张赟硕
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十一五”科技攻关项目黑龙江省海外学人科研资助项目高等学校科技创新工程重大项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗猪传染性胃肠炎病毒S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 分别用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达的重组猪传染性胃肠炎病毒/(Transmissible gastroenteritis virus，TGEV/)S蛋白和含有猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因主要抗原位点的重组质粒PC...
- 张赟硕
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体间接ELISA间接免疫荧光
- 文献传递
- DNA免疫制备猪传染性胃肠炎病毒S蛋白单克隆抗体
- 2008年
- 利用含有猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点的重组质粒PCI-Sa免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,间接ELISA方法进行筛选和有限稀释法3次克隆,获得1株稳定分泌抗TGEV重组S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E6D9A12,其染色体平均计数为88±10对,间接ELISA检测制备腹水抗体效价为1:6×105,分泌抗体亚类为IgG2a型。杂交瘤细胞上清与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PRV)、猪伪狂犬病病毒(PrV)均不发生交叉反应;与TGEV感染细胞经间接免疫荧光检测均呈黄绿色荧光;与TGEV经Dot-ELISA检测呈特异性反应。
- 张赟硕李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒DNA免疫单克隆抗体杂交瘤
- 抗李斯特氏菌溶血素单克隆抗体制备及检测LMO的初步应用被引量：5
- 2008年
- 目的制备抗李氏溶血素单克隆(LLO)抗体,初步应用单克隆抗体检测LMO。方法以重组LLO为免疫原,以天然LLO为筛选蛋白,通过淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗LLO单克隆抗体;以ELISA、Westernblot等方法对单克隆抗体进行鉴定;以阻断ELISA法进行检测LMO的探索。结果获得了1株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C4,经鉴定此单抗为IgG1型,属κ链抗体,杂交瘤细胞染色体数目在85～103。ELISA和Westernblot实验表明此单抗对LLO有较好的结合能力,对其他菌分泌的溶血素则无特异结合能力,用阻断ELISA检测LMO的检测时间和最低检测菌数分别为增菌后5h和9.5×105个/mL。结论研制了一株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,初步建立了阻断ELISA检测LMO的方法。
- 秦玉敏李一经赵林立张赟硕乔薪瑗齐炳理
- 关键词：单克隆抗体ELISA
- 抗猪传染性胃肠炎病毒重组S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2008年
- 以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组S蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,间接ELISA方法进行筛选和有限稀释法3次克隆,获得2株稳定分泌抗TGEV重组S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为C7C8B2和B5G8G7,其染色体平均计数均为88±10对,制备腹水抗体效价分别为1∶2×105和1∶104,分泌抗体亚类均为IgM型。2株杂交瘤细胞上清与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PRV)、猪伪狂犬病病毒(PrV)均无交叉反应,与TGEV感染细胞经间接免疫荧光检测均呈黄绿色荧光。
- 张赟硕李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体杂交瘤
- 猪传染性胃肠炎病毒特异性受体APN功能区的初步鉴定被引量：12
- 2009年
- 试验为了构建猪氨肽酶N（pAPN）不同基因片段大小的重组质粒并进行原核表达及纯化，经Western—blot、ELISA方法初步鉴定猪氨肽酶N受体功能区。试验构建重组了质粒pET30a—pAPN1（106～669nt）、pET30a—pAPN2（670-1044 nt）、pET30a—pAPN3（1045-1773nt）、pET30a—pAPN4（1774～2328 nt）、pET30a—pAPN5（2329—2889 nt）、pET30a—pAPN6（106—1044nt）、pET30a—pAPN7（1774—2889 nt）；转化宿主菌BL21（DE3）细胞，IPTG诱导表达蛋白，包涵体经SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳回收纯化；用Western—blot、ELISA方法经抗pAPN多克隆抗体初步筛选出pAPN受体功能区。结果表明：pET30a—pAPN2、pET30a—pAPN3、pET30a—pAPN6、pET30a—pAPN7蛋白均以包涵体形式表达并纯化。pET30a—pAPN3、pET30a-6、pET30a-7能与抗pAPN多抗产生特异性反应。经抗pAPN多抗筛选初步鉴定出其主要抗原功能区在36—153aa、349—591aa、592～963aa内。
- 刘博奇李广兴王衡尹杰超李一经王君伟张赟硕任晓峰
- 关键词：蛋白表达受体
- 噬菌体展示技术对猪传染性胃肠炎病毒受体亲和肽的研究
- 任晓峰尹杰超李一经王君伟张赟硕李广兴李海滨
- 利用大肠杆菌高效表达了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)受体主氨肽酶N蛋白(pAPN)，并进行了纯化和多克隆抗体制备。利用噬菌体展示技术筛选出能与pAPN结合多肽。通过DNA测序、确定了编码多肽序列。利用细胞感染抑制实验证实...
- 关键词：
- 关键词：多肽动物实验
