徐鋆耀 作品数:54 被引量:246 H指数:9 供职机构: 中山大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 语言文字 更多>>
一种基于蛋白自组装的纳米药物载送系统的构建及应用 本发明属于生物制药技术领域,具体涉及一种基于蛋白自组装的纳米药物载送系统的构建及应用,本发明通过非共价键方式,将载药前体小分子与可对小分子结构域进行响应的血清白蛋白体系,以及功能药物分子,纳米晶体(无机晶体)相结合;首先... 王志勇 徐梓涵 彭辰 蔡镓鹂 石晟宏 徐鋆耀文献传递 肝再生磷酸酶-1稳定转染肝癌细胞株的建立及其生物学功能 2015年 目的 构建肝再生磷酸酶-1(PRL-1)真核表达载体,建立稳定过表达PRL-1的肝细胞癌Huh7细胞株,研究PRL-1在Huh7细胞中的生物学功能.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝癌组织总RNA中扩增PRL-1基因编码区域(CDS)全长序列,与双酶切的pMSCV-PIG质粒连接,经PCR及测序鉴定pMSCV-血细胞凝集素(HA)-PRL-1载体构建成功.用293T细胞包装病毒,并感染Huh7细胞,1 mg/L嘌呤霉素持续加压筛选2周后,荧光显微镜、流式细胞仪、实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot检测PRL-1在Huh7中的表达.PRL-1稳定转染细胞株构建成功后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法进行细胞增殖实验、平板克隆形成实验和Transwell侵袭实验研究PRL-1在Huh7细胞中的生物学功能.结果 测序结果显示克隆的PRL-1基因CDS序列完全正确,且正确插入到pMSCV-PIG载体中,荧光显微镜及流式细胞仪检测结果显示细胞稳定转染效率在90%以上,FQ-PCR结果显示PRL-1稳定转染组其mRNA表达是对照组的(4.4±1.5)倍(P<0.05),Western blot结果显示PRL-1在Huh7细胞中过表达.CCK-8细胞增殖实验结果显示PRL-1促进Huh7细胞增殖(P<0.01).PRL-1稳定转染细胞2周克隆形成率为(26.7±1.9)%,明显高于对照组[(7.3±0.8)%,P<0.01].PRL-1稳定转染组较对照组侵袭细胞数量增多(P<0.01).结论 PRL-1肝细胞癌Huh7稳定转染细胞株构建成功,PRL-1促进Huh7细胞增殖、克隆形成及侵袭. 金少文 王开美 徐康 徐鋆耀 褚忠华 王捷关键词:肝细胞癌 反转录病毒载体 生物学功能 腺病毒-tk基因同源重组系统构建的研究 2007年 目的研制能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒细菌内同源重组系统。方法将pBluescriptⅡKDR-tk、ptrack与ptrackCMV质粒转化感受态细菌后扩增,通过PmeI酶线性化穿梭载体ptrackCMV-tk,然后将线性化的穿梭载体ptrackCMV-tk与pAdeasy-1进行重组构建成重组腺病毒质粒;利用整合入重组病毒质粒中的绿色荧光蛋白分别筛选重组后的腺病毒质粒。结果PCR和RT-PCR分析外源基因的表达证实tk基因在DNA和mRNA水平上均能有效表达;荧光显微镜下观察计数GFP阳性细胞数,计算病毒滴度为1.1×1011pfu/L。结论细菌内同源重组系统能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒;绿色荧光蛋白方便早期证实腺病毒的产生。 周军 宋新明 徐鋆耀 王磊 兰平 汪建平关键词:TK基因 腺病毒 基因治疗 完全腹腔镜胆囊癌根治术的临床疗效 被引量:21 2016年 目的探讨完全腹腔镜胆囊癌根治术的安全性及可行性。方法采用回顾性横断面描述性研究方法。收集2013年1月至2015年8月中山大学孙逸仙纪念医院收治的30例行完全腹腔镜胆囊癌根治术患者的临床资料。根据患者病情联合行肝段或肝外胆道切除术,行肝外胆道切除术者需行相应胆肠吻合术。根据术后病理学检查结果,选择行术后辅助化疗。观察指标:(1)手术情况:手术方式、手术时间、术中出血量、术中淋巴结清扫数目。(2)术后情况:术后下床活动时间、术后进食时间、术后拔除引流管时间、术后并发症发生情况、术后住院时间。(3)术后病理学检查结果:肿瘤分期、切缘情况。(4)术后辅助治疗情况。(5)随访情况:患者生存及肿瘤复发、转移情况。采用门诊和电话方式进行随访,随访时间截至2015年12月。随访患者生存及肿瘤复发、转移情况。计量资料以平均数(范围)表示。结果(1)30例患者均顺利完成完全腹腔镜胆囊癌根治术,均联合行肝S4b和s5段切除+Nl区域淋巴结清扫术。其中6例患者肿瘤侵犯肝外胆管致梗阻性黄疸联合行腹腔镜肝外胆道切除+胆肠Roux-en-Y吻合术。无围术期死亡患者。平均手术时间为238min(178~430min),平均术中出血量为250mL(200~600mL),平均术中淋巴结清扫数目为7枚(4~15枚)。(2)患者均于术后第2天下床活动并恢复饮食。平均术后拔除引流管时间为3d(0~25d)。术后2例患者发生并发症,均经对症处理后痊愈。平均术后住院时间为5d(3~28d)。(3)术后病理学检查:30例患者均为R。切除;病理学分期:ⅠB期12例,Ⅱ期10例,ⅢA期7例,ⅢB期1例。(4)1例ⅢB期(pT3N1M0期)患者于术后行吉西他滨+顺铂化疗,其余患者术后未行辅助治疗。(5)30例患者术后均获得随访。随访时间为4~32个月 徐鋆耀 姜海 喻志敏 闵军 陈亚进关键词:胆囊肿瘤 根治性切除术 腹腔镜检查 shRNA干扰SMYD3对肝癌细胞c-Myc表达及凋亡的影响 被引量:9 2008年 目的:观察SMYD3(SET and MYND-domain containing3)基因沉默后c-Myc的表达及对HepG2细胞凋亡的影响.方法:构建针对SMYD3的shRNA干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2和阴性对照质粒Pgenesil-1-hk,同时设空白对照组,采用Lipofectamine2000脂质体介导转染法转染质粒.转染后24、48、72h,RT-PCR检测HepG2细胞SMYD3和c-Myc的表达情况.流式细胞术法检测各组细胞的凋亡.结果:SMYD3、c-Myc基因在HepG2细胞中强表达.RT-PCR显示Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组与阴性对照质粒转染组Pgenesil-1-hk转染24、48、72h后相比,SMYD3基因表达均明显受到抑制(F=67.46,P<0.01;F=176.79,P<0.01;F=175.28,P<0.01),同时c-Myc表达下调(三组之间:F=11.58,P=0.009;F=126.41,P<0.01;F=261.25,P<0.01).Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组细胞早期凋亡率与Pgenesil-1-hk转染组(LSD-t=-13.58,-12.62,均P<0.01)、空白组(LSD-t=-18.62,-17.67,均P<0.01)相比有显著性差异.结论:RNA干扰技术特异性沉默HepG2细胞SMYD3基因后,抑制了c-Myc的表达,促进了HepG2细胞的凋亡. 刘鑫 陈立波 叶进 江军 何军 徐鋆耀 钱伟关键词:C-MYC 短发夹RNA 凋亡 肝癌 血管包绕肿瘤细胞团结构在肝癌、结直肠癌组织及其肝转移瘤的表达 被引量:1 2017年 目的探讨血管包绕肿瘤细胞团(VETC)结构在肝癌、结直肠癌组织及其肝内转移瘤中的表达。
方法收集50例肝癌伴肝内转移患者的组织标本,40例结直肠癌伴肝内转移患者的组织标本,使用免疫组织化学法检测各病例原发肿瘤和肝内转移瘤中VETC结构。结果共收集肝癌样本50例,其中34例原发肝癌组织为VETC阴性,阴性率为68.00%,34例原发肝癌组织阴性者其肝内转移瘤亦为VETC阴性;16例原发肝癌组织为VETC阳性,阳性率为32.00%。在此16例中,肝内转移瘤VETC阳性7例,占原发肿瘤VETC阳性病例数的43.75%,阴性9例。收集结直肠癌样本40例,其原发肿瘤及其肝内转移瘤均为VETC阴性。
结论 VETC结构是肝癌组织中常见现象,而罕见于结直肠癌及其肝转移瘤,VETC结构是肝癌肝内转移的潜在途径之一。 何传超 王若梅 毛凯 张建龙 周振宇 徐鋆耀外科液体治疗的再思考 液体治疗是外科的基本问题,特别是对围手术期病人和危重病人,其主要目的是补充血容量,维持胶体渗透压,保障组织灌注、氧合功能,维持水、电解质和酸碱平衡。近年来,基于晶体液复合使用胶体液的目标-导向液体治疗方案在一定程度上能减... 王捷 徐鋆耀关键词:围手术期 文献传递 贲门周围血管离断术和改良Sugiura手术治疗门静脉高压症的疗效比较 目的:比较贲门周围血管离断术和改良Sugiura手术疗效的差别。
方法:对自1987年3月至2006年6月在我院行断流术治疗门静脉高压症的236例患者(其中行贲门周围血管离断术147例,改良Sugiura手术8... 张贺云 徐鋆耀 陈亚进 肖治宇 陈积圣 区庆嘉 陈汝福 王捷关键词:贲门周围血管离断术 门静脉高压症 临床疗效 文献传递 肝细胞癌门静脉癌栓中肝细胞生长因子及其受体的表达 2008年 目的研究肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met在肝细胞癌门静脉癌栓中的表达,探讨HGF及c-Met的表达与门静脉癌栓形成与发展的关系。方法用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HGF mRNA及c-Met mRNA在20例肝细胞癌门静脉癌栓及其癌旁组织、10例无门静脉癌栓形成的肝细胞癌和癌旁组织及10例正常肝组织中的表达。结果HGF及c-Met在肝癌及癌栓中的阳性表达率均显著高于正常肝组织及癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),HGF及c-Met在癌栓中及肝癌中表达的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),HGF与c-Met在各组织中的表达阳性率高低差异无统计学意义(P>0.05)。HGF及c-Met在肝癌及癌栓中的表达量均显著高于正常肝组织及癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),HGF及c-Met在癌栓中表达量显著高于其在肝癌中表达量(P<0.05),HGF与c-Met在各组织中的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论HGF及c-Met参与了肝癌的形成,而肝癌患者HGF及c-Met量的升高可能是肝癌发展形成门静脉癌栓的原因之一,HGF及c-Met可作为门静脉癌栓形成的监测指标。 龙淼云 黎洪浩 郑启昌 赖东明 徐鋆耀 翁赖鸿关键词:肝癌 门静脉癌栓 肝细胞生长因子 肝细胞生长因子受体 肝胆管细胞癌皮肤转移一例报道 被引量:4 2009年 肝胆管细胞癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma,ICC)是原发性肝癌的一种少见亚型。肝外血行转移最多见于肺,其次为骨脑等。淋巴结转移至肝门淋巴结最多,其次为胰周、腹膜后、主动脉旁及锁骨上淋巴结。此外,向横隔及其附近脏器直接蔓延和腹腔种植转移也不少见。目前肝细胞型肝癌皮肤转移已有相关病例报道,但肝胆管细胞癌皮肤转移检索文献国内尚未见报道。现报道1例如下。 许晓婷 万云乐 徐鋆耀 闵军关键词:肝胆管细胞癌