吕凌
- 作品数：21 被引量：52H指数：4
- 供职机构：中山医科大学附属第三医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌
- 1995年
- 本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ检测的检出率为９１．４％（３２／３５），而涂片抗酸染色的检出率仅为３４．３％（１２／３５）。两者相比有非常显著性差异（ｘ２＝２４．４７６，Ｐ＜０．００１）。由于改进了ＰＣＲ前痰液标本的处理方法，使整个ＰＣＲ检测过程所需时间缩短至９ｈ。我们认为该ＰＣＲ检测结核杆菌是特异、敏感和快速的，可在临床实验室应用。
- 杨绍基凌小强吕凌高志良李刚姚集鲁
- 关键词：结核杆菌聚合酶链反应结核病
- 建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术被引量：3
- 1992年
- 建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88％,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97％,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82％。
- 吕凌黄仰甦姚集鲁郑锡澄彭文伟
- 关键词：聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA
- 输血及血液制品与慢性HBV感染患者发生HCV重叠感染的关系被引量：2
- 1995年
- 通过检测丙型肝炎抗体与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核糖核酸的方法对广东地区４４２例慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者发生ＨＣＶ重叠感染的状况进行流行病学调查，分析其与输血及血制品的关系。结果显示慢性ＨＢＶ感染患者中ＨＣＶ重叠感染率为９．７３％；其发生主要与治疗性输用血浆有关。与不输血制品相比，输白蛋白、输血浆和输血浆加白蛋白引起ＨＣＶ重叠感染的相对危险度分别为２．１３，１２２．５７和１２５．８４。而且血浆输入量越大，发生重叠感染的危险性也越大。当输注血浆超过１６次，重叠感染率可达７７．７８％
- 邓子德彭文伟姚集鲁陈青吕凌肖杰生俞洪林
- 关键词：输血血液制品乙型肝炎丙型肝炎
- 聚合酶链反应技术结合酶切杂交研究单项抗乙型肝炎病毒核心抗原阳性者的乙型肝炎病毒感染被引量：4
- 1995年
- 以聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增单项抗乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃ）阳性血清的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ。内外两对引物均选自ａｄｒ、ａｄｗ和ａｙｗ３种亚型ＨＢＶ基因组Ｃ基因区的共有序列，扩增产物分别长４２８ｂＰ和６６４ｂＰ，共含一个ＢｇｌⅡ酶切点，酶切后前者产生２９９ｂＰ和１２５ｂＰ、后者产生４０６ｂｐ和２５４ｂｐ各一个限制性片段。以另一条基因位置处于内引物对之间的寡核苷酸制备３２Ｐ－５＇末端标记的探针对之进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移杂交，鉴定了扩增产物的特异性。结果从单项抗ＨＢｃ阳性的８／４２例慢性肝炎和２／１２倒无症状受测者血清中检出ＨＢＶＤＮＡ，提示现症低水平病毒复制和潜在的传染性。
- 吕凌姚集鲁彭文伟
- 关键词：乙型肝炎病毒核心抗原聚合酶链反应
- 66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究
- 1994年
- 以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。
- 吕凌姚集鲁彭文伟高志良
- 关键词：非甲非乙型肝炎丙型肝炎病毒PCR
- 肝细胞癌与HCV、HBV感染关系的病例对照研究被引量：11
- 1994年
- 对来自广东、广西、海南１０４例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者抗－ＨＣＶ和ＨＢｓＡｇ状况按年龄、性别配对和１：２的数量比设对照组进行了病例对照研究。结果表明：ＨＣＣ组抗－ＨＣＶ和ＨＢｓＡｇ阳性率分别为１２．５０％（１３／１０４）和８６．５４％（９０／１０４），分别显著高于对照组的１．４４％（３／２０８），Ｐ＜０．００５）和１３．４６％（２８／２０８，Ｐ＜０．００１）。与抗－ＨＣＶ、ＨＢｓＡｇ双阴性组比较，仅抗－ＨＣＶ阳性、仅ＨＢ－ｓＡｇ阳性以及两者均阳性时发生ＨＣＣ的相对危险度分别为４８．８２、５０．０７和８１．３６，显示ＨＣＶ、ＨＢＶ均与ＨＣＣ强相关，两者重叠感染时有协同致癌作用，作者提出预防和控制ＨＢＶ、ＨＣＶ感染对减少ＨＣＣ发病具有重要意义。
- 周元平彭文伟姚集鲁吕凌吕凌黄洁夫李国辉李国辉
- 关键词：病例对照肝细胞癌肝炎病毒
- 以二氧化硅快速提取HBV－DNA用于双阶变温PCR检测
- 1994年
- 以异硫氰酸胍裂解血清释放核酸使被二氧化硅吸附，经乙醇洗涤后用水悬浮，上清即含纯化ＤＮＡ。结合双阶变温ＰＣＲ建立一种简单快速的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检测方法。该法只需检测１０ｕｌ血清，完成提取和扩增只要３ｈ．操作很易掌握。用之检测５６例ＨＢｓＡｇ＋／ＨＢｅＡｇ＋的血清、４２例ＨＢｓＡｇ＋／ＨＢｅＡｇ－的血清和５４例ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ的血清，结果ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为８６％、５７％和１３％。应用表明这是一种简捷有效的核酸纯化和扩增方法，适于对大量临床样本作检测之用。
- 吕凌姚集鲁彭文伟
- 关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸PCR
- HBV—DNA不同模板制备进行多聚酶链基因扩增被引量：1
- 1994年
- 本文采用 4.2mol/L异硫氰酸胍、25mmol/L柠檬酸钠、0.1mol/L2一巯基乙醇,0.5%(W/V)十二烷基肌氨酸钠作为裂解液进行一步法程序式抽提血清标本HBV—DNA模板用于多聚酶链基因扩增.该法与常规DSD抽提法及微量直接法进行比较,具有方法简单、稳定、不易污染且敏感性高.抽提过程可在1个小时内完成,经酶切及a^(32)P标记探针放射自显影鉴定PCR产物具良好特异性,该法尤其适应于大量临床标本的检测,值得推广使用.
- 高志良姚集鲁吕凌黄仰苏郑锡澄
- 关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸多聚酶链反应
- 重组干扰素治疗慢性丙型肝炎的临床及肝组织学疗效评价被引量：5
- 1994年
- 报告８４例慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者，通过临床、血清学、肝组织学、分子生物学和免疫组织化学等方法，观察应用重组α－干扰素加传统护肝治疗的效果，疗程２４周，并与单用传统护肝治疗的对照组治疗前后各项指标变化比较。疗程结束时结果显示：治疗组６４例中，血清ＡＬＴ复常率为７０．３％，ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率为６７．２％，肝组织学好转率为６５．６％，肝组织内ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率为５１．５％，肝组织内ＨＣＶ－Ａｇ抗原的免疫组化检出率从治疗前的１５．６％减至治疗后的６．３％，分别显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。疗程结束后随访３～６个月，测定ＨＣＶ－ＲＮＡ并动态观察血清ＡＬＴ的变化，部分病人有复发，但治疗组ＡＬＴ复常率及ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转率仍达７０．０％。
- 江元森彭文伟姚集鲁陆玮伦吕凌
- 关键词：丙型肝炎病毒免疫组织化学干扰素
- 乙肝病毒PCR产物的鉴定及单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增被引量：2
- 1994年
- 本文报道ＨＢＶ基因扩增产物的限制性酶切分析和寡核苷酸探针杂交鉴定、应用血清ＨＢＶＤＮＡ的ＰＣＲ扩增产物制备基因探针和单项抗ＨＢｃ阳性血清的ＨＢＶ基因扩增。ＰＣＲ用ａｄｒ、ａｄｗ、ａｙｗ３种亚型ＨＢＶ的Ｃ基因区共有序列为内外两对引物分单次或套式扩增，产物为６６ａｂｐ或４２８ｂｐ，两者序列中段共含－ＢｇＩⅡ酶切点并与一寡核苷酸探针同源。４２８ｂｐ产物被用以缺口平移标记３２Ｐ探针作斑点和转印杂交检测。结合分子杂交的ＰＣＲ结果从单项抗ＨＢｃ阳性的８／４２例慢性肝炎和２／１２例无症状受测者血清中检出ＨＢＶＤＮＡ，证实病毒低度复制和传染性。
- 吕凌姚集鲁彭文伟黄仰甦
- 关键词：聚合酶链反应乙型肝炎病毒
