吴嘉
- 作品数：11 被引量：63H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p21基因的saRNA表达质粒的构建及功能研究被引量：2
- 2011年
- 目的构建可表达具有RNA激活功能的小激活RNA(saRNA)质粒表达载体,并对其激活前列腺癌细胞PC-3中p21WAF1/CIP1(p21)基因表达的功能进行相关研究。方法人工合成与p21基因启动子特定序列相应的DNA片段及同样长度的随机DNA序列,利用DNA重组技术将这些片段构建到真核小分子双链RNA(dsRNA)表达质粒pGenesil-1中,构建成能表达dsRNA片段的表达质粒载体(dsRNAp21-pGenesil-1)和随机对照dsRNA片段的表达质粒载体(dsRNACon-pGenesil-1)。采用脂质体介导方法,分别将dsRNAp21-pGenesil-1(实验组)、dsRNACon-pGenesil-1(随机对照组)及空白质粒pGenesil-1(空白对照组)转染到体外培养的PC-3细胞,通过荧光染色检测转染效率,采用RT-PCR和免疫组化技术检测各组细胞p21蛋白表达的差异。结果成功构建目的表达载体dsRNAp21-pGenesil-1及随机对照载体dsRNACon-pGenesil-1,将各组质粒转染到PC-3细胞后,实验组p21基因表达明显增强,而随机对照组和空白对照组无明显变化。结论本研究构建的dsRNA表达质粒载体能成功表达saRNA分子,并激活p21基因及蛋白的表达,为研究的激活效应提供有效工具。
- 龚化陈忠胡嘏吴嘉李龙承杨为民叶章群
- 关键词：前列腺肿瘤
- p53表达下调对saRNA介导p21基因激活的影响研究被引量：1
- 2015年
- 目的研究抑制p53基因的表达是否影响小双链RNA(dsRNA)分子dsP21-322对p21基因表达的激活效应。方法体外培养人肾癌ACHN细胞(p53野生型)和膀胱癌5637细胞(p53突变型)。采用RT-PCR方法筛选具有抑制p53基因表达的干扰RNA分子dsP53-3。人工合成具有激活效应的dsRNA分子dsP21-322,以及与人体已知RNA序列无同源性的阴性对照小dsRNA分子dsCon。将上述dsRNA分子转染到两种肿瘤细胞中,每种细胞均分为5组,即:1空白组;2阴性对照组;3dsP21-322单转染组;4dsP53单转染组;5dsP21-322与dsP53共转染组。通过荧光染色检测转染效率,采用Real-time PCR和Western-blot技术检测各组细胞中p53和p21转录和翻译水平上的表达差异。结果 1在单转染组中,dsP21-322能够激活ACHN细胞、5637细胞中p21基因表达;2dsP53-3能够抑制ACHN细胞、5637细胞中p53基因表达;3在共转染组中ACHN细胞、5637细胞中p53基因下调,而dsP21-322依然能够激活p21基因表达。结论外源合成的saRNA分子dsP21-322能激活ACHN细胞、5637细胞中p21基因表达,该激活效应不受p53蛋白表达量的影响。
- 吴嘉陈忠杨为民汪成合盖强强胡嘏
- 关键词：SIRNARNA干扰
- p21saRNA真核表达质粒的构建及其在泌尿系肿瘤细胞中的功能被引量：1
- 2012年
- 目的构建可表达具有RNA激活功能的小分子双链RNA（dsRNA）真核表达质粒，并探讨其调控前列腺癌细胞株PC。3和膀胱癌细胞株T一24中抑癌基因p21 WAFI/CIPI表达的功能。方法构建真核表达质粒dsRNAP21-pGenesil-1，并分别转染至PC-3和T-24细胞株，通过实时定量聚合酶链反应（Real—timeqPCR）和Westernblot检测p21mRNA转录水平和蛋白表达的变化。结果测序结果证实目的表达质粒dsRNAP21-pGenesil-1构建成功，将其转染入PC-3细胞和T-24细胞中，Real—timeqPCR检测p21基因分别被上调4．35倍和2．83倍，Westernblot进一步证明在两种细胞株中p21蛋白表达水平的增加与p21mRNA水平的上调一致，且与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论构建的dsRNAP21-pGenesil-1质粒具备在泌尿系肿瘤中上调抑癌基因p21表达的能力。
- 胡嘏陈忠龚化吴嘉张勇王骥徐华李龙承杨为民叶章群
- 关键词：RNA真核表达质粒P21泌尿系肿瘤
- saRNA在转录水平激活人膀胱癌细胞p21^(WAF1/CIP1)的表达研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨小激活RNA-dsP21-322上调人膀胱癌细胞系T24中抑癌基因p21WAF1/CIP1(p21)表达的效应。进一步分析dsP21-322是否还可上调p21前体mRNA的表达,以及增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系。方法合成靶向p21启动子区的小激活RNA序列dsP21-322及阴性对照(dsControl),并分别转染至T24细胞,RT-qPCR和WesternBlot分别检测p21mRNA、前体mRNA和蛋白表达的变化。ChIP检测RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子富集的改变。结果 RT-qPCR和WesternBlot结果显示,dsP21-322可以明显上调T24细胞系中p21成熟mRNA、前体mRNA及p21蛋白的表达,且与dsControl相比,差异均有统计学意义(P<0.001)。此外,dsP21-322的转染可以明显增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系。结论 dsP21-322上调抑癌基因p21表达是发生在转录水平的基因调控过程,这一特征的发现为后续RNA激活机制的研究提供了部分理论依据。
- 胡嘏陈忠吴嘉张勇王骥郭小林徐华李龙承杨为民叶章群
- T—consling吊带治疗女性压力性尿失禁的早期疗效被引量：6
- 2012年
- 目的 评价T—consling吊带治疗女性压力性尿失禁（stressurinaryincontinence，SUI）的疗效。方法2010年5月至2011年9月我院收治女性SUI患者9例，年龄45～63岁，平均51岁。病程1～5年，术前尿动力学检查诊断为单纯性SUI，腹腔漏尿点压为75～103cmH2O（1cmH2O=0．098kPa），平均87cmH2O，无明显阴道前壁膨出等盆腔脏器脱垂表现。均在硬膜外麻醉下行经阴道前壁切口T—consling吊带尿道中段悬吊术。结果9例手术均顺利完成，手术时间15～25min，平均17min；术中出血量5～30ml。术后3～4d拔除导尿管。术后随访1～17个月，平均9个月。8例尿失禁症状基本缓解，咳嗽等腹压增加时无明显漏尿发生；1例改善，腹部加压时仍有漏尿发生，但较术前明显好转。总的早期治愈率为89％。结论T—consling吊带治疗SUI安全、操作简单易行，近期疗效好。
- 胡嘏陈忠吴嘉张勇袁晓逸陈园杜广辉杨为民叶章群
- 关键词：压力性尿失禁女性
- 小分子双链RNA对人类细胞中抑癌基因p21表达的上调作用被引量：1
- 2012年
- 目的筛选更多的对小分子双链RNA(dsP21-322)介导抑癌基因p21WAF1/CIP1激活起效应的人类细胞系,并初步研究该过程是否依赖p53的表达。方法选择4种表达不同类型p53蛋白的人类细胞系,p53野生型(p53wild type)的人骨肉瘤细胞系U2-OS、人肾上皮细胞系293T,p53突变型(p53mutant type)的人宫颈癌细胞系HeLa及p53缺失(p53null)的人肺腺癌细胞系NCI-H1299,转染dsControl(阴性对照)或dsP21-322至以上细胞,RT-qPCR和Westernblot分别检测p21、p53mRNA和蛋白表达的变化。结果 dsP21-322的转染未明显影响上述细胞系p53的表达;而在U2-OS、HeLa和293T细胞系中均能激活p21的表达,相比dsControl,分别上调p21mRNA的表达3.97倍、4.94倍和4.64倍,Western blot进一步证明在这3种细胞系中p21蛋白表达水平的增加与p21mRNA水平的上调相一致,且与dsControl组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。但是在p53缺失的NCI-H1299细胞系中,dsP21-322则不能上调p21的表达。结论 dsP21-322介导p21激活现象存在于人类细胞,而其未能上调p53缺失细胞系中p21的表达是否提示该过程可能依赖p53的表达尚有待进一步研究。
- 胡嘏陈忠吴嘉张勇徐华杨为民叶章群
- 关键词：P21P53人类细胞
- T_(3a)前列腺癌根治术前是否需要行新辅助治疗
- 2011年
- 根治性前列腺切除术是治疗局限性前列腺癌最有效的方法,主要适用于临床分期为T1～T2的局限性前列腺癌患者,然而近乎66%的前列腺癌患者术前临床分期被低估,根据2002年AJCC的TNM分期,其往往已是T3a期,即肿瘤已侵犯前列腺包膜外,切缘阳性率可高达30%～60%,
- 陈园吴嘉
- 关键词：局限性前列腺癌新辅助治疗根治术前根治性前列腺切除术前列腺癌患者
- 6点与12点前列腺穿刺活组织检查诊断前列腺癌的回顾性比较分析被引量：14
- 2011年
- 目的探讨6点与12点前列腺穿刺活组织检查诊断前列腺癌的差异。方法选择因血清总前列腺特异性抗原（PSA）〉4ng／mL、直肠指诊或前列腺B超检查提示前列腺癌可疑的患者300例，分别接受6点或12点前列腺穿刺活组织检查。患者年龄42～87岁，平均年龄为（68．4±2．1）岁。PSA水平为（20．7±1．7）ng／mL（0．9～128．3ng／mL），其中PSA〈4ng／mL13例，≥4且〈10ng／mL30例，≥10且≤20ng／mL158例，〉20ng／mL99例。前列腺体积13．4～178．5mL，平均体积为（63．4±3．5）mL。前列腺B超检查显示阴性211例，阳性89例；直肠指诊阴性207例，阳性93例。结果6点与12点前列腺穿刺活组织检查的阳性率分别为32．9％（50／152）和41．2％（61／148）。对于PsA≤20ng／mL、前列腺体积≥50mL、B超检查阴性的患者，12点穿刺活组织检查的阳性率显著高于6点法。在12点穿刺活组织检查阳性的病例中，有18例在传统6点穿刺未检测到癌组织，而在添加的6点中检测到。结论12点前列腺穿刺活组织检查比6点穿刺检出前列腺癌的阳性率更高，两种方法穿刺后并发症发生率的差异无统计学意义。
- 吴嘉马扬之陈忠詹鹰蓝儒竹宋晓东杨为民叶章群
- 关键词：前列腺肿瘤穿刺活检前列腺体积前列腺特异性抗原
- 膀胱血管周细胞瘤1例报告并文献复习
- 2014年
- 目的探讨膀胱血管周细胞瘤的临床特点及诊疗方法。方法分析1例膀胱血管周细胞瘤的临床资料并结合文献进行复习。结果患者行经尿道膀胱肿瘤电切术,术后1周痊愈出院,病检结果为膀胱血管周细胞肿瘤(中间型)。随访3个月未见肿瘤复发。结论膀胱血管周细胞瘤极为罕见,术前诊断困难,需经病理证实才能确诊,治疗上应按照恶性肿瘤进行切除,术后需长期随访。
- 张秀涛陈忠吴嘉李凡王涛杜广辉杨为民
- 关键词：膀胱血管周细胞瘤
- 原发性前列腺尿路上皮癌(附1例报告)被引量：2
- 2013年
- 目的探讨原发性前列腺尿路上皮癌的诊断与治疗原则。方法分析1例原发性前列腺尿路上皮癌患者的临床资料,并结合文献复习讨论。结果患者行经尿道前列腺电切术,术后予吡柔比星膀胱灌注化疗。结论原发性前列腺尿路上皮癌是恶性度较高的疾病,确诊主要依赖前列腺穿刺活检及术后病理检查,治疗以手术加膀胱灌注化疗为主,经尿道前列腺电切术不能改善其预后,其预后较其他前列腺癌差。
- 管习国叶勇吴嘉张秀涛李凡王涛陈忠杨为民
- 关键词：前列腺肿瘤尿路上皮癌经尿道前列腺电切术
