李宇辉
- 作品数:10 被引量:25H指数:3
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种应用生物反应器及片状载体生产狂犬疫苗的方法
- 本发明涉及一种应用生物反应器及片状载体生产狂犬疫苗的方法,属于生物制品技术领域。在具有固定床篮式搅拌系统的Celligen310型14L生物反应器中以台湾赛宇細胞科技股份有限公司的BioNOCII?cellculture...
- 郭秀侠杨屹苗丽刘岩蔡月红李宇辉崔文广姜文波井伟东苑志刚丁丽丽
- 文献传递
- 白介素-2佐剂狂犬病疫苗的免疫学效果被引量:3
- 2007年
- 目的研究白介素-2佐剂狂犬病疫苗的免疫学效果。方法将人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗原液与基因工程白介素-2按一定比例混合,制成白介素-2佐剂狂犬病疫苗,另将疫苗原液加氢氧化铝,制成铝佐剂狂犬病疫苗。将白介素-2佐剂疫苗、氢氧化铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗分别于0、7d经腹腔免疫昆明小鼠,0.5ml/只,并在免疫前和免疫后4、6、10、17、2、31、45和59d,眶静脉采血,用快速免疫荧光灶抑制试验检测小鼠血清中和抗体。同时于0、7d经腹腔免疫BALB/c小鼠,0.5ml/只,第15天取脾检测淋巴细胞转化率。结果白介素-2佐剂疫苗与氢氧化铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗淋巴细胞转化率差异均有显著意义。与铝佐剂疫苗和无佐剂疫苗相比,白介素-2佐剂疫苗诱导产生中和抗体的时间早,抗体滴度高。结论白介素-2佐剂狂犬病疫苗具有良好的免疫学效果。
- 袁彦宝郭岩代长海李宇辉张莹李光谱胡晓明于洪涛
- 关键词:狂犬病白介素-2佐剂免疫学效果
- CpG对狂犬病疫苗免疫效果的影响被引量:5
- 2004年
- 目的 研究寡脱氧核苷酸 (简称CpG)对狂犬病疫苗免疫效果的影响。方法 用狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3 、狂犬病疫苗原液 +CpG、狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3 +CpG 3种配伍方式分别免疫地鼠 ,同时用狂犬病疫苗原液作对照 ;免疫途径分为腹腔、皮下和肌肉 ,全程免疫结束后 2周采血 ,进行小白鼠中和试验。同时用NIH法对不同配伍的疫苗进行效力检测。结果 3种免疫途径以皮下和肌肉免疫效果较腹腔为好 ;3种配伍方式中以狂犬病疫苗原液 +Al(OH) 3+CpG的免疫效果最好 ;狂犬病疫苗原液 +CpG较狂犬病疫苗原液对照免疫效果好。
- 李宇辉袁彦宝李淑兰张莹代长海胡晓明于洪涛
- 关键词:CPG狂犬病疫苗免疫效果寡脱氧核苷酸佐剂免疫途径
- 人用狂犬病疫苗株aGV的生物学特性被引量:4
- 2011年
- 目的研究人用狂犬病疫苗株aGV的生物学特性。方法取狂犬病病毒3aG株,接种于Vero细胞适应性传代,按照《中国药典》三部(2010版)要求建立毒种库,并进行全面检定:电镜观察毒种的形态结构,测定毒种的糖蛋白基因序列,直接免疫荧光法检测毒种的毒力,动物试验法和细胞培养法检测外源因子,免疫小鼠检测毒种的免疫原性,小鼠脑内中和试验法鉴定毒种的特异性,进行外周致病性试验,检测单次病毒收获液的效力。检测应用该毒株制备的疫苗的抗原性,并与上市疫苗进行比较。结果 aGV毒种在电镜下呈典型的子弹状,可见病毒包膜、刺突等结构;aGV株与3aG、PV、CTN-1、CVS株及街毒株糖蛋白基因序列的同源性分别为99%、92%、84%、91%、84%;病毒毒力逐代提高,第8~12代毒力稳定在108~109 FFU/ml;该病毒在Vero细胞上具有良好的适应性,外周致病性降低,无外源因子污染;aGV9和aGV12的中和指数分别为1 000和7 079,3个批次的aGV9免疫保护指数分别为38 019、7 943和13 489;中和抗体检测结果显示,试验组与对照组之间中和抗体效价差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究适应的狂犬病病毒aGV株有望作为人用狂犬病疫苗株应用于生产。
- 郭秀侠杨屹崔文广苗丽丁丽丽韩轼奇王亚军李宇辉
- 关键词:狂犬病疫苗免疫原性中和抗体
- 乙型肝炎表面抗原壳聚糖微球鼻滴疫苗的制备及相关研究
- 抗原的贮存式剂型能够长期诱发强烈的、稳定的免疫反应,微球制剂是全新制剂形式,可满足包封疫苗并缓慢释放疫苗的需要.微球制剂的关键在于载体材料的选择,许多高分子材料均可用于微球制剂的研究.壳聚糖为代表的天然高分子材料以其良好...
- 韩冰李宇辉裴瑾
- 关键词:乙型肝炎表面抗原壳聚糖微球
- 文献传递
- 人用狂犬病疫苗株aGV的研究与应用
- 目的:研究人用狂犬病疫苗株aGV的生物学特性及应用。方法:电镜和荧光显微镜分别观察病毒形态结构及感染状态;免疫荧光法检测病毒毒力;按照《中国药典》三部(2010版)建立毒种库,并进行全面检定;毒种感染Vero细胞后,NI...
- 郭秀侠杨屹崔文广苗丽丁丽丽韩轼奇王亚军李宇辉
- 关键词:狂犬病疫苗免疫原性中和抗体
- 文献传递
- 狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的构建及免疫效果的研究
- 2005年
- 目的构建狂犬病毒糖蛋白基因DNA疫苗,并检测其免疫小鼠的免疫应答。方法用RT-PCR法扩增和分离CTN株狂犬病毒糖蛋白基因,测序后克隆入VR1055载体中,构建重组质粒VR1055-CTN,经碱裂解法提取质粒,并经Sepharose4FF柱层析纯化后免疫NIH小鼠,用ELISA法检测体液抗体,用MTT法检细胞免疫,并进行常规效力试验。结果VR1055-CTNDNA疫苗具有较好的诱导狂犬病毒抗体的能力,在诱导细胞免疫中,刺激脾淋巴细胞转化指数和小鼠血清中的IL-2活性均高于空白载体对照,差异有显著意义(P=0.000)。效力试验的小鼠存活率分别为73%和25%。结论该疫苗既能诱导体液免疫,又能诱导细胞免疫,并具有较好的免疫保护效果。
- 代长海李宇辉袁彦宝郭岩周明岩张莹胡晓明王进于洪涛
- 关键词:DNA疫苗狂犬病毒免疫效果病毒糖蛋白SEPHAROSE
- 狂犬病毒融合糖蛋白DNA疫苗及免疫效果的研究被引量:2
- 2005年
- 目的:构建含两种狂犬病毒疫苗株的融合糖蛋白基因DNA疫苗并对小鼠的免疫效果进行评价.方法:用RT-PCR法分别扩增和分离出SRV9株和CTN株的狂犬病毒糖蛋白部分表位的基因(SRV9毒株的1~252氨基酸和CTN毒株253~524氨基酸),构建含融合G蛋白基因的DNA疫苗质粒VR1055-SRV9CTN.碱裂解法大量提取重组质粒并经Sepharose 4FF柱层析纯化后直接肌肉注射免疫NIH小鼠,用ELISA法和淋巴细胞转化实验分别检测质粒DNA疫苗诱导小鼠产生抗狂犬病毒的体液免疫和细胞免疫效果.CTLL-2依赖细胞株/MTT比色法进行IL-2活性测定.结果:VR1055-SRV9CTN DNA疫苗具有较好的诱生狂犬病毒抗体能力.诱导细胞免疫方面,质粒VR1055-SRV9CTN DNA疫苗和空载体对照组的ConA刺激指数存在显著性差异(t=7.201,P=0.000).小鼠血清中的IL-2活性测定表明DNA疫苗组显著高于空载体组(t=21.616,P=0.000).CVS株RV脑内攻击保护实验中,疫苗组和对照组小鼠存活率分别为63%、25%,二者间差异具有显著性(t=7.065,P=0.008).结论:含狂犬病毒糖蛋白基因VR1055-SRV9CTN DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,具有较好的免疫保护效果.
- 李宇辉谷丽萍崔颖杰代长海袁彦宝郭岩周明岩胡晓明王进于洪涛
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白DNA疫苗体液免疫
- 用微载体系统培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液被引量:9
- 2004年
- 目的 采用生物反应器微载体培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液。方法 用 5L生物反应器培养Vero细胞 ,培养至 4d时接种CTN株狂犬病毒 ,在培养全程对细胞生长所消耗的营养物质及代谢产物进行监测及分析。结果 培养 4d后细胞浓度可达 1 2× 10 7cells ml,培养 3周后的病毒液经ELISA检测A值可达 0 2 1~1 0 6。病毒滴度达 10 - 6 0 ~ 10 - 8 0 LogLD50 ml。病毒液可连续收获 5次。结论 用微载体系统培养Vero细胞可生产高滴度的狂犬病毒液。
- 王树君代长海张莹王进李宇辉胡晓明李光谱于洪涛
- 关键词:VERO细胞
- HBsAg-PLGA缓释疫苗的制备及相关研究被引量:2
- 2007年
- 目的研制PLGA为载体的一针剂免疫乙肝疫苗,观察该疫苗的注射部位炎症及分析使用者的依从性。方法采用复乳溶剂法制备乙型肝炎疫苗微球,单剂注射到实验兔后腿肌肉内观察病理学反应,并随机调查100人对一针免疫乙肝疫苗的使用看法。结果HBsAg-PLGA微球包裹率达55%以上且制备工艺稳定,剂型生物兼容性及注射人群依从性表现良好。结论HBsAg-PLGA缓释疫苗具有一定的研究开发价值。
- 尹文国徐万国李宇辉苏畅韩冰
- 关键词:乙肝病毒表面抗原微球乙肝疫苗依从性