卢琳 作品数:9 被引量:5 H指数:2 供职机构: 第二军医大学免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 更多>>
人IL-24的重组表达、纯化及其对人树突状细胞的功能调控 白细胞介素24(IL-24)是1995年由美国哥伦比亚大学的Jiang等人发现的一种新型细胞因子。2001年,基于对其基因定位、分子结构和细胞因子样特性的研究发现,被正式命名为白细胞介素24(IL-24)。目前的研究表明... 卢琳文献传递 白细胞介素24对人树突状细胞活化和成熟的诱导作用 被引量:3 2006年 目的:研究白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)对人外周血单核细胞来源树突状细胞(dendriticcell,DC)表型及抗原提呈功能的影响。方法:利用Westernblot检测DC培养上清中IL-24的分泌水平;利用半定量RT-PCR方法分析不同条件下DC表达IL-24受体及趋化因子受体的情况;通过流式细胞术分析检测IL-24共培养后DC细胞表面CD80、CD86、MHCⅡ类分子的表达水平;采用体外混合淋巴细胞实验分析经IL-24共培养对DC抗原提呈功能的影响。结果:体外培养过程中,用LPS刺激DC可诱导其分泌IL-24;同时,LPS还能上调DC表达IL-24受体亚单位IL-22R1。IL-24作用于DC可上调DC细胞表面CD80、CD86及MHCⅡ类分子的表达,并增强DC对T细胞的抗原提呈功能。结论:IL-24这一新型的细胞因子在体外实验中能促进DC的表型成熟,增强DC的抗原提呈功能。 卢琳 陈国友 蒋应明 张意 万涛 安华章 曹雪涛关键词:白细胞介素24 树突状细胞 细胞因子 趋化因子 重组人干细胞因子的原核表达载体、工程菌及制备方法 本发明涉及高效表达重组人干细胞因子(rhSCF)的表达载体、工程菌及制备方法。本发明还提供了通过优选的培养基成分及优化发酵参数,建立了工程菌高密度发酵方法。还提供了通过包涵体变性、蛋白复性、色谱分离制备高纯度重组人干细胞... 陈国友 蒋应明 黄欣 张意 卢琳 施群英 曹雪涛文献传递 酵母表达的MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的双重生物学功能及相关机制研究 <正>γ型巨噬细胞炎性蛋白(MIP-2γ)是我们从人树突状细胞(DC)的cDNA文库中独立克隆的一个不含ELR基序的新型CXC类趋化因子。初步研究表明MIP-2γ不仅对未成熟DC、造血干/祖细胞等造血、免疫细胞具有趋化作... 张意 陈国友 王建莉 于益芝 蒋应明 卢琳 曹雪涛文献传递 人IL-24的重组表达、纯化及其对人树突状细胞的功能调控 白细胞介素24(Interleukin-24,IL-24)原先被命名为黑色素瘤分化相关基因7(melanoma differentiation-associated gene 7,mda-7),是1995年由美国哥伦比亚... 卢琳关键词:白细胞介素24 树突状细胞 细胞因子 趋化因子 细菌脂多糖 文献传递 重组人干细胞因子的原核表达载体、工程菌及制备方法 本发明涉及高效表达重组人干细胞因子(rhSCF)的表达载体、工程菌及制备方法。本发明还提供了通过优选的培养基成分及优化发酵参数,建立了工程菌高密度发酵方法。还提供了通过包涵体变性、蛋白复性、色谱分离制备高纯度重组人干细胞... 陈国友 蒋应明 黄欣 张意 卢琳 施群英 曹雪涛文献传递 基因工程人干细胞因子原核表达、纯化及生物学活性研究 被引量:2 2002年 目的:探索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cell factor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺。方法:研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响。结果:rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高。灰度扫描显示热诱导后2h开始表达,6h表达量最高,目的蛋白约可达菌体总蛋白30%。高表达蛋白经复性后,可用酸沉淀作粗分离纯化,随后用阳离子交换层析分离,纯度达80%,经反相层析去除二聚体后,最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液,最终获得纯度>95%和经活性>6×10^5U/mg的rhSCF制品。结论:成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺,为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础。 陈国友 厉永建 蒋应明 张意 黄欣 姜波 施群英 卢琳 陆君燕关键词:基因工程 干细胞因子 蛋白纯化 生物学活性 MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的构建、表达及其双重生物学功能的初步研究 2004年 目的:利用基因工程技术制备具有双重生物学活性的MIP-2γ/GM—CSF融合蛋白。方法:通过引物设计和分级克隆的策略构建了MIP-2γ/GM—CSF融合基因真核表达载体,MIP-2γ与GM-CSF由(Gly4Ser)3相连;瞬时转染293-T细胞后收集含融合蛋白的细胞培养上清;研究了该融合蛋白在体外的促造血细胞增殖活性和对免疫细胞的趋化活性。结果:MIP-2γ/GM—CSF融合基因载体构建正确;融合蛋白分子量约为24.9 kD;初步生物学功能研究表明,融合蛋白能有效促进TF—1细胞增殖,比活性约为2.2×107IU/mg,并能显著刺激骨髓细胞的集落形成;融合蛋白能有效趋化未成熟树突状细胞和CD3+T细胞。结论:MIP-2γ/GM—CSF融合蛋白具有促进造血和趋化免疫细胞的双重活性,有望成为在造血调控和抗肿瘤免疫中具有良好开发应用前景的新型细胞因子。 张意 陈国友 王建莉 卢琳 蒋应明 于益芝 曹雪涛关键词:融合蛋白 GM-CSF 造血 趋化 炎性因子对人树突状细胞表达神经生长因子及其受体的调控作用及其信号转导机制研究 目的:探明神经生长因子(NGF)在树突状细胞(DC)中的表达、调控及功能情况。方法:常规方法分离培养人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC),流式细胞仪、ELISA和RT-PCR检测NGF受体在MoDCs表达情况,接着观... 蒋应明 陈国友 卢琳 安华章 张意 曹雪涛关键词:神经生长因子 P75NTR 信号转导 文献传递