曾波
- 作品数:6 被引量:12H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 可溶性人TRAIL诱导胃癌细胞BGC-823凋亡的研究被引量:7
- 2008年
- 目的通过构建pBud-EGFP-TRAIL质粒体外观察可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对胃癌细胞BGC-823的作用。方法以EFGP基因为报告基因,sTRAIL为目的基因,构建pBud-EGFP-TRAIL双表达质粒,鉴定酶切和测序重组体。经脂质体转染法转染体外培养的胃癌细胞BGC-823,用荧光显微镜观察EGFP的表达,RT-PCR及Western blot进一步检测sTRAIL mRNA及其蛋白的表达,MTT法检测转染后对胃癌细胞的生长抑制率,TUNEL法观察细胞的凋亡情况,流式细胞仪分析转染后胃癌细胞的凋亡率。结果测序结果证实pBud-EGFP-TRAIL载体构建成功,质粒经脂质体转染后,通过表达sTRAIL蛋白对胃癌细胞发挥作用。MTT法显示转染该质粒的细胞的生长抑制率明显高于对照组,TUNEL法显示细胞核固缩,核染色质聚集或断裂,形成凋亡小体。流式细胞仪结果表明转染该质粒的细胞的的凋亡率明显高于对照组。结论在体外初步证实TRAIL能诱导胃癌细胞BGC-823凋亡。
- 李彦姜政向廷秀曾波陶小红王丕龙
- 关键词:肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体BGC-823细胞
- 重组质粒pBud-CD44v6的构建及其在胃癌细胞内的表达被引量:1
- 2007年
- 目的构建含人的肿瘤侵袭和转移的特异性抗原CD44v6编码基因的真核表达的重组载体,进行核苷酸序列分析,并在肿瘤细胞中表达。方法①以pBud作为真核表达载体,选择CD44v6编码基因进行RT-PCR扩增,构建重组表达质粒,进行酶切鉴定和测序分析。②在Lipofectamine 2000的介导下,将构建成功的pBud-CD44v6重组表达质粒转染到肿瘤细胞中,通过免疫组织化学方法检测CD44v6的表达。结果经酶切鉴定和测序分析表明,插入的目的基因片段为CD44v6的编码基因,长为129bp,与GenBank中登录的cDNA相比较,同源性高达100%,且方向正确;重组质粒pBud-CD44v6转染对数生长期胃癌细胞株SGC-7901,进行免疫组织化学检测结果显示,与空质粒转染组对比,重组质粒组肿瘤细胞的细胞质中可见大量CD44v6基因编码的表达,其蛋白呈棕黄色,而对照组呈阴性。结论成功构建了pBud-CD44v6真核表达的重组载体,并在肿瘤细胞中表达。
- 曾波姜政张滨李彦向廷秀陶小红王丕龙
- 关键词:胃肿瘤SGC-7901细胞
- 抑制低氧诱导因子活性的转录载体pTZU6+1 RNAi系统的构建被引量:1
- 2006年
- 目的构建抑制低氧诱导因子(HIF-1a)活性的shRNA表达载体,为进一步探讨其对HIF-1a基因表达的抑制作用。方法设计并合成2对HIF-1a编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4nt和8nt,分别定向克隆至载体pTZU6+l的U6转录启动子下,构建pshRNA-HIF-1al和pshRNA-HIF-1a2重组质粒。结果构建的pshRNA-HIF-1al和pshRNA-HIF-1a2重组载体经双酶切鉴定及插入基因片段序列分析,成功地将目的基因片段插入到预计位点,并且与实验设计完全一致。结论重组载体的成功构建,为进一步研究pshRNA-HIF-1a对HIF-1a活性的抑制作用和基因功能的分析、肿瘤的治疗等奠定了基础。
- 曾波姜政向廷秀黄爱龙王丕龙
- 关键词:SHRNARNAI低氧诱导因子
- 以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗临床应用进展被引量:1
- 2007年
- 曾波姜政王丕龙
- 关键词:树突状细胞肿瘤免疫治疗疫苗抗原
- CD44v6修饰DC肿瘤融合瘤苗抗肿瘤作用和机理研究
- 目的将小鼠骨髓来源的 DC 细胞和 CDd4v6修饰的 SP2/0骨髓瘤细胞融合,以研究融合细胞的抗肿瘤作用和机理,为融合瘤苗免疫治疗癌症患者提供实验依据及理论基础。方法通过 PEG 法将小鼠骨髓来源的 DC 细胞和 C...
- 曾波姜政
- 文献传递
- sTRAIL真核表达质粒对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用被引量:4
- 2009年
- 目的探讨可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)真核表达质粒对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法建立胃癌细胞株BGC-823裸鼠移植瘤模型,成瘤后于瘤内多点注射重组真核表达质粒pBud-EGFP-TRAIL,并设pBud-EGFP组和生理盐水组为对照,观察并记录肿瘤的生长情况。Western blot和RT-PCR检测sTRAIL mRNA和蛋白表达情况,HE染色观察肿瘤组织病理改变,TUNEL法及电镜技术观测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果注射pBud-EGFP-TRAIL组的sTRAIL mRNA和蛋白为阳性,其瘤体大小明显小于pBud-EGFP组和生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色示pBud-EGFP-TRAIL组肿瘤细胞大量死亡,电镜下可见到典型凋亡细胞,TUNEL法显示其凋亡细胞明显增多。结论sTRAIL真核表达质粒pBud-EGFP-TRAIL瘤内注射对人胃癌裸鼠移植瘤有抑制作用。
- 李彦姜政向廷秀曾波陶小红王丕龙
- 关键词:胃肿瘤裸鼠肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体