张汉明 作品数:21 被引量:78 H指数:5 供职机构: 上海第二医科大学基础医学院上海市免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
有限稀释法分析CMIR-CJ小鼠自身反应性T细胞 1993年 口服免疫空弯菌菌苗诱导的慢性粘膜免疫应答(CMIR-CJ)能导致小鼠系统性自身免疫综合征(SAIS)。而SAIS的出现,往往与自身反应性T细胞(auto-T)的活化有关。本文利用CMIR-CJ模型小鼠,用有限稀释分析(LDA)法研究CMIR小鼠体内auto-T,auto-AgT(自身抗原特异性T细胞)及CJ-T(空弯菌特异性T细胞)之间的关系,及其在胸腺、脾脏和淋巴结内的频数分布,探讨CMIR-CJ启动SAIS的机理。结果表明,在CMIR小鼠,auto-T的频数在脾脏较高;auto-AgT的频数在胸腺较高;CJ-T在淋巴结较高。在同一组织内,CJ-T与auto-T、auto-AgT的频数增长呈背离倾向;auto-Ag T(DNA-T与His-T)的增长也不同步,呈优势增殖现象。上述结果提示,CJ-T对auto-T的活化具有启动、辅助作用。持续口服空弯菌菌苗在产生的CMIR,提供了源源不断的CJ-T,使auto-T活化,持续增殖,向不同的auto-AgT分化,参与病理性自身免疫应答。 高建新 张汉明 马宝骊 谢雅莉关键词:有限稀释法 T细胞 影响空弯菌抗原诱导自身免疫应答的因素 被引量:1 1991年 利用慢性粘膜免疫应答小鼠模型,研究在空弯菌抗原(CJ-S131菌苗)诱导下,不同品系、性别的小鼠的自身免疫应答。经肠道,持续用CJ-S131菌苗免疫16周后,用ELISA或CELISA检测小鼠体内的抗ds-DNA,ss-DNA,组蛋白,ENA和胸腺细胞抗体。在五个品系小鼠中,四个品系小鼠(BALB/C,ICR,KM和SMMC/B)均有一种或多种被测的自身抗体升高。其中SMMC/B和KM小鼠的EI值较高,BALB/C和ICR小鼠次之。C57BL/6和对照组无显著性差异,提示对空弯菌抗原诱导的自身免疫应答不敏感。在遗传背景的制约下,性别也影响自身抗体的产生,有三种可能:(1)自身抗体升高主要见于雌性小鼠,如雌性KM小鼠被测的各种自身抗体均有升高;(2)雌性,雄性小鼠均有一种以上自身抗体升高,如SMMC/B和BALB/C小鼠;(3)雌、雄性小鼠的自身抗体均无升高,如C 57BL/6。本文结果表明,空弯菌苗诱导的自身抗体种类和水平,受小鼠的遗传背景和性别两个因素的相互制约和影响。 高建新 马宝骊 张汉明 谢雅莉 黄冬生关键词:菌苗 苯乙酸钠对Hela细胞的生长抑制和分化诱导 1998年 研究非毒性分化诱导剂苯乙酸钠(NaPA),在体外对子宫颈癌Hela细胞的生长、分化及表型的影响。实验结果:1.NaPA能够抑制Hela细胞的着壁依赖性和着壁不依赖性生长.而对正常羊膜组织Wish细胞的生长无显著抑制作用;2.NaPA能够增强Hela细胞表面ICAM-1.HLAl以及Ⅱ类分子的表达:3.以电子显微镜观察到在NaPA处理的Hela细胞中,线粒体、内质网以及弹力丝等丰富.而在NaPA未处理的细胞中,除了大量游离的多聚核糖体之外.上述的细胞结构几乎没有观察到。结果表明NaPA在体外不仅能够选择性抑制子宫颈癌细胞的生长,而且能够有效地诱导细胞的分化及表型转变,为NaPA分化治疗子宫颈癌提供了实验依据。 吉家祥 马宝骊 张汉明关键词:苯乙酸钠 子宫颈癌 HELA细胞 分化 苯乙酸钠增强肿瘤细胞表面HLA分子的表达 被引量:5 1996年 以分化绣导剂苯乙酸钠处理肿瘤细胞,以ELISA检测肿瘤细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子表达的变化。结果发现MCF-7、MDA-453、MKN-45以及Hela细胞表面HLA Ⅰ类分子表达较低,而MKN-28和3AO细胞表面HLA Ⅰ类分子高表达。MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面亦表达HLA Ⅱ类分子,而MCF-7细胞表面缺乏HLA Ⅱ类分子。苯乙酸钠能够诱导MCF-7细胞表面表达HLA Ⅱ类分子;增强MCF-7细胞表面HLA Ⅰ类分子,MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达。并且肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子的表达与苯乙酸钠的作用时间和剂量呈正相关。 吉家祥 马宝骊 王利 张继英 张汉明关键词:苯乙酸钠 肿瘤细胞 ELISA IL-12对肿瘤病人PBMC增殖和杀瘤活性的实验研究 被引量:2 1995年 主要观察了IL-12与IL-2联合对健康人和肿瘤病人PBMC增殖和体外杀瘤活性的影响。实验结果表明,单独应用IL-102对肿瘤病人PHA活化PBMC增殖活性很小,如与低剂量IL-2合用,则可明显促进其增殖效应,表明IL-2可增强IL-12的作用。与单用IL-12相比,当IL-12与低浓度IL-2合用时,健康人和肿瘤病人PBMC对K562细胞和Raji细胞的杀伤活性均明显增强,且对K562细胞株杀伤活性明显强于对Raji细胞株的杀伤活性。上述结果表明,IL-12与IL-2合用对健康人和肿瘤病人PBMC增殖及杀瘤活性影响的格局基本一致。本实验为进一步研究IL-12协同其它因子增强肿瘤病人LM和TIL等免疫细胞抗肿瘤效应并进而使IL-12过渡到临床肿瘤病人治疗提供了重要的实验依据。 杨黎明 张汉明 孙雨 张继英 马宝骊关键词:白细胞介素12 淋巴细胞增殖 杀瘤活性 免疫疗法 免疫删减法制备共刺激分子CD80单克隆抗体及其生物学活性鉴定 被引量:2 2000年 目的:制备共刺激分子CD80单抗并鉴定其生物学活性。方法;采用给经MDA453细胞免疫的小鼠注射环磷酰胺100mg/(kg·次)诱导对MDA453细胞的免疫耐受基础上,再用已建立能稳定表达hCD80分子的MDA453细胞免疫小鼠,取经检测抗体阳性强的小鼠脾细胞,按常规方法制备单抗。通过T增殖阻断实验鉴定其活性。结果:CELL-ELISA、FACS鉴定获得一株抗CD80单抗,腹水效价为10-6,属IgG1亚类。T细胞增殖阻断试验显示,此单抗能部分阻断T细胞对相应刺激的增殖反应。结论:应用环磷酰胺免疫删减法成功制备膜抗原CD80单抗,该单抗有一定应用前景。 周璟 马宝骊 严俊 张继英 张汉明关键词:环磷酰胺 免疫耐受 单克隆抗体 CD80 慢性粘膜免疫应答诱导的小鼠自身免疫综合征 被引量:12 1990年 空弯菌(CJ-S131)慢性感染小鼠具有SLE样自身免疫综合征。本文进一步用甲醛化空弯菌(CJ-S131菌苗)经口免疫BALB/c小鼠,每周两次,持续14周.模拟慢性感染时的慢性肠道粘膜免疫应答.发现免疫小鼠也具有SLE样自身免疫综合征,且较该菌慢性感染小鼠更显著。主要表现有:(1)全身免疫系统的淋巴组织显著增生;(2)B淋巴细胞多克隆激活;(3)多种自身抗体(包括抗ds-DNA.ss-DNA和组蛋白抗体)显著升高;(4)免疫复合物性肾小球肾炎;(5)多器官性(如肝、肠等组织)慢性炎症;(6)血管炎和血管周围炎。在体外自身免疫应答诱导实验中,免疫小鼠的脾细胞培养上清中,免疫球蛋白(总Ig)和抗DNA抗体显著高于非免疫小鼠。上述结果证实.空肠弯菌慢性感染所致的自身免疫综合征.和该菌抗原诱导的慢性肠道粘膜免疫应答有关。本实验为研究感染和自身免疫的关系提供了实用的动物模型。 高建新 马宝骊 谢雅莉 张汉明 黄冬生关键词:综合征 肾小球肾炎 转染CD80(B7-1)基因前后人肿瘤细胞系表面标志表达 1997年 动物实验证实协同刺激分子CD80(B7-1)是促进抗肿瘤免疫应答的重要分子.本文应用RT-PCR,FACS技术检测了人肿瘤细胞系及EBV转化的B细胞CD80的表达,结果表明除Raji细胞、EBV转化的B细胞CD80阳性外,3AO、MCF-7、MDA-453、MKN-45、Hela细胞均为阴性.用我室建立的CD80逆转录病毒载体转染包装细胞PA317,筛选高滴度病毒上情感染人肿瘤细胞,得到CD80阳性表达的肿瘤细胞克隆.利用转染前后的人乳腺癌细胞系MDA-453作ICAM-I、HLA class Ⅰ、classⅡ分子表达的分析,结果表明转染有CD80基因的MDA-453细胞ICAM-Ⅰ、HLA classⅠ分子表达上调,class Ⅱ分子的表达未见改变. 严俊 马宝骊 王顺友 孙雨 张继英 张汉明关键词:CD80 逆转录PCR 肿瘤细胞系 基因转染 HLA-G诱导T细胞免疫耐受的实验研究 被引量:5 2001年 用W6/ 3 2单抗对JEG 3细胞进行免疫荧光染色 ,可见在JEG 3细胞膜表面有高强度的黄绿色荧光。HLA G+的JEG 3细胞作为刺激细胞 ,观察其对淋巴细胞增殖反应的影响 ,结果JEG 3细胞不能刺激淋巴细胞增殖。采用经典的单向混合淋巴细胞培养的方法 ,以转染及未转染HLA G分子的K5 62细胞作为抑制细胞 ,按一定的比例加入反应体系 ,结果表明 ,转染HLA G的K5 62细胞能抑制淋巴细胞的增殖反应 ,该抑制以刺激细胞∶反应细胞∶抑制细胞的比例为 1∶1∶2时效果最明显 ,抑制率为 5 4 1% (P <0 0 1) ,转染空质粒和未转染HLA G的K5 62细胞均无明显抑制作用。外周血淋巴细胞与JEG 3细胞共同孵育 ,碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪观察 ,结果发现 ,HLA G分子能诱导淋巴细胞的凋亡。 韩子英 王利 马宝骊 张继英 张汉明 柏峻 张莉关键词:HLA-G T细胞增殖 免疫耐受 细胞凋亡 免疫荧光染色 空肠弯曲菌HSP43诱导自身免疫机理──分子模拟和抗原优势 被引量:3 1995年 我们曾发现空肠弯曲菌43kD热休克蛋白(HSP43)能诱导小鼠产生自身免疫应答,本文则进一步分析了这种诱导作用的机理。二株针对HSP60保守区序列的单克隆抗体IIH9和ML-30不但能结合人及小鼠细胞中HSP60家族成员,而且也能结合HSP43,表明HSP43、人及小鼠HSP60三者均属同一家族成员,具有序列上的高度同源性。小鼠用空肠弯曲菌免疫后出现了针对10种菌体蛋白的抗体,其中最早被诱导的抗体是针对HSP43的,并且该种抗体在随后80d观察期间内保持了较高活性,表明HSP43是优势抗原。本文结果提示,HSP43较易被免疫系统识别而产生应答,通过和宿主HSP60高度序列同源性而可能呈现分子模拟,从而诱导自身免疫损伤。 臧星星 马宝骊 张汉明 柏峻 王利 曹鹤年关键词:空肠弯曲菌 热休克蛋白 自身免疫 分子模拟