史新娥
- 作品数：94 被引量：281H指数：9
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- miR-196b-5p促进成肌细胞增殖分化
- 2023年
- MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNA调控骨骼肌的发育,主要表现在肌卫星细胞的激活及增殖、分化、肌管的形成等生物学过程。本实验室前期对大白猪背最长肌(longissimus dorsi,LD)和比目鱼肌(soleus muscle,Sol)进行miRNA测序,筛选鉴定到一个在不同骨骼肌中差异表达并且序列高度保守的miR-196b-5p,目前miR-196b-5p在骨骼肌方面的研究尚未见报道。本研究进一步设计合成miR-196b-5p mimics和inhibitor对C2C12细胞进行miR-196b-5p过表达及干扰表达,利用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR检测、流式细胞术、免疫荧光染色等方法探究miR-196b-5p对成肌细胞增殖分化的影响,并利用生物信息学预测和双荧光素酶报告系统鉴定了miR-196b-5p的靶基因。结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加细胞周期基因Cyclin B、Cyclin D和Cyclin E的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);流式细胞周期检测结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加S期细胞比例(P<0.05),表明miR-196b-5p能够加快细胞周期进程;EdU染色结果显示,过表达miR-196b-5p显著促进细胞增殖能力;相反,抑制miR-196b-5p的表达可以显著减弱成肌细胞增殖能力。进一步的功能研究发现,过表达miR-196b-5p能够显著增加成肌标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达水平(P<0.05);MyHC免疫荧光染色结果显示miR-196b-5p可以促进成肌细胞肌管形成,表明miR-196b-5p可以促进成肌细胞分化。生物信息学预测和双荧光素酶实验证明miR-196b-5p可以靶向Sirt1基因,抑制该基因的表达。改变Sirt1表达,不能够挽救miR-196b-5p影响细胞周期的表型,可以减弱miR-196b-5p对成肌细胞分化的促进作用,表明miR-196b-5p通过靶向Sirt1促进成肌细胞分化。
- 吴玲玲张小玉李晓靳建军杨公社史新娥
- 关键词：成肌细胞增殖分化SIRT1
- RBP4调控猪前体脂肪细胞分化的作用机制研究
- 程佳蒲蕾杨浩郑加盟张振宇麦茵史新娥杨公社
- 关键词：RBP4前体脂肪细胞
- 复合益生菌发酵饲料对大白公猪精液品质的影响
- 2022年
- 为研究复合益生菌发酵饲料对大白公猪精液质量的影响,选择12头大白种公猪,并随机分成两组,开展了复合益生菌发酵饲料饲喂试验,测定公猪血液生理生化指标、免疫性能和精液质量等指标。结果表明,饲喂发酵饲料60 d后,试验组公猪血清尿素氮含量、中间细胞数量以及中间细胞比例明显下降(P<0.05),血液白细胞数和平均红细胞体积显著升高(P<0.05),IgA和IgM含量呈现出上升的趋势(P>0.05)。与对照组相比,试验组公猪的精子活力与密度极显著提高(P<0.01),顶体和质膜完整性以及线粒体膜电位活性显著提高(P<0.05)。试验第120 d,试验组公猪精液中丙二醛的含量和活性氧水平极显著降低(P<0.01),精浆中果糖含量极显著提高(P<0.01)。综上所述,复合益生菌发酵饲料能够显著提高精子密度、活率、质膜和顶体完整性以及精浆果糖含量,改善大白种公猪的免疫力,降低精液的氧化损伤,进而改善精液品质。
- 杜朝晖孙昌辉张眉梁国栋孙世铎史新娥李晓杨公社胡建宏
- 关键词：免疫性能精液品质
- 干扰Sema7A抑制C2C12成肌细胞的增殖和分化被引量：1
- 2014年
- 为研究脑信号蛋白家族(Semaphorins)成员Sema7A对成肌细胞增殖和分化的影响,本文设计并合成了Sema7A基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用此siRNA转染C2C12成肌细胞.通过Hoechst核染和流式细胞术检测细胞增殖情况,免疫荧光检测肌管的形成情况,realtime qPCR和Western印迹技术检测成肌标记基因的变化.结果显示,干扰Sema7A后,C2C12成肌细胞增殖减慢,处在G2和S期的细胞所占的比例明显下降,而G1期细胞的比例升高.免疫荧光检测结果显示,干扰Sema7A后,肌管的直径及MyHC+细胞所占比例均显著降低.Real-time qPCR和Western印迹结果也显示,肌肉分化标志基因MyoD、MyoG、MyHC的mRNA及蛋白质表达均下降.进一步检测Sema7A受体下游信号通路发现,干扰Sema7A后,其下游信号分子PI3K和AKT的磷酸化水平被下调.以上结果表明,Sema7A可以调节C2C12成肌细胞的增殖和分化,可能是通过其受体作用于PI3K/AKT信号通路实现的,这为进一步研究Sema7A在骨骼肌发育中的作用提供实验基础.
- 贾龙李岳峰吴国芳路宏朝杨公社史新娥
- 关键词：C2C12成肌分化
- miR-191通过靶向C/EBPβ抑制猪前体脂肪细胞分化
- 刘帅仇杨米琳董培越史新娥杨公社
- 关键词：猪前体脂肪细胞腺病毒
- 一种高效细胞永生化载体的构建及其功能分析
- 宋子仪杨浩高倩李岳峰史新娥庞卫军杨公社
- 关键词：细胞永生化HTERT慢病毒猪前体脂肪细胞
- 干扰Sirt2促进C2C12成肌细胞分化被引量：4
- 2014年
- Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子.
- 吴国芳路宏朝贾龙宋成创史新娥杨公社孙世铎
- 关键词：成肌分化C2C12
- EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路调节猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化被引量：2
- 2012年
- 为了阐明Wnt/β-catenin信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化中的作用,利用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)处理猪骨骼肌卫星细胞,采用MTT、流式细胞术、免疫荧光和Western印迹等方法检测了细胞增殖和分化情况.结果显示,与对照组相比,EGCG以时间、浓度依赖方式抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖.流式细胞术检测细胞周期结果表明,与对照组相比,经EGCG处理后,猪骨骼肌卫星细胞的G1期细胞比例上升,而G2和S期细胞比例下降,这说明细胞被阻滞在G1期,细胞的增殖受到抑制.免疫荧光检测分化过程中MyHC的表达,与对照组相比,EGCG促进猪骨骼肌卫星细胞的分化,并降低增殖标志基因MyoD以及细胞周期蛋白D的表达量,而提高了分化标志基因MyoG和MyHC的表达量.在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化过程中,EGCG降低β-联蛋白的表达量,且核内的β-联蛋白明显减少.结果表明,EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖,促进其分化.
- 陈宗正仇杨吴国芳史新娥沈清武杨公社孙世铎
- 关键词：骨骼肌卫星细胞
- 阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化被引量：17
- 2014年
- 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。
- 史新娥吴国芳宋子仪路宏朝贾龙朱嘉宇杨公社
- 关键词：PI3KAKT通路FOXO1骨骼肌卫星细胞成肌分化FOXO1
- 过磷酸钙与双氰胺对猪粪便的堆肥效果研究
- 2021年
- 为研究过磷酸钙(SSP)与双氰胺(DCD)对猪固体粪便堆肥效果的影响,以猪场经固液分离后的固体粪便为原材料,分别以过磷酸钙和双氰胺为添加剂进行好氧堆肥试验,并测定堆肥前后各成分的变化。结果表明:经堆肥处理后,各处理组有机碳含量显著降低(P<0.05),与堆肥前相比SSP处理组、DCD处理组和对照组分别降低了12.64%、15.79%、8.38%,SSP和DCD均具有促进有机碳降解的作用,其中DCD处理效果最好;不同处理组全N含量均显著提升(P<0.05),但SSP处理组全N含量显著高于DCD处理组和对照组(P<0.05),处理后全N的含量为23.56 g/kg;堆肥后的总P含量SSP处理组显著高于DCD处理组和对照组(P<0.05),SSP处理组总P含量达到15.43 g/kg。因此,SSP和DCD均可作为添加剂加快堆肥中有机质的降解,提高堆肥产品中全N及全P的含量,其中添加SSP的堆肥效果较好,堆肥后可以作为氮肥有机肥进行施用。研究结果对猪粪堆肥中添加剂的选择具有一定的参考意义。
- 孙稳平王智牛统娟刘涛赵梦洁刘伟东史新娥宁小敏张巨亭胡建宏
- 关键词：猪粪过磷酸钙双氰胺堆肥
