周辉
- 作品数:6 被引量:4H指数:1
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- 骨髓基质细胞分化为神经元样细胞后与皮质神经元间突触的建立被引量:1
- 2009年
- 目的观察与大脑皮质神经元共培养的骨髓基质细胞(BMSCs)经诱导分化成神经元样细胞后,与脑皮质神经元之间形成功能性突触的情况。方法无菌条件下取绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓,用贴壁筛选法体外培养获得GFP转基因小鼠BMSCs(GFP-GM-BMSCs),在体外培养、扩增、纯化。取第3代GFP-GM-BMSCs,种植到源于小鼠大脑的原代皮质神经元和胶质细胞中,培养介质为加有20ng/mL表皮生长因子(EGF)、20ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基(Neurobasal-A+2%B27),体外模拟建立细胞移植的共培养体系。共培养第10天,利用FM1-43荧光染料染色活动突触小泡的特性,通过荧光显微镜观察共培养的两种细胞之间形成的突触。结果与神经元共培养的GFP-GM-BMSCs在含有EGF、bFGF的无血清培养基中7d后分化为神经元样细胞。共培养10d后,FM1-43染色阳性的突触囊泡明显增加,主要位于神经元样细胞胞体、突起及其末端结构上。结论在体外模拟细胞移植共培养体系中,分化自GFP-GM-BMSCs的神经元样细胞能与神经元之间形成突触样连接。
- 周辉姜晓丹陈祎招杨丽法志强邹雨汐
- 关键词:突触骨髓基质细胞神经元共培养
- miR-106a-5p靶向STAT3抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭的机制被引量:2
- 2021年
- 目的探究miR-106a-5p靶向信号转导和转录激活因子3(STAT3)调控胶质瘤细胞增殖和侵袭的机制。方法选取2017年1月至2020年12月接受再次手术治疗的脑复发胶质瘤患者肿瘤组织15例及癌旁脑组织(距瘤缘>1.5 cm)5例,体外培养正常小鼠神经元细胞和胶质瘤细胞株GL261,qPCR检测miR-106a-5p水平。将构建的miRNA-NC mimics、miR-106a-5p mimics、miR-106a 5p inhibitor质粒转染GL261作为实验组,正常GL261作为Control组,qPCR检测各组细胞miR-106a-5p、STAT3表达。应用Targetsan预测和双荧光素酶基因报告验证miR-106a-5p与STAT3的靶向关系;CCK-8,Transwell检测各组细胞增殖和侵袭;蛋白质印迹测定凋亡相关蛋白BAX、cl-caspase-3和抑癌基因p21水平。结果miR-106a-5p在人复发胶质瘤组织和GL261中表达显著低于癌旁组织和正常小鼠神经细胞(P<0.05),相比Control组,miR-106a-5p mimics组GL261中miR-106a-5p水平显著升高、STAT3表达显著下降(P<0.01)。miR-106a-5p inhibitor组结果相反(P<0.05)。Targetsan预测和双荧光素酶基因报告证实了STAT3是miR-106a-5p的靶基因。此外,miR-106a-5p mimics组中STAT3表达显著下调,GL261增殖和侵袭明显减少(P<0.05),BAX、cl-caspase-3、p21的表达均显著上升(P<0.05);miR-106a-5p inhibitor组相反(P<0.05)。结论miR-106a-5p低表达于人复发胶质瘤组织和GL261中,通过负调控STAT3表达调节胶质瘤细胞的增殖和侵袭,为研究胶质瘤的复发提供一种新的靶点。
- 周辉李睿春颜大钧蔡东鹏吴文佼钟德泉钟德泉
- 关键词:胶质瘤信号转导和转录激活因子3增殖
- miR--106a/20b介导STAT3表达增强GSC致敏DC在靶向免疫治疗同源胶质瘤中的作用
- 胶质瘤干细胞(Glioma Stem Cell,GSC)是恶性胶质瘤发生、发展及复发的根源。近年来,促进树突状细胞(Dendritic Cell,DC)免疫原性功能的激活从而有效地向T细胞呈递肿瘤抗原,尤其是GSC,被认...
- 周辉
- 关键词:靶向免疫治疗胶质瘤干细胞
- 绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为神经元样细胞
- 2009年
- 目的研究绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓基质细胞(GFP-GM-BMSCs)在体外无血清培养基+细胞因子诱导条件下,向神经细胞分化的能力。方法用贴壁法体外培养GFP-GM-BMSCs,取第3代GFP-GM-BMSCs,用含浓度均为20μg/L的表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基(Neurobasal-A+2%B27)诱导分化。第5天用免疫细胞荧光方法检测巢蛋白(Nestin)的表达,第10天用神经元烯醇化酶(NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学方法鉴定阳性细胞。结果GFP-GM-BMSCs经无血清培养基+细胞因子诱导后,细胞胞体变圆,伸出细长突起,有的突起连接成网,呈神经元样形态。诱导第5天,Nestin阳性表达的细胞为40.24%±5.09%;第10天,NSE阳性、GFAP阳性的细胞分别为36.43%±5.27%和49.73%±6.28%。结论GFP-GM-BMSCs在体外含EGF、bFGF的无血清培养基中,能分化成神经元样细胞。
- 周辉姜晓丹徐如祥蔡颖谦邹雨汐
- 关键词:绿色荧光蛋白骨髓基质细胞细胞分化神经元样细胞
- 骨髓源性神经元样细胞与皮质神经元间功能突触的建立
- 神经干细胞(neural stem cells,NSCs)以其独特的自我更新及分化潜能而受到神经医学界的关注,NSCs移植或促进自体脑内NSCs再生为治疗多种损伤或退行性中枢神经系统(central nervous sy...
- 周辉
- 关键词:骨髓基质细胞皮质神经元神经干细胞自体移植神经元样细胞
- 文献传递
- 骨髓基质细胞移植治疗中枢神经损伤效应被引量:1
- 2009年
- 周辉姜晓丹
- 关键词:细胞移植治疗骨髓基质细胞神经干细胞造血干细胞综合救治措施