张东伟
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划中国科学院科研项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- HCVE2区基因的分子克隆及序列分析被引量：3
- 2001年
- 用RT PCRKIT从西安血站大样抗HCV阳性血清中筛选出HCVRNA阳性血清 ,提取HCV的RNA ,利用随机引物反转录合成其cDNA并进行半巢式PCR反应。将纯化的PCR产物酶切后与表达载体PET 2 2b+连接 ,经过双脱氧末端终止法双向测序 ,得到 85 2bp长的核苷酸序列。通过将该序列与已知不同型的HCVE2序列比较得知 。
- 张东伟梁布锋祁自柏凌世淦
- 关键词：丙型肝炎病毒HVR1
- 丙型肝炎病毒RNA聚合酶活性研究
- 丙型肝炎病毒(HCV)是输血后非甲非乙型肝炎的主要病因.RdRp在HCV病毒基因组的复制中起着关键性的作用.研究RdRp的活性及影响酶活性的各种理化和生物学因素,设计出合成的化学药物,降低或阻断RdRp的酶活性,是研制抗...
- 梁布锋李玮东张东伟龚岷李文良梁钧
- 关键词：丙型肝炎病毒抗病毒药物
- 文献传递网络资源链接
- HCV E2区基因在真核表达系统中的表达被引量：2
- 2001年
- 以原核表达载体 pET E2为模板 ,用PCR的方法重新扩增出带有适于真核表达载体多克隆位点的E2基因。PCR产物经纯化并双酶切后与相同处理的真核表达载体pSecTag2 /Hygro连接并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,重组表达载体在大量扩增并纯化后再转染COS7细胞。收集的培养上清经过Ni 柱纯化 ,用ELISA进行血清检测显示 :6份HCV阳性血清中有 4份检出有E2抗体 ,而 5份HCV阴性血清中也有一份检出有E2抗体。
- 张东伟梁布锋祁自柏凌世淦
- 关键词：基因表达丙肝病毒
- HCV E2区基因在原核系统中的表达被引量：1
- 2003年
- 用提取的重组表达载体pET-E2转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG绣导,再进行SDS-PAGE,可得到有一条约34 kDa的表达带,与理论推测的蛋白分子量一致,通过Western-blot鉴定,证明此带即为目的蛋白带。该产物有一个六聚组氨酸尾,主要以包涵体形式存在;计算机扫描分析考马斯亮兰染色后的蛋白胶显示:目的蛋白占整个菌体蛋白的36％以上,经Ni-柱纯化的E2蛋白纯度可达95%以上;以纯化的E2蛋白为抗原,用ELISA方法检测了20份抗HCV阴阳性血清,结果表明15份抗HCV阳性血清中检出5份E2抗体阳性血清,而5份抗HCV阴性血清中没有检测到E2抗体。
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- 关键词：HCVE2原核系统基因表达纯化
