吴艳
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：衡阳市科技局资助项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新抑癌基因PIG11高表达HepG2细胞株的建立被引量：4
- 2007年
- 目的构建人PIG11逆转录病毒载体,建立高表达PIG11基因的HepG2细胞,为进一步研究PIG11基因在肝癌细胞中的功能提供一个理想的试验平台。方法将已有的pcDNA3.1/NT-GFP-PIG11质粒用PCR法扩增出PIG11片段,构建含人PIG11 cDNA的重组质粒pLXSN-PIG11。重组载体经PCR鉴定和DNA测序分析。将该重组质粒用lipofectamineTM2000转染包装细胞PA317,获得pLXSN-PIG11逆转录病毒。用病毒感染HepG2细胞,获得PIG11高表达的HepG2细胞株。结果获得384 bp人PIG11基因,测序证明PIG11cDNA编码序列与Genbank中报道的一致,转染PA317细胞后用病毒上清感染HepG2细胞,经RT-PCR检测发现HepG2细胞中PIG11 mRNA表达明显升高。结论成功构建了高表达PIG11基因的HepG2细胞株,为进一步研究其生物学行为奠定了基础。
- 吴艳王晓娟刘小敏曾春亚梁晓秋
- 关键词：逆转录病毒载体HEPG2细胞株
- 活性氧改变在PIG11高表达诱导人肝癌HepG_2细胞凋亡中的作用被引量：14
- 2009年
- 目的:探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)改变在PIG11蛋白高表达诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。方法:本研究采用2’,7’-二氯氢化荧光素二脂(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光探针标记PIG11蛋白高表达肝癌细胞株pLXSN-PIG11-HepG2细胞内ROS,用N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)清除细胞内ROS后,FCM检测细胞内ROS水平的变化以及细胞凋亡率。结果:FCM测定结果显示,pLXSN-PIG11-HepG2细胞内ROS水平(15.60±0.92)明显高于pLXSN-HepG2细胞(4.90±0.70)和HepG2细胞(5.37±1.17),差异有统计学意义(P<0.01)。NAC(10 mmol/L)清除细胞内ROS后,FCM检测显示pLXSN-PIG11-HepG2细胞凋亡率较未清除前明显降低(P<0.01)。结论:PIG11高表达诱导细胞凋亡的机制可能与细胞内ROS水平升高有关。
- 刘小敏王晓娟张杨吴艳梁晓秋
- 关键词：活性氧细胞凋亡
- PIG11基因逆转录病毒载体的构建及其高表达对HepG2细胞凋亡的影响
- 目的:构建人PIG11逆转录病毒载体,建立高表达PIG11基因的HepG2细胞株,为进一步研究PIG11基因在肝癌细胞中的功能及促凋亡作用提供一个理想的试验平台。观察PIG11基因高表达对HepG2细胞凋亡的影响。
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- 吴艳
- 关键词：PIG11逆转录病毒载体HEPG2凋亡
- 文献传递
