李成建
- 作品数:4 被引量:15H指数:2
- 供职机构:北京大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 双链RNA在基因沉默中的作用被引量:9
- 2002年
- 介绍依赖于同源识别的基因沉默 .依赖于同源识别的基因沉默 ,是指向生物体内导入外源核酸时引起相应序列的内源基因的表达被特异性抑制的一种基因调控现象 .基因沉默分为转录基因沉默和转录后基因沉默 ,二者都通过双链RNA介导 .它们是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制 .这些机制具有巨大的应用前景 .
- 汤富酬李成建薛友纺
- 关键词:小干涉RNA甲基化双链RNA基因沉默
- 小鼠3T3-L1前脂肪细胞系的增强绿色荧光蛋白标记(英文)被引量:1
- 2004年
- 细胞模型是研究细胞分化原理以及进行高通量筛选的有效工具。为了建立特异性标记的脂肪细胞分化模型 ,构建了包括脂肪细胞分化特异性表达基因PPARγ2的启动子在内的载体 (pPPARγ2 promoter EGFP) ,用电穿孔方法转染小鼠 3T3 L1前脂肪细胞 ,用显微荧光观察和RT PCR确认PPARγ2基因的内源表达。结果显示 ,EGFP基因成功转入 3T3 L1前脂肪细胞 ,观察到细胞分化过程中EGFP表达和脂肪积累 ,RT PCR分析表明EGFP代表了稳定而真实的PPARγ2基因的内源性表达。建立了由脂肪组织特异表达基因PPARγ2的表达控制的EGFP标记的小鼠 3T3 L1前脂肪细胞系 ,目前国内外尚未见用同样方法对前脂肪细胞进行特异性标记。
- 李成建成俊英张晓岚张崇本
- 关键词:细胞系
- 利用RNA-DNA嵌合寡核苷酸和小片段同源替换技术在哺乳动物细胞中进行位点特异性的基因改变研究
- 该论文中,我们利用RNA-DNA寡核苷酸和小片段同源替换技术在小鼠胚胎干(ES)细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中对特异性修复染色体上和染色体外游离基因的可能性进行了探索性的研究.我们建立了两种基于绿色荧光蛋白报告基因的...
- 李成建
- 关键词:同源重组基因打靶
- COS-7细胞中小发卡RNA介导的RNA干涉被引量:5
- 2003年
- 利用U6启动子转录小发卡RNA介导的RNA干涉是最近发展起来的在哺乳动物细胞中特异性抑制指定基因表达的新技术 ,已有实验证明它在小鼠畸胎瘤P19等细胞系中具有强烈的抑制基因表达的作用。本文对COS 7细胞系中U6启动子转录GFP基因的小发卡RNA介导的RNA干涉现象进行了研究 ,结果表明 :U6启动子转录的小发卡RNA具有RNA干涉作用 ,即可以在COS 7细胞中特异性地抑制含有对应序列的基因GFP的表达 ,这一结果为今后在COS 7细胞系中利用RNA干涉技术研究目的基因的功能奠定了基础。
- 汤富酬杨红波孟国良李成建尚克刚张博薛友纺
- 关键词:RNA干涉COS-7绿色荧光蛋白