李兴玉
- 作品数：25 被引量：85H指数：5
- 供职机构：上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：上海市高等学校科学技术发展基金国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 巴西蘑菇多糖诱导K562肿瘤细胞凋亡的研究被引量：6
- 2005年
- 应用流式细胞分选仪(Flow cell sorter,FCS)和透射电子显微镜(Transmissional elec-tron microscope,TEM)等技术观察了巴西蘑菇(Agaricus blazei)多糖诱导K562肿瘤细胞凋亡的试验研究。试验发现,流式细胞仪可检测到经巴西蘑菇多糖诱导K562肿瘤96h后产生明显的亚二倍体峰;电镜下观察到K562肿瘤细胞核固缩,核内染色质浓缩、凝聚,紧靠在细胞核膜边沿,形成新月状或环状结构等典型的凋亡细胞的形态变化及凋亡小体。结果表明,巴西蘑菇多糖具有诱导K562肿瘤细胞凋亡的作用。
- 袁丽铭忻茜李兴玉
- 关键词：细胞凋亡
- MNP-hTR复合物对K562细胞增殖影响的实验研究
- 2006年
- 探讨MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物,对K562细胞凋亡和增殖的影响。应用荧光显微镜检测法和集落形成法,分别观察了凋亡细胞的形态学变化和细胞增殖能力。MNP-端粒酶反义核酸复合物可诱导K562细胞凋亡和抑制细胞增殖,两实验组数值经统计学处理,具有非常显著性差异(p分别<0.001)。由此认为,MNP-端粒酶反义核酸复合物对K562白血病细胞具有促进凋亡的作用,此效果与剂量呈依赖性关系(r=0.992)。
- 马燕牛小娟李静高霞李兴玉
- 关键词：K562细胞凋亡荧光检测集落形成
- 人脐血CD133细胞的分离及其体外扩增的研究被引量：4
- 2007年
- 目的：探讨免疫磁性纳米粒子分离人脐血CD133细胞的方法,了解分离出的CD133细胞在体外短期培养中的变化及其在体外扩增的可能性.方法：通过化学沉淀法制备具有超顺磁性的r-Fe2O3纳米粒子,在其表面包裹具有生物亲合性的二氧化硅,并在其表面通过化学修饰使其成为生物功能化的磁性纳米粒子.再通过一定的化学连接方法将单克隆抗体CD133连接到生物功能化的磁性纳米粒子表面使其成为免疫磁性纳米粒子,然后利用自制的免疫磁性纳米粒子从单个核细胞中分离出CD133细胞,并分别对单个核细胞和CD133细胞在体外短期培养中的动态变化进行了初步观察和比较.结果：经免疫磁性纳米粒子分离的脐血中CD133细胞平均数为（5±1.4）×107/ml,占单个核细胞数的（3±0.3）%;单个核细胞（对照组）和CD133细胞（实验组）分别进行红、粒系集落扩增培养14天、21天,实验组中两种造血祖细胞集落扩增倍数都明显高于对照组（P＜0.01）.结论：使用自制的免疫磁性纳米粒子能较好的分离脐血中的CD133细胞,分离与纯化出来的CD133细胞不仅细胞活力不受影响,而且与单个核细胞相比具有更强的增殖能力.
- 谭玲陈勇华张春明陈伟沈亚芳沈鹤柏董亚明李兴玉
- 关键词：CD133造血干细胞
- 姬松茸多糖抗肿瘤的实验研究被引量：19
- 2004年
- 应用细胞培养技术 ,观察了姬松茸多糖对K5 6 2和HL - 6 0细胞系的影响。研究结果表明 ,实验组活细胞数、集落形成明显减少 ,荧光显微镜下所见凋亡细胞显著增加。提示姬松茸多糖具有抗肿瘤效果。为了探讨姬松茸多糖抗肿瘤的机理 ,本实验还应用反义寡聚脱氧核糖核酸技术 ,进一步观察了姬松茸多糖与人端粒酶反义核酸协同诱导HL - 6 0细胞系凋亡的作用 ,实验结果表明 ,姬松茸多糖与反义寡核苷酸联合使用 ,可促进HL- 6 0细胞凋亡。
- 李兴玉王非凡张星星韩西群
- 关键词：姬松茸多糖抗肿瘤作用细胞培养技术细胞凋亡
- p53基因的原核表达与活性测定
- 2009年
- 目的原核表达P53重组蛋白,检测P53蛋白对人类白血病细胞系K562增生的影响。方法运用PCR技术鉴定了pET-p53重组质粒导入BL21菌株中p53基因的存在,并在IPTG的诱导下,大量产生外源基因产物。通过Ni-NAT亲和层析柱纯化分离P53蛋白,SDS-PAGE确定该蛋白准确性。以不同浓度的P53重组蛋白诱导K562细胞后,用MTT比色法、集落形成法、流式细胞术(FCM)测定P53蛋白对靶细胞增生的影响。结果成功地构建了含人野生型p53基因的原核表达载体,纯化了P53重组蛋白。活性测定结果表明,随着P53重组蛋白浓度的增加,K562细胞存活率显著降低,并发现该蛋白能促进肿瘤细胞凋亡,且呈现明显的剂量依赖性,经相关分析,细胞抑制率与P53蛋白浓度呈正相关(r=0.8981),其半数抑制浓度(IC50)为6.74μg/ml。结论P53重组蛋白具有促进K562细胞凋亡的作用。
- 李春炎杨兵李兴玉俞亚东
- 关键词：P53基因K562FCM细胞凋亡
- 茶多糖对小鼠骨髓造血细胞及免疫细胞的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:研究茶叶多糖对小鼠骨髓造血细胞表面抗原表达以及脾淋巴细胞增殖的影响。方法:应用纳米生物技术、免疫学技术和现代细胞生物学研究技术观察了靶细胞表面分化抗原和小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果:FACS检测显示茶多糖对CD4+CD19+CD119+的表达均有促进作用,CD34+细胞随培养时间的延长逐渐减少,各组数值与对照组比,均有明显差异(p<0.01)。MTT结果显示,茶多糖诱导的各组小鼠脾淋巴细胞OD值也明显上升(P<0.01)。结论:茶多糖可促进骨髓造血干细胞向祖细胞分化并促进淋巴细胞的增殖,显示了对造血和免疫的正调节作用。此结果将为进一步开发茶叶的保健功能和治疗作用提供理论依据。
- 杨帆李兴玉
- 关键词：细胞表面抗原茶多糖
- MNP-SH复合物一步法快速分离和纯化mRNA的新方法
- 2008年
- 本文建立了一种快速分离和纯化mRNA的新方法。为避免RT-PCR实验中mRNA降解问题,我们使用磁性纳米粒子,快速有效的从培养的细胞、组织以及脐带血中分离出带有ploy(A)+结尾的mRNA用于实验。研究结果表明,磁性纳米粒子经过修饰连接Oligo(dT)_(16)可直接分离mRNA,其方法操作简单,快捷、省时,可有效地用于基因表达的研究。
- 程呈汤文洁李兴玉
- 关键词：MRNA分离纯化
- 梁金菇多糖对人脐血单个核细胞增殖活性的增强效应及作用机制的实验研究
- 2007年
- [目的]研究梁金菇多糖(LJPS)对人脐血单个核细胞(CBMC)增殖活性和白介素-2受体(IL-2R)生成的影响,为栽培的梁金菇药用价值的开发提供实验依据。[方法]采用四甲基氮唑盐(MTT)比色法检测LJPS体外对CBMC增殖活性的影响,采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)桥联酶标法检测LJPS对CBMC表面IL-2R生成的影响。[结果]1)LJPS能够在体外单独或与人重组白介素-2(rIL-2)协同刺激CBMC的增殖(分别为P<0.05和P<0.005),LJPS的最佳浓度为1mg/L。并且LJPS在rIL-2诱导的脐血-淋巴因子激活的杀伤细胞(CB-LAK)早期加入始能明显增强CB-LAK细胞的增殖活性(P<0.01)。2)LJPS单独或与rIL-2协同均能促进CBMC细胞表面IL-2R的表达(分别为P<0.002,P<0.001)。[结论]LJPS对静止的CBMC有活化效应,而且能使rIL-2诱导的CB-LAK有更强的增殖活性,其作用机制与LJPS能够促进CBMC表达IL-2R有关。
- 吕海容李兴玉
- 关键词：梁金菇多糖脐血单个核细胞增殖活性白介素-2受体
- 磁性纳米微粒分离中药蛋白质的实验研究被引量：16
- 2005年
- 目的:探讨并研究磁性纳米微粒对不同种生物样品中蛋白质的分离方法及效果。方法:磁性纳米微粒与AEAPS反应后,表面修饰并连接-NH2制成蛋白质分离器,通过氨基与羧基的结合及外磁力作用分离蛋白质。结果:MNP-NH2对BSA的结合呈现直线相关(r=0.9942,p<0.001)。对几种来源不同的生物样品中可溶性蛋白的分离结果显示,各实验组数值与对照组比较,均具有显著性差异(P<0.05～0.001)。结论:MNP-NH2对于分离生物样品中蛋白质具有较好的分离效果对蛋白质活性影响较小。
- 李静秦晓民丁焕平陈伟沈鹤柏李兴玉
- 关键词：蛋白质中药活性影响BSANH2MNP
- MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物诱导HL-60细胞凋亡
- 2008年
- 反义寡核苷酸具有抑制细胞基因表达作用,对于病毒感染及癌症的治疗具有潜在疗效,然而由于其在生物介质中的不稳定性和低穿透率,常需要修饰于一定的载体上,纳米粒子便是其良好的载体,修饰后可提高反义寡核苷酸的稳定性.研究应用FACS,MTT比色法,电子显微镜,原子力显微镜,细胞集落法研究MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物体外诱导HL-60细胞(人急性早幼粒细胞白血病细胞系)细胞凋亡情况.研究结果表明:通过MTT比色法检测可知不同的药物浓度对细胞的生长有明显的抑制影响;实验组细胞在诱导后于流式细胞术检测中产生了亚二倍体峰(凋亡峰);通过集落形成及电镜观察都有明显的凋亡现象产生,因此认为MNP-端粒酶反义寡核苷酸复合物具有诱导HL-60细胞凋亡的作用.
- 程呈忻茜陈祥峰李兴玉
- 关键词：磁性纳米粒子细胞凋亡流式细胞术MTT比色法HL-60
