张春民
- 作品数：12 被引量：57H指数：5
- 供职机构：国家安全生产监督管理总局更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 细胞因子在矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清液中的表达及其意义被引量：18
- 2013年
- 目的探讨肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)分泌的6种与肺纤维化有关的细胞因子与矽肺发生发展的关系。方法以29例矽肺患者和3例异物吸入者及3例接尘时间不超过3个月的接矽尘工人为调查对象,收集其肺灌洗回收液,AM分离纯化后37℃培养24h,收集培养上清液,采用人的ELISA试剂盒检测培养上清液中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素1β(interlukin,IL-1β)、IL-8、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta,TGF-β1)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α)及单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的表达水平,分析其与矽肺的关系。结果矽肺患者AM培养上清液中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、IL-8及MCP-1水平均高于对照组(P<0.05),贰期以上患者TNF-α、MCP-1的表达水平高于壹期,TGF-β1则低于壹期患者(P<0.05);持续接触矽尘者IL-1β、TGF-β1和MIP-1α的表达水平高于脱尘者,TNF-α则呈相反的趋势;发病工龄<15a者IL-1β表达水平低于发病工龄≥15a者,MCP-1的表达水平则呈相反的趋势;IL-1β、TNF-α及MCP-1表达水平均与脱尘年限呈负相关。结论矽尘诱发的纤维化有关的炎性细胞因子的差异表达在矽肺发病及进展中起重要作用。
- 姚三巧陈志远白玉萍张春民陈刚余艳琴张志浩张喜英袁扬范雪云袁聚祥关维俊黄京慧马国宣车审言
- 关键词：矽肺
- TNF-α/TNFR/NF-κB通路对煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡调控机制被引量：6
- 2017年
- 目的探讨煤工尘肺(CWP)患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡的肿瘤坏死因子(TNF)-α及其受体(TNFR)信号转导通路调控作用机制。方法采用单纯随机抽样方法,以24例CWP壹期患者为CWP组,以4例煤矿粉尘作业观察对象人员为观察对象组,收集2组人员的支气管肺泡灌洗液分离、纯化AMs,分为对照组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TNF/TNFR组、抗-TNF-α抗体组、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8抑制组和核转录因子(NF)-κB抑制组,进行相应处理后培养24 h,收获细胞,提取蛋白采用免疫印迹法检测信号蛋白TNF-α、TNFR1、TNFR2、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50及NF-κB P65的表达情况。结果 CWP组AMs的TNF-α、TNFR2、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50及NF-κB P65的蛋白相对表达水平均高于观察对象组(P<0.05)。TNF/TNFR组和抗-TNF-α抗体组AMs的TNF-α、TNFR1、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50的蛋白相对表达水平均低于对照组(P<0.05);抗-TNF-α抗体组AMs的上述5个指标均低于NF-κB抑制组(P<0.05)。TNF/TNFR组AMs的TNFR1、Caspase-8和Caspase-3的蛋白相对表达水平均高于SOD组和Caspase-8抑制组(P<0.05),TNFR1、Caspase-8和NF-κB P50的蛋白相对表达水平均低于NF-κB抑制组(P<0.05)。对于CWP患者,TNF/TNFR组AMs的TNFR2和NF-κB P65的蛋白相对表达水平均低于对照组(P<0.05),高于SOD组(P<0.05)。结论 TNF/TNFR/NF-κB信号转导途径介导的AM凋亡在CWP的发病中起重要作用;对TNF/TNFR/NF-κB信号转导通路的不同环节进行抑制,可影响CWP患者凋亡蛋白的表达。
- 余艳琴郝金奇郝金奇张春民姚三巧张春民陈志远白玉萍陈刚张志浩沈福海袁扬黄京慧马国宣黄京慧车审言
- 关键词：煤工尘肺肺泡巨噬细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 矽肺病患者肺泡巨噬细胞死亡受体表达及意义被引量：19
- 2013年
- 目的探讨矽肺病患者肺泡巨噬细胞(AM)死亡受体(DR)的表达水平及其与肺纤维化程度的关系。方法以61例进行肺灌洗的汉族男性观察对象及矽肺病患者为观察组,以13例肺部X射线表现完全正常的汉族男性为对照组,分离、纯化及培养各研究对象的AM,检测3种DR[凋亡蛋白-1(Fas)、肿瘤坏死因子受体-1(TNFR1)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-2]的表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测AM培养上清中的可溶性DR(sDR)水平,采用免疫印迹法检测AM裂解液中3种膜结合型DR(mDR)水平,分析DR表达水平与粉尘接触各因素的关系。结果矽肺病患者膜结合型Fas(mFas)及膜结合型TNFR1(mTNFR1)的相对水平均高于对照组及观察对象(P<0.05),且随着肺部病变的加重而升高;矽肺病患者可溶性Fas(sFas)及可溶性TNFR1(sTNFR1)水平均低于观察对象(P<0.05),且sFas随着肺部病变的加重而下降。结论矽尘诱导的mFas和mTNFR1表达上调、sFas表达下调在矽肺病发病及进展中起重要作用,DR信号通路活化可能是矽肺病发病的重要机制之一。
- 姚三巧陈志远卢遥白玉萍张春民余艳琴张喜英陈刚张志浩车审言徐应军沈福海金玉兰
- 关键词：死亡受体矽肺
- 工作场所空气中重金属检测前处理方法被引量：3
- 2018年
- 本文主要总结了工作场所空气中重金属检测前处理方法,包括电热板消解法、微波消解法、全自动石墨消解法。对各种前处理方法的原理、特点以及优缺点进行对比阐述,并对工作场所空气中重金属检测前处理方法的发展趋势进行了展望。
- 李燕张岩松刘君张春民丁春光
- 关键词：微波消解重金属
- 尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡及其死亡信号调控机制研究被引量：7
- 2010年
- 目的初步研究尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)的凋亡情况以及肿瘤坏死因子-α及其受体(TNF-α/TNFR)信号通路对AM凋亡的调控作用,为尘肺病的早期防治提供依据。方法选取30例尘肺患者为研究对象,收集其肺泡灌洗回收液,分离纯化AM,将实验分为5组,即未处理组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TNF-α/TNFR组、抗-TNF-α组、半胱氨酰天冬氨酸特异蛋白(Caspase)-8抑制剂组。培养24h后,收获AM,分别用光学显微镜、透射电子显微镜、荧光共聚焦显微镜检测AM凋亡的情况。采用SAS8.2软件进行方差分析和2分析。结果光学显微镜、荧光共聚焦显微镜、透射电镜下均可见凋亡细胞染色质浓缩、边缘化、染色质分割成块状、核膜不完整和凋亡小体等典型的凋亡形态。SOD组、抗-TNF-α组、Caspase-8抑制剂组的AM凋亡指数均低于未处理组。结论尘肺患者AM存在一定程度的凋亡,表现为形态学的改变,凋亡程度与接尘性质有关,与尘肺期别、接尘工龄、脱尘年限无关。SOD复合酶、抗-TNF-α抗体、Caspase-8抑制剂可在信号通路的不同环节阻断信号转导,抑制AM凋亡的发生。
- 余艳琴姚三巧白玉萍张春民沈福海徐应军陈志远陈刚张志浩马国宣黄京慧车审言
- 关键词：尘肺肺泡巨噬细胞凋亡
- TNF-α/TNFR信号蛋白在煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中的表达被引量：4
- 2016年
- [目的]研究肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡信号通路中肿瘤坏死因子α(TNF-α)/肿瘤坏死因子受体(TNFR)信号蛋白的表达水平及其规律,探讨TNF-α/TNFR信号蛋白在煤工尘肺肺纤维化过程中的可能作用。[方法]以尘肺诊断中确定的观察对象(4例)及壹期煤工尘肺(CWP)患者(24例,其中脱尘及未脱尘各12例)为研究对象,收集大容量肺灌洗回收液,经分离、纯化、培养裂解肺泡巨噬细胞,AM用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测信号蛋白β-actin、TNF-α、TNFR1、TNFR2、天冬半胱氨酸特异性蛋白酶8(Caspase-8)、天冬半胱氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)、核因子-κB的受体65/50(NF-κB P65及P50),以β-actin为参比,用Flour Chem HD2软件分析各信号蛋白的相对含量。[结果]壹期CWP患者AM表达的TNF-α、TNFR1、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB(P65、P50)、TNFR2水平分别为2.69±1.19、1.95±1.02、2.80±1.95、2.19±1.49、2.70±1.30、2.45±1.32、5.15±1.24,高于观察对象中其相应蛋白(分别为0.93±0.14、1.18±0.19、1.24±0.55、1.44±1.08、1.41±0.26、1.35±0.53、1.07±0.08)的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);在未脱尘者中上述指标表达水平分别是3.544±1.278、2.508±0.925、3.274±2.183、3.079±1.304、3.332±1.062、2.865±1.024、5.817±1.089,高于脱尘者中的表达水平(分别为1.899±1.191、1.318±0.538、1.627±0.740、1.764±0.815、2.068±0.708、1.602±0.672、4.483±1.425),差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]CWP患者AM凋亡信号蛋白Caspase-8、Caspase-3、NF-κB(P65、P50)、TNFR、TNF-α的表达水平上升,脱尘后表达水平降低。表明TNF-α/TNFR信号通路在尘肺发病中可能起一定作用。
- 余艳琴郝金奇姚三巧张春民陈志远白玉萍徐应军沈福海车审言范雪云袁聚祥
- 关键词：煤工尘肺肺泡巨噬细胞
- TRAIL及其受体对煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡调控作用被引量：5
- 2015年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体(TRAILR)信号转导通路在煤工尘肺(CWP)患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡中的作用机制。方法以接触煤尘及煤矽尘的24例观察对象和CWP壹期、贰期患者各22例为研究对象,收集大容量肺灌洗回收液,分离、纯化AM后,分为对照组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TRAIL组、抗-TRAIL抗体组、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8抑制组、核转录因子(NF)-κB抑制剂组,给予相应处理后进行培养。收获细胞后,检测细胞凋亡情况,并提取蛋白采用免疫印迹法检测TRAIL/TRAILR信号转导通路Caspase-3、Caspase-8和死亡受体5(DR5)蛋白相对表达水平。结果 5个处理组AM凋亡指数均低于对照组(P<0.05),TRAIL组AM凋亡指数分别高于SOD组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05);CWP壹期和贰期患者AM凋亡指数均高于观察对象(P<0.05),CWP贰期患者AM凋亡指数高于CWP壹期患者(P<0.05);不同处理和不同程度患者AM凋亡指数的交互作用有统计学意义(P<0.01)。5个处理组Caspase-3、Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平分别低于对照组(P<0.05),TRAIL组Caspase-3和Caspase-8的蛋白相对表达水平分别高于SOD组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05),SOD组DR5蛋白相对表达水平分别低于TRAIL组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05);CWP壹期和贰期患者Caspase-3、Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平均高于观察对象(P<0.05);不同处理和不同程度患者Caspase-3的蛋白相对表达水平的交互作用有统计学意义(P<0.01),不同处理和不同程度患者Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平的交互作用均无统计学意义(P>0.05)。结论 TRAIL/TRAILR信号转导通路介导的AM凋亡可能在CWP发病中发挥一定作用;在不同环节对TRAIL/TRAILR信号转导通路进行抑制或阻断,可有效抑制CWP患者AM凋亡的发生
- 张春民白玉萍余艳琴陈志远张志浩陈刚徐应军沈福海姚三巧
- 关键词：煤工尘肺肺泡巨噬细胞凋亡蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶死亡受体
- 孔雀绿显色法检测大容量肺泡灌洗回收液中的磷脂
- 2011年
- 采用硝酸、高氯酸消化肺灌洗回收液,氧化成磷酸后经NaOH中和为磷酸盐,测定总磷浓度;灌洗回收液中无机磷直接用孔雀绿与磷钼杂多酸生成绿色的络合物进行比色定量;经换算可得灌洗回收液中磷脂含量。方法相对标准偏差为1.69%~4.91%,回收率为96%~100.7%,该方法简便省时,适用于肺泡灌洗回收液中总磷脂含量的测定。
- 白玉萍朱丽余艳琴张春民刘士云
- 关键词：磷脂
- 改良肺灌洗技术在肺泡蛋白沉积症中的应用
- 2009年
- 全肺灌洗术是唯一一种有效治疗肺泡蛋白沉积症的方法。一名通过可视胸腔镜肺活检被确诊患有严重肺泡蛋白沉积症的36岁女性,采用传统(没有改良)的全肺灌洗术反复灌洗疗效不明显,通过采用一种改良的技术方法:即在慢慢灌入并引流出半量的生理盐水时应用人工加压通气,结果出现明显的临床症状和肺功能改善,并且持续1年。我们认为这种改善归功于上面所述的改良技术。
- Roland Bingisser袁扬余艳琴张春民马国宣魏安银
- 关键词：支气管肺泡灌洗肺泡蛋白沉积症
- 凋亡相关蛋白死亡受体5、Caspase-3和Caspase-8在煤工尘肺发生发展中意义被引量：4
- 2011年
- 目的探讨煤工尘肺(CWP)患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡情况、凋亡蛋白的表达情况及其影响因素。方法选取24例接触煤尘或煤矽尘的观察对象和44例CWP患者为研究对象,收集其大容量肺灌洗回收液,分离纯化AM,离体培养24 h,苏木素-伊红(HE)染色,光学显微镜下观察AM的形态特征,用Western blot方法检测死亡受体(DR)5、Caspase-3和Caspase-8的相对水平。结果凋亡的AM染色质浓缩、边缘化、分割成块状;CWP患者AM的凋亡指数高于观察对象(P<0.05),且贰期患者高于壹期患者(P<0.05);观察对象DR5、Caspase-3和Caspase-8的表达量均低于CWP患者(P<0.05);接尘工龄≥20年组DR5、Caspase-3和Caspase-8的表达水平高于<20年组(P<0.05);发病工龄<10年组DR5和Caspase-3的表达水平高于≥10年组(P<0.05)。结论 DR5、Caspase-8和Caspase-3在CWP的发生发展中可能发挥着重要的作用,且凋亡蛋白的表达水平与接尘工龄、发病工龄有关。
- 张春民白玉萍余艳琴陈志远张志浩陈刚徐应军沈福海姚三巧
- 关键词：尘肺肺泡巨噬细胞凋亡蛋白死亡受体5
