李忠花
- 作品数：14 被引量：98H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一个有假基因特点的鼻咽癌相关基因的分离和克隆(英文)被引量：4
- 2002年
- 用定位候选克隆法克隆了一个与鼻咽癌相关的基因 ,命名为NAG73基因 .结构分析显示NAG73的基因序列无内含子 ,无典型的启动子序列 ,polyA尾 .与人类生长激素促分泌因子基因的第 4个外显子和 3′端非翻译区同源 .说明NAG73可能是人类生长激素促分泌因子基因的假基因 .同时 ,实验证明NAG73在一些细胞和组织中活跃表达 .在正常鼻咽上皮细胞 ,鼻咽癌上皮细胞和鼻咽癌活检组织 ,NAG73有表达差异 .序列分析显示NAG73有编码翻译产物的可能 .NAG73可能可编码产物 .该产物在鼻咽癌的发病发展中发挥作用 .
- 向娟娟余鹰王洁如朱诗国张必成李忠花李桂源
- 关键词：假基因鼻咽癌相关基因基因克隆染色体3P
- 肿瘤微卫生不稳定性的研究进展被引量：2
- 2001年
- 1993年首次在遗传性非息肉性结直肠癌 (HNPCC)和散发性结肠癌中发现微卫星不稳定性 (MSI)现象后 ,MSI成为研究热点 ,得到了广泛而深入的研究。MSI的发现及研究进展 ,在肿瘤生物学和肿瘤临床诊疗上开辟了新的一页。本综述对MSI的一些基本概念、检测方法。
- 李忠花
- 关键词：微卫星不稳定性错配修复肿瘤结直肠肿瘤遗传性非息肉性
- 表达序列标签数据库搜索鉴定小鼠UBAP1基因及其数字化表达分析被引量：13
- 2002年
- UBAP1(ubiquitinassociatedprotein 1)基因是最近克隆的一个定位于人类染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失高频区的泛肽相关蛋白家族新成员 .为了深入研究UBAP1基因的功能 ,利用计算机对表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)、UniGene等数据库进行综合搜索分析 ,结合cDNA克隆测序的方法 ,成功地获得了UBAP1基因在小鼠中的同源基因 .小鼠UBAP1基因cDNA全长为 2 6 76bp ,编码一个由 44 1个氨基酸组成的蛋白质 ,在其蛋白质C端只有一个泛肽相关功能域 (UBAdomain) .与人UBAP1基因相比 ,两者编码的氨基酸序列有 89%相同 .基于EST的数字化表达分析显示UBAP1基因在小鼠正常组织中广泛高表达 .
- 钱骏董利张必成王洁如周鸣李忠花李伟芳李小玲李桂源
- 关键词：表达序列标签数据库搜索小鼠鼻咽癌基因克隆
- 鼻咽癌上皮细胞株HNE1 cDNA文库的构建及鼻咽癌表达上调基因的筛选
- 2002年
- 张必成李忠花朱诗国曹利余鹰李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤CDNA克隆NPC上调基因
- 染色体7q32-ter鼻咽癌相关基因的初步研究被引量：6
- 2001年
- 为克隆 7q32 ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区的鼻咽癌相关基因 .以STSD7S5 0 9为探针 ,PCR法筛选位于该区的细菌人工染色体 (BAC)克隆 ,应用EST介导的定位 候选克隆策略并结合生物信息学筛选出在鼻咽癌细胞株和活检组织中表达增强的ESTAA7734 5 4,cDNA克隆测序和生物信息学资源获取全长cDNA ,DNA印迹和甲基化分析研究其表达增强的机制 .结果表明 ,克隆的NAG18基因cDNA全长 80 2bp ,编码 2 2 7个氨基酸 ,定位于胞核 .该基因分别与人、鼠TAXREB10 7基因及RPL6基因高度同源 .其表达增强的机制不是基因拷贝数的丢失和甲基化位点的改变 .可以断定NAG18是定位于 7q32 ter最小共同缺失区的鼻咽癌相关基因 ,它是一高度保守的基因 。
- 张小慧李忠花张必成董利周鸣曹利唐珂李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽癌相关基因染色体
- 鼻咽癌细胞中表达上调的新基因NAG23(FBXO30)的克隆与分析被引量：9
- 2001年
- 目的:分离位于6号染色体长臂鼻咽癌高频等位基因不平衡位点D6S1581(6q25.3-27)附近与鼻咽癌相关的新基因。方法:运用差异RT-PCR检测定位于D6S1581附近的11个表达序列标签(expressedsequencetags,EST)在正常人鼻咽上皮细胞和鼻咽癌细胞系中的表达水平,并对其中一个表达上调的EST在鼻咽癌组织和正常鼻咽组织中的表达情况进行分析。用Northern杂交验证其表达差异并检测其在多脏器中的表达及其所代表基因的转录本大小。利用生物信息学资源克隆并获得其全长cDNA,对该序列进行初步分析。结果:获得了一个位于6q25.3-27的在鼻咽癌中表达上调的新基因,命名为NAG23(FBXO30)(GenBank收录编号:AF248640)。该基因在68.9%的鼻咽癌活检组织中表达上调,cDNA全长3301bp,预测其开放阅读框编码一个含390个氨基酸的胞浆蛋白,该蛋白含一个F-box基序。结论:NAG23基因是一个在鼻咽癌中表达上调的新基因,很可能编码一新的F-box蛋白。NAG23可能参与了鼻咽癌的发生发展。
- 李忠花曹利向娟娟张必成向秋唐珂周鸣李小玲李伟芳李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤基因克隆F-BOX蛋白
- BRD7基因转染对鼻咽癌细胞生长的抑制作用被引量：25
- 2001年
- 目的：探讨鼻咽癌负相关基因ＢＲＤ７对鼻咽癌细胞系ＨＮＥＩ生长的影响。方法：构建ＢＲＤ７基因真核表达载体ｐｃＤＮＡ３.１（＋）／ＢＲＤ７重组体，采用脂质体介导转染技术，将ＢＲＤ７真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入鼻咽癌细胞系ＨＮＥ１，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ分别检测外源性ＤＮＡ的整合和ＢＲＤ７基因的表达，并借助细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验、流式细胞计数和裸鼠接种方法对转染细胞的生物学行为进行了检测。结果：转染ＢＲＤ７基因的 ＨＮＥ１生长倍增时间为５３ ｈ，较ＨＮＥ１（２３．９ｈ）和空载体转染 ＨＮＥ１（２４.１ｈ）明显延长，流式细胞仪表明，ＢＲＤ７表达升高延缓细胞由Ｇ０－Ｇ１期进人Ｓ期，ＢＲＤ７转染ＨＮＥ１在软琼脂中集落形成率较对照组显著下降（Ｐ＜０．０１），裸鼠接种试验显示ＢＲＤ７基因转染细胞ＨＮＥ１生长速度受到抑制。结论：ＢＲＤ７基因重表达有助于ＨＮＥ１的恶性表型的逆转；ＢＲＤ７是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因良好的候选者。
- 余鹰朱诗国张必成李忠花向娟娟周鸣李小玲李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤BRD7抑瘤基因基因转染HNE1NPC
- 鼻咽上皮组织定向cDNA文库的快速构建被引量：6
- 2001年
- 目的 采用SMART (switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)技术 ,快速构建了高质量的成人鼻咽上皮组织定向cDNA文库。方法 从成人正常鼻咽上皮组织分离总RNA ,利用经修饰的oligo(dT)引物 (含sfiIB酶切位点 )合成cDNA第一链 ,同时根据真核生物mRNA 5′端帽子结构特点 ,利用SMART核苷酸 (含sfiIA酶切位点 )作为cDNA第二链在mRNA 5′端延伸出去的模板 ,进而以此序列为引物利用LD PCR(Long distance PCR)合成双链cDNA ,双链cDNA经sfiI(IA&IB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经sfiI酶切的λTripIEX2载体后经体外包装而成cDNA文库。结果 获得 1.5× 10 6个重组子 ,重组率达 10 0 %。文库扩增后 ,滴度达 3.8× 10 9pfu/ml,插入cDNA平均长度为 1.5kb。结论构建的成人鼻咽cDNA文库具有良好的质量 ,该cDNA文库为进一步筛选。
- 张必成余鹰邱元正钱骏周鸣李忠花张小慧向娟娟朱诗国李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤DNA重组基因文库遗传学技术CDNASMART
- NAG11和NAG12基因转染对鼻咽癌细胞生长的影响被引量：2
- 2001年
- 为了考察鼻咽癌表达下调 /缺失基因 NAG1 1和 NAG1 2对鼻咽癌细胞系 HNE1生长的影响 ,构建了NAG1 1和 NAG1 2基因真核表达载体 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 1和 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 2 ,采用脂质体转染技术将真核重组质粒和空载体质粒分别导入 HNE1细胞 ,观察转染后 HNE1细胞生物学特性的变化 .结果显示 ,NAG1 1重表达对 HNE1细胞生长和细胞周期没有明显的影响 ,而 NAG1 2重表达对 HNE1细胞有生长抑制作用 ,与空载体转染组相比 ,倍增时间由 2 4 .1 h延长至 31 .1 h,停滞于 G0 -G1期细胞数由 51 .4 2 %增加至68.1 4 % .以上实验进一步说明鼻咽癌是多基因改变的疾病 ,NAG1 2的重表达有助于鼻咽癌恶性表型的逆转 .
- 余鹰曹利朱诗国张必成李忠花向娟娟李小玲李桂源
- 关键词：鼻咽肿瘤基因表达基因转染癌细胞
- 比较基因组杂交研究鼻咽癌遗传变异被引量：33
- 2001年
- 目的 了解鼻咽癌遗传学改变的特征。方法 应用比较基因组杂交检测 2 0例鼻咽癌基因组的不平衡即DNA的丢失或扩增。结果 鼻咽癌常见的扩增的染色体是 1q、2、3q、7q、8q、12 ;常见的缺失的染色体为 3p、9p、11q、16 q。结论 鼻咽癌细胞中存在多条染色体拷贝数的改变 ,由此引起相应瘤基因的扩增和抑癌基因的丢失可能参与了鼻咽癌的发生。
- 李忠花王璐张小慧张丽君张必成余鹰曾朝阳周鸣黄薇陈竺陈赛娟李桂源
- 关键词：鼻咽癌比较基因组杂交抑瘤基因瘤基因
