宫玉波
- 作品数:33 被引量:42H指数:4
- 供职机构:南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- CD25单克隆抗体对大鼠角膜移植术后房水中细胞因子表达的影响被引量:4
- 2008年
- 目的研究CD25单克隆抗体对大鼠角膜的毒性以及对同种异体大鼠角膜移植后房水中细胞因子的影响,探讨其对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治效果。方法①将12只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、50μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、100μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、200μg CD25单克隆抗体结膜下注射组,每组3只。各组大鼠均右眼用药,分别于0、2、4、6、8 d结膜下注射生理盐水及不同剂量的CD25单克隆抗体,共5次。每日行裂隙灯显微镜检查,观察角膜有无水肿、混浊发生,并于第9天取右眼角膜行病理及透射电镜观察角膜各层的变化。②以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体建立角膜移植实验模型。将93只SD大鼠随机分为五组,A组:正常组;B组:角膜移植对照组;C组:CD25单克隆抗体治疗组;D组:CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗组;E组:地塞米松治疗组。B组术后给予生理盐水;C组术后给予CD25单克隆抗体100μg;D组术后给予CD25单克隆抗体100μg联合地塞米松50μg治疗;E组术后给予地塞米松100μg;各共用5次,分别于术后0、2、4、6、8 d经球结膜下注射给药。用裂隙灯观察移植排斥情况。利用逆转录-多聚酶链反应检测植片内IFN-γmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测房水中IFN-γ和IL-4的浓度。结果①50μg CD25单克隆抗体和100μg CD25单克隆抗体对角膜基本无影响;200μg的CD25单克隆抗体组透射电镜检查发现角膜基质细胞及内皮细胞有不同程度的肿胀。②C、D、E组发生排斥反应时间分别为(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d较B组发生排斥反应时间(10.583±1.084)d明显延迟,差异有统计学意义(P<0.05)。正常角膜无IFN-γmRNA的表达,术后11天,B组移植角膜植片内IFN-γmRNA的表达较C、D、E组明显增强(P<0.05)。C、D、E组术后6 d及11 d房水IFN-γ的含量明显低于同期的B组(P<0.05);同C组相比,术后11d D、E组房水IFN-γ的含量�
- 宫玉波陆晓和柯晓云周瑾袁伟汤明芳罗晓阳崔国华
- 关键词:CD25单克隆抗体细胞因子角膜移植
- 腺相关病毒-1介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠角膜基质细胞体内外转染的研究被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨血清1型腺相关病毒(rAAV1)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达及转染率。方法:采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒(rAAV1-EGFP)感染原代培养的SD大鼠角膜基质细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP的表达及阳性率。建立大鼠异体角膜移植模型,用含rAAV1-EGFP转染液的培养基在37℃孵育SD大鼠角膜植片同时浸泡缝线18h,再用此缝线间断缝合,将植片移植到大鼠角膜植床,术后通过荧光体视镜观察Wistar大鼠角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况。结果:按rAAV1-EGFP不同转染倍数(MOI)转染角膜基质细胞。转染后3d,在倒置荧光显微镜下观察到角膜基质细胞的细胞质有GFP阳性表达。体视荧光显微镜观察到大鼠角膜中开始有GFP阳性表达;随MOI值的增高而增强,转染再7~9d达到高峰,此时检测rAAV1-EGFP对角膜基质细胞的转染效率,MOI=10^时是16.3%,MOI=10^4时是30.3%,MOI=10^5时是43.6%,MOI=10^6时是47.5%.rAA1-ECFP在大鼠角膜中的表达也明显增强。结论:rAAV1-ECFP可以在体内外稳定、有转染大鼠角膜基质细胞,是角膜基质细胞理想的报告基因。
- 汤明芳陆晓和周瑾温茜周明乾罗薇袁伟宫玉波
- 关键词:腺相关病毒绿色荧光蛋白质类角膜基质细胞
- 蛋白芯片技术监测大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的发生被引量:1
- 2008年
- 目的利用蛋白质芯片技术双盲监测大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的发生。方法采用弱阳离子交换芯片(WCX2)结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术对穿透性角膜移植术后大鼠血清中表达的免疫排斥反应相关的低分子量差异蛋白进行筛选,并通过双盲法利用蛋白质芯片技术监测筛选结果。结果质荷比0-20000范围内,共检测到58个蛋白峰,其中6个蛋白质峰的表达有统计学意义。双盲法监测结果:血清中出现这6个蛋白质峰的大鼠角膜全部发生免疫排斥反应。结论蛋白芯片技术能够筛选出灵敏度和特异性好的差异表达蛋白,为角膜移植排斥反应病情的治疗监测提供依据。
- 周瑾陆晓和柯晓云汤明芳宫玉波袁伟钟彦彦
- 关键词:角膜移植免疫排斥反应SELDI双盲法
- 角膜缘上皮移植治疗眼表疾病的临床研究
- 研究背景:一、翼状胬肉是较常见的眼表疾病,治疗主要以手术为主,但术后疗效不尽人意,复发率居高不下。目前对其治疗和防止复发依然是眼科临床较为棘手的问题。随着角膜缘干细胞理论的建立和发展,角膜缘上皮移植为眼表疾病的治疗开拓了...
- 宫玉波
- 关键词:角膜缘结膜上皮移植丝裂霉素C
- 文献传递
- 蛋白芯片技术快速筛选穿透性角膜移植大鼠血清中免疫排斥反应相关低相对分子质量差异蛋白
- 2008年
- 目的筛选穿透性角膜移植大鼠血清中免疫排斥反应相关的低相对分子质量差异蛋白。方法采用弱阳离子交换芯片,结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术,对穿透性角膜移植大鼠血清中表达的免疫排斥反应相关的低相对分子质量差异蛋白进行筛选,通过相应软件结合生物信息学方法进行初步分析。结果质荷比0~20000范围内,共检测到58个蛋白峰,其中6个蛋白质峰的表达有统计学意义。结论穿透性角膜移植术后发生免疫排斥反应与未发生免疫排斥反应的大鼠血清中低相对分子质量蛋白存在明显差异,为角膜移植排斥反应病情的治疗监测提供依据。
- 周瑾陆晓和宫玉波袁伟汤明芳钟彦彦
- 关键词:角膜移植免疫排斥反应差异蛋白
- Ad-siICOS-EGFP阻断ICOS共刺激通路抑制角膜移植急性排异反应
- 2011年
- 目的观察Ad-siICOS-EGFP阻断ICOS共刺激通路延长大鼠角膜植片存活时间,及抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥的作用。方法建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C 3组:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;C组为Ad-EGFP注射组。术后观察排斥反应指数RI的变化并记录植片的存活时间。各移植组分别于术后5 d随机取10只大鼠,麻醉处死后,角膜冰冻切片行共聚焦显微镜观察。各组其余大鼠进行角膜植片存活时间统计。结果①各组角膜植片平均存活时间:B组角膜植片平均存活时间最长;②共聚焦显微镜观察GFP表达情况:B组及C组角膜植片可见绿色荧光表达,表达位于角膜上皮层及整个角膜基质层,A组角膜植片未见绿色荧光表达。结论移植术后即刻受体鼠球结膜下注射Ad-siICOS-EGFP,可延长大鼠角膜植片存活时间,抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥反应。
- 袁伟陆晓和宫玉波周瑾
- 关键词:角膜移植
- CsA对急性排斥期大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR4表达的影响
- 目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体4(DR4)与角膜移植急性免疫排斥反应的关系;观察环孢霉素A(CsA)对急排期角膜移植物TRAIL及其受体DR4表达的影响。方法:建立大鼠同种异体穿透角膜移...
- 袁伟陆晓和张永强周瑾宫玉波彭小娟
- 文献传递
- 螺内酯对大鼠角膜新生血管生长的影响被引量:1
- 2009年
- 目的研究醛固酮受体拮抗剂螺内酯对角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)生长的影响,探讨其抑制新生血管的机制。方法经缝线诱导CNV模型SD雌性大鼠20只,随机分为CNV对照组、螺内酯灌胃组(灌胃螺内酯150mg·kg-1·d-1),每组10只10眼;另取大鼠10只不作任何处理作为正常对照组,比较建模后第3天、第7天、第12天各组新生血管的生长情况并计算CNV生长面积,各组大鼠均于术后第12天取角膜行病理组织学检查,并采用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果缝线后各时间点上,新生血管对照组CNV的面积分别为(2.549±1.315)mm2、(13.998±2.999)mm2、(23.266±2.833)mm2,螺内酯灌胃组分别为0mm2、(8.454±2.830)mm2、(15.189±3.676)mm2,2组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。新生血管对照组角膜组织中VEGF的表达量为22.660±4.158,而螺内酯灌胃组为12.460±1.754,与新生血管对照组相比显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论螺内酯全身应用有效地抑制了大鼠CNV的生长,其对VEGF的抑制作用可能是螺内酯抑制CNV的机制之一。
- 周丽娟陆晓和袁伟宫玉波
- 关键词:螺内酯角膜新生血管血管内皮生长因子
- 细胞因子在角膜新生血管形成中的作用被引量:4
- 2005年
- 宫玉波陆晓和
- 关键词:细胞因子角膜血管形成干扰素肿瘤坏死因子
- 白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠高危角膜植片炎性细胞因子IL-1β影响的实验研究
- 目的:探讨炎性细胞因子IL—1β在高危角膜移植免疫排斥反应中的作用及白细胞介素—1受体拮抗剂(IL—1ra)抑制高危角膜移植免疫排斥反应的作用机理。方法:诱导新生血管后的大鼠行穿透性角膜移植术,受体鼠随机分为3组:生理盐...
- 周瑾陆晓和张永强宫玉波袁伟
- 文献传递