶(Artemisia annua bisabolol synthase,AaBOS)体外催化FPP生成的产物为(+)-α-bisabolol.Agilent CP-Chirasil-Dex-CB气相色谱柱和Chiralpak IA液相色谱柱可分别用以分离、鉴定α-bisabolol的4种手性异构体.AaBOS和LdBOS的催化产物6位碳构型相同,暗示这2种酶与青蒿紫穗槐二烯合酶(Artemisia annua amorpha-4,11-diene synthase,AaADS)的催化机理类似.利用气相和液相色谱的方法分析手性化合物,具有灵敏度高、稳定性强、简便易行等优点.手性化合物α-bisabolol绝对构型的分离、鉴定,在医药、食品和化工领域具有重要意义.
- 穆星杨倩刘会云向英曹飞李振秋
- 关键词:青蒿
- 滤纸对青蒿丛生芽诱导及遗传转化的影响被引量:1
- 2006年
- 研究了滤纸对青蒿丛生芽诱导及遗传转化的影响.结果表明,培养基上加铺一层滤纸能够明显促进青蒿丛生芽的诱导,丛生芽诱导率可达到97%.在高效丛生芽诱导体系的基础上,探讨了滤纸在根癌农杆菌介导的青蒿遗传转化中的应用.优化后的青蒿转化体系,抗性丛生芽诱导率可达到59.7%,其中,12.5%的抗性丛生芽能发育成抗性生根植株,生根植株PCR检测均为阳性.在部分PCR检测阳性植株中检测到了GUS的稳定表达.该优化的转化体系对青蒿素生物合成分子调控的研究具有重要意义.
- 宋玉刚李振秋王红刘本叶李国凤叶和春
- 关键词:青蒿滤纸丛生芽GUS
- 植物萜类代谢工程被引量:32
- 2007年
- 植物萜类化合物不仅在植物生命活动中起重要作用,而且具有重要商业价值。随着近年来萜类代谢途径和调控机理研究的深入,代谢工程已成为提高萜类产量最有潜力的途径之一。对萜类代谢工程领域具代表性的研究结果进行了全面回顾,然后讨论了萜类代谢工程的研究方法和策略,其中重点探讨了功能基因组学方法在萜类代谢途径及调控机理研究方面的应用。
- 韩军丽李振秋刘本叶王红李国凤叶和春
- 关键词:萜类化合物代谢工程功能基因组学