张明
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津医科大学第二医院泌尿外科研究所更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 膜反应性溶解抑制物在细胞及小鼠体内的表达
- 2008年
- 目的观察外源基因在猪血管内皮细胞及小鼠体内表达情况。方法体外培养猪血管内皮细胞，脂质体转染法将pcDNA3-ICAM-2- EnhancerCD59cDNA转染猪的血管内皮细胞，以未转染的猪血管内皮细胞为阴性对照，人血细胞为阳性对照，经G418筛选（浓度为100mg／L）获得具有抗性的克隆，通过流式细胞仪检测转染细胞的表达情况。通过显微注射将CD59基因片段导入小鼠授精卵，对出生的小鼠进行基因检测。结果pcDNA3-ICAM-2-Enhancer-CD59cDNA重组质粒在细胞中表达强度为63．1％；转CD59基因小鼠外周血单核细胞（PBMCs）表达强度为73．38％。结论以人细胞间黏附因子Ⅱ（ICAM-2）为启动子并带增强子的CD59重组基因在猪的血管内皮细胞及小鼠体内均高效特异表达。
- 李胜芝刘秉乾张明王广有马腾骧
- 关键词：内皮细胞转基因启动子
- 转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞抗人血清溶破实验被引量：1
- 2006年
- 目的研究转入α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因克服异种移植超急排斥反应(HAR)的作用。方法构建pcDNA3-HTcDNA重组质粒,体外培养猪动脉内皮细胞(PAEC),脂质体转染法将pcDNA3-HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,PCR检测重组基因的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原α—Gal表达。分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作对照。将转染细胞和正常细胞分别以20％、40％和60％人血清孵育2 h,比较溶破细胞百分数。结果重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测正常PAEC与转染PAEC,α-Gal平均荧光强度由1346．81降至194．44,H抗原平均荧光强度由9．10增至215．93;α—Gal M2区由99．98％降至37．180A,H抗原M2区由13．80％升至78．54％。转染细胞以人血清孵育后溶破细胞百分数较正常细胞降低,分别由(32．32±2．37)％、(59．54±4．56)％和(71．46±5．94)％降至(15．78±2．69)％、(30．16±1．46)％和(40．48±3．77)％,差异均有统计学意义(P值均<0．05)。结论转人HT基因PAECα—Gal表达明显降低,H抗原表达升高,对人血清溶破的耐受性增强。转人HT基因可以一定程度抑制HAR。
- 马志方李胜芝刘秉乾张明王广有马腾骧
