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有机阴离子转运蛋白1(OAT1)在马兜铃酸Ⅰ肾细胞转运及其细胞毒性中的作用: 目的：探讨有机阴离子转运蛋白1(OAT1)在马兜铃酸I(AAI)肾细胞转运中的作用及其毒效关系。方法：体外构建重组大鼠OAT1(rOAT1)基因的真核表达质粒，将rOAT1重组质粒导入人胚肾细胞(HRK 29...; 张锐阳晓刘眉伍军张云芳彭文兴孔庆瑜董秀清余学清; 关键词：肾脏疾病马兜铃酸细胞病理学; 文献传递

血管紧张素2诱导的TLR4表达在LPS诱导腹膜间皮细胞CD40表达中的作用: 目的观察血管紧张Ⅱ(AngⅡ)对原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)Toll样受体4(TLR4)表达的影响及其在脂多糖(LPS)诱导的核转录因子κB(NF-κB)活化及CD40表达中的作用。方法分离及培养RPMCs,常...; 伍军阳晓张云芳张锐董秀清范瑾瑾刘眉余学清; 文献传递

有机阴离子转运蛋白1(OAT1)在马兜铃酸肾细胞转运及其细胞毒性中的作用: 目的近端肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白1(OAT1)在肾脏排泄内源性代谢产物和清除外源性毒物中发挥重要作用。马兜铃酸(AA)属于小分子有机阴离子,OAT1是否参与AA转运尚不清楚。本研究探讨OAT1在马兜铃酸Ⅰ(AAI...; 张锐阳晓刘眉伍军张云芳彭文兴孔庆瑜董秀清周树峰余学清; 文献传递

肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白1在马兜铃酸Ⅰ跨细胞转运及其在细胞毒性中的作用被引量：4: 2009年; 目的探讨肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白1（OAT1）在马兜铃酸Ⅰ（AAⅠ）跨细胞转运中的作用及其毒效关系。方法体外构建重组大鼠OAT1（rOAT1）基因的真核表达质粒，将含rOAT1质粒导入人胚肾细胞（HEK-293）。观察rOAT1及被其特异性底物对氨基马尿酸（PAH）阻断后对AAⅠ摄取的作用。并分别观察不同浓度AAⅠ对转染细胞caspase-3mRNA表达和细胞凋亡的影响。Western印迹检测转染细胞rOAT1表达；毛细管电泳法检测细胞内PAH浓度；高效液相色谱法（HPLC）检测细胞内AA浓度。RT—PCR检测细胞caspase-3mRNA表达；流式细胞法（AnnexinV—FITC）检测细胞凋亡水平。结果转染rOAT1质粒的HEK-293细胞特异性表达rOAT1。以40、80、120、160mg／LAAⅠ分别刺激细胞45min，转染rOAT1组细胞内AAⅠ浓度显著高于空载体组（均P〈0．05）。以120mg／LAAⅠ分别刺激细胞30、60、90、120min，转染组细胞AAⅠ浓度显著高于空载体组（均P〈0．05）。加入PAH（5mmol／L）特异性阻断OAT135min后，以上述不同浓度AAⅠ分别刺激转染细胞，细胞内AAⅠ浓度显著低于未阻断组（均P〈0．05）。以上述不同浓度AAⅠ分别刺激转染细胞和空载体细胞，两组细胞caspase-3mRNA表达及细胞凋亡随AAⅠ浓度上升而增加，转染组细胞凋亡率显著高于空载体组（均P〈0．05）。结论转染含rOAT1质粒的HEK-293细胞表达rOAT1。AAⅠ呈浓度依赖性和时间依赖性进入IOAT1转染细胞，并呈剂量依赖性诱导OAT1表达细胞凋亡。提示OAT1介导AAⅠ的肾细胞转运及细胞毒性。; 张锐阳晓刘眉伍军张云芳彭文兴孔庆瑜董秀清余学清; 关键词：马兜铃酸转染肾毒性

血管紧张素Ⅱ诱导Toll样受体4在腹膜间皮细胞的表达及其对脂多糖诱导CD40表达的影响: 2008年; 目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对原代培养大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在脂多糖（LPS）诱导的核转录因子κB（NF－κB）活化及CD40表达中的作用。方法分离及培养RPMC。用不同浓度AngⅡ（10。、10、10、10。mt，l／l一）刺激细胞及用10’mol／L AngⅡ刺激细胞不川时问（mltNA为1、2、4、8、12、24、48h和蚩r1为6、12、24、36、4811），观察血管紧张素l刑受怵（ATIR）阻滞剂洛沙m（10。mol／L）和血竹紧张素2剐受休【AT2It）阻滞制PDl23177（10_ll（11／l。）对AngⅡ诱岢TLt／4表达的影响？将细胞随机分为下列4组：埘照组、AngⅡ（10mol／I。）组、LPSllmg／L）组、AngⅡ（10。mo]／L）＋LPS（1mg／L）组，观察AngⅡ对I。l，s诱导的NF-κB激活和CD40表达的影响。RT—PCR检测TLR4、CD40ml＇lNA表达；Weslern印迹愉测rFLtl4、IκBc~、磷酸化IκBα（p-IκBα）、NF-κBp65、磷酸化NF—κB（p—p65）蛋白表达；免疫荧光检测细胞NF－κB p65形单位的表达及分布。结果（1）10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol／L AngⅡ作用RPMC 12h，TLR4 mRNA表达分别增加70．5％、89．5％、102．9％和121．9％；作用24h TLR4蛋白表达分别增加12．1％、27．7％、51．2％和41．6％。AngⅡ（10^-7mol／L）作用RPMC不同时间，TLR4 mRNA表达高峰为8h和12l·（P〈0．01），蛋白表达高峰为12h和24h（P〈0．01）。（2）洛沙坦阻断后，AngⅡ诱导的TLR4表达与未阻断组比较，下调33．5％（P〈0．05）。PD123177对AngⅡ诱导的TLR4表达无显著影响（P〉0．05）。（3）与正常对照组比较，LPS作用60min p-IκBα／IκBα、p-p65／p65表达分别上调362．6％（P〈0．01）和67．4％（P〈0．05）；作用4h CD40 mRNA表达上调299．9％（P〈0．01）；与LPS组比较，AngⅡ预刺激24h加LPS作用60min，p-IκBα／IκBα、p-p65／p65表达分别上调49．1％（P〈0．01）和29．3％（P〈0．05）�; 伍军阳晓张云芳张锐董秀清范瑾瑾刘眉余学清; 关键词：核转录因子ΚB 脂多糖类 CD40 腹膜间皮细胞

罗格列酮通过核因子κB抑制脂多糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1的表达被引量：2: 2009年; 目的探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的体外培养大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响以及调节机制。方法分离及培养大鼠原代腹膜间皮细胞。将细胞随机分为正常对照组、LPS（5mg／L）组、BAY11-7085（NF-κB抑制剂）组（5μmol／L预刺激3h后加入LPS作用3h）、不同浓度罗格列酮（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体1配体）组（10、20μmol／L分别预处理3h再加入LPS5mg／L）、GW9662（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体v拮抗剂）预处理组（预处理3h后加入罗格列酮10μmol／L，3h后再加入LPS5mg／L）和溶媒对照组。加入LPS后1h收集细胞检测核因子κB（NF—κB）p65水平；3h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1基囚表达；24h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1蛋白表达。RT-PCR法检测基因表达；Western印迹和免疫荧光方法检测蛋白表达及核因子磷酸化。结果（1）常规培养的腹膜间皮细胞表达基础量CD40和ICAM-1，LPS显著上调其表达（P〈0．05）；LPS作用1h时腹膜间皮细胞磷酸化NF-κBp65活化水平显著增高，与对照组差异有统计学意义（1．10±0．17比0．55±0．06，P〈0．05）。（2）NF-κB抑制剂BAY11—7085预处理后LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40和ICAM-1表达显著低于LPS组（0．22±0．11比1．10±0．17，P〈0．01；0．34±0．02比0．50±0．06，P〈0．05；0．35±0．16比0．74±0．03，P〈0．05）。（3）罗格列酮预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40以及ICAM-1蛋白表达亦显著低于LPS组（0．77±0．08比0．90±0．10，P〈0．01；0．79±0．16比0．99±0．06，P〈0．05；0．83±0．20比1．22±0．13，P〈0．05）。GW9662和罗格列酮联合预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平与罗格列酮预处理组差异无统计学意义，但CD40和ICAM-1表达显著高于罗格列酮预处理组（0．95±0．19比0．79±0．16；1．04±0．24比0．83±0�; 张云芳阳晓伍军王雅宁邹循亮张锐刘眉郭群英骆宁董秀清余学清; 关键词：脂多糖类 CD40 罗格列酮腹膜间皮细胞

有机阴离子转运蛋白在药物肾脏转运中的作用被引量：4: 2009年; 近端肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白家族(OATs)介导多种内源性和外源性有机阴离子包括多种药物的肾脏分泌和重吸收。其中OAT1和OAT3主要表达在近端肾小管上皮细胞基底侧膜,在介导有机阴离子进入肾小管上皮细胞中发挥重要作用。本文综述了OAT1和OAT3对药物肾脏转运以及药物相互作用的影响。; 刘眉阳晓余学清; 关键词：有机阴离子转运蛋白近端肾小管药物相互作用

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刘眉

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