张洁 作品数:67 被引量:156 H指数:6 供职机构: 云南省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南省应用基础研究计划重点项目 云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
植物病毒学课程教学实践研究 被引量:1 2020年 植物病毒学是研究植物病毒的基础知识、植物病毒的诊断和鉴定、植物病毒病的流行及防控的学科,是高等院校植物保护学、生命科学等学科的重要专业选修课。近几年,笔者针对该课程利用启发式教学及课程思政融入教学的方法等进行了教学实践活动,取得了较好的教学效果。 张洁 丁新伦关键词:植物病毒学 教学实践 启发式教学 云南省红河地区传播番茄斑萎病毒属病毒的蓟马及其寄主植物种类调查 被引量:20 2013年 2011年7月至2012年8月对云南省红河州传播番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒的蓟马种类及其寄主植物进行了系统调查。明确了西花蓟马、花蓟马、烟蓟马和棕榈蓟马4种为传毒蓟马。其寄主植物主要有辣子草、粉花月见草、茴茴蒜等30种以上田间杂草和白菜、蚕豆、番茄等超过20种作物。 郑雪 刘春明 李宏光 张洁 董家红 张仲凯关键词:传毒介体 番茄斑萎病毒2个非结构蛋白VIGS体系的初步构建 2022年 将番茄斑萎病毒(TSWV)的NSm、NSs基因200 bp左右构建到pTRV−PTV00沉默载体上,通过农杆菌GV3101浸润本氏烟。注射10 d左右,待注射PDS基因的植株发白,将注射pTRV−PTV00−NSm、pTRV−PTV00−NSs以及pTRV−PTV00载体的植株接种TSWV,显症后采集系统叶(接种叶上一叶)应用实时荧光定量PCR检测NSm、NSs基因表达量。通过测定NSm、NSs基因表达量发现NSm基因的沉默效率为86.7%、NSs基因的沉默效率为92.00%。结果表明:通过pTRV−PTV00载体构建NSm、NSs基因沉默载体沉默效率接近90.00%,此载体适用于病毒基因沉默载体的构建,且NSm、NSs基因沉默载体能应用后续基因功能研究。 杨婷婷 赵立华 邱润霜 陈思 张洁 李博文 张仲凯 马长乐关键词:番茄斑萎病毒 非结构蛋白 实时荧光定量PCR 2012年元江早稻南方水稻黑条矮缩病及介体昆虫白背飞虱的发生动态研究 被引量:1 2013年 对2012年云南元江地区早稻田南方水稻黑条矮缩病与传毒介体白背飞虱的发生动态的调查研究表明,白背飞虱的虫口数量与南方水稻黑条矮缩病的发病率呈正相关关系(r>0.9),即当白背飞虱数量较大时,南方水稻黑条矮缩病发病率也处于较高水平。 张洁 郑雪 胡剑 董家红 张仲凯关键词:南方水稻黑条矮缩病 白背飞虱 番茄环纹斑点病毒Gn蛋白的原核表达及多抗血清制备 被引量:1 2017年 通过生物信息学预测,番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)Gn蛋白为跨膜蛋白,有3个跨膜结构域,抗原表位预测发现非跨膜区包含有较高的抗原指数区域,因此选择Gn蛋白的非跨膜区进行原核表达及多抗血清制备。用特异性引物,通过RT-PCR从感染TZSV的番茄中扩增出部分Gn基因片段,将获得的片段构建到原核表达载体pET-30a中,获得原核表达载体pET-30a-Gn,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,高效诱导表达了40 kD融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/16 384。利用制备好的抗血清对感染TZSV的病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清特异性良好,可用于TZSV Gn相关的免疫反应实验。 郑宽瑜 尚卫娜 张洁 郑雪 董家红关键词:原核表达 抗血清 植物源天然产物AHO对番茄斑萎病毒属病毒病的田间防效 被引量:9 2014年 【目的】评价植物源天然产物3-丙酮基-3-羟基羟吲哚(3-acetonyl-3-hydroxyoxindole,AHO)对田间番茄斑萎病毒属病毒病的防控效果,为AHO开发成为新的抗病毒剂提供科学依据。【方法】选取5%AHO水剂和生产中常用的7种抗病毒剂(超敏蛋白、氨基寡糖素、盐酸吗啉胍、吗呱乙酸铜、宁南霉素、啸克、苯并噻二唑)在烟株移栽还苗后进行叶面喷施3次,药后调查烟株病毒病发生情况。【结果】供试药剂中除啸克外对大田烟株番茄斑萎病毒属病毒病均有很好的防控效果,连续施用3次后可较好地控制烟田番茄斑萎病毒属病毒病的发生和发展,其中,AHO对番茄斑萎病毒属病毒病的相对防效为79.86%,略低于宁南霉素的相对防效(80.60%);苯并噻二唑的相对防效最高,达83.75%;氨基寡糖素和吗呱乙酸铜的相对防效相当,分别为71.72%和72.67%;超敏蛋白和盐酸吗啉胍的相对防效稍低,分别为68.55%和67.82%;啸克的相对防效最低,仅为44.78%。【结论】AHO对大田烟株番茄斑萎病毒属病毒病有很好的防控效果,其对番茄斑萎病毒属病毒病的效果优于部分市售药剂,具有开发成为防控番茄斑萎病毒属病毒病抗病毒剂的潜力。 陈永对 张洁 吴阔 刘春明 肖俊华 李兴勇 张仲凯 董家红 李宏光关键词:抗病毒剂 竹花叶病毒的研究进展及其作为表达载体的应用 被引量:2 2014年 竹花叶病毒(bamboo mosaic virus,Ba MV)是马铃薯X病毒属(Potexvirus)的重要成员之一,距今为止在竹子上被报道过的唯一一种病毒,可造成竹叶片花叶,竹笋和竹杆内部呈褐色条纹病变等症状,严重影响竹材的经济价值,尤其对中国台湾的竹类栽培区造成了严重的经济损失。目前,对该病毒及其卫星核酸的基因结构和功能已经有了很深入的研究,并且在与寄主植物互作和作为表达载体的应用上有很大的突破。本文围绕Ba MV的研究进展以及在中国大陆的可能性应用前景做出综合性的阐述。 林文武 杨文婷 张洁 宛柏杰 刘宇艳 刘命如 徐尧辉 吴祖建番茄斑萎病毒核衣壳蛋白N及膜多糖蛋白Gn的多克隆抗体制备及应用 被引量:5 2018年 由番茄斑萎病毒Tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV)侵染引起的番茄斑萎病毒病在我国蔬菜、花卉等作物上造成了严重的经济损失。本研究克隆了TSWV核衣蛋白N基因及膜多糖蛋白Gn基因,利用Gateway系统获得N和Gn基因的原核表达载体。将其转化到大肠杆菌表达菌株Rosetta (DE3)细胞内,IPTG诱导表达N蛋白和Gn蛋白,以此为抗原分别免疫新西兰大白兔,制备N蛋白和Gn蛋白的多克隆抗体。Western blot检测结果表明,N蛋白的多克隆抗体能够与N蛋白发生特异性结合反应,间接酶联免疫吸附(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,in-ELISA)分析检测表明抗体滴度为1∶12 800,而Gn蛋白的多克隆抗体特异性差,效价未检出。本研究制备的N蛋白多克隆抗体可用于田间病株的病害诊断,同时有助于开展病毒在介体昆虫内定位、病毒和介体昆虫互作及功能分析的研究。 潘慧 赵忠豪 章松柏 张德咏 张德咏 张洁 李俊凯关键词:番茄斑萎病毒 N蛋白 多克隆抗体 单头西花蓟马总RNA提取方法的比较研究 被引量:1 2017年 Tri Pure法和RNA提取试剂盒法是目前实验室动植物RNA提取的常用方法。本试验通过对两种不同的RNA提取试剂盒与Tri Pure法进行比较,发现Trans公司研发的型号为ER501-01的Trans Zol Up Plus RNA Kit试剂盒适合提取单头西花蓟马总RNA,所得到的RNA纯度和浓度都比较高。该研究结果为通过分子手段研究蓟马等小型昆虫提供理论基础。 徐弢 苏晓霞 张晓林 陈永对 郑雪 郑宽瑜 陈勇 赵立华 刘小烛 张洁关键词:西花蓟马 总RNA 6种杀虫剂对烟田番茄斑萎病毒属病毒传毒蓟马的药效试验 被引量:6 2014年 对云南省红河州泸西县烟田番茄斑萎病毒属病毒的4种主要传毒蓟马进行药效试验。结果表明,6种杀虫剂对烟田番茄斑萎病毒属病毒传毒蓟马均有一定防效,药后1 d除0.3%苦参碱外的其余5种杀虫剂表现出了较强的速效性,对烟田蓟马的防效均在90%以上;60 g/L乙基多杀菌素悬浮剂与20%螺虫乙酯悬浮剂的持效性较强,药后7 d的防效均在82%以上。 张洁 陈永对 吴阔 刘春明 肖俊华 郑雪 董家红 李宏光关键词:烟田 杀虫剂