刘满杏
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市科委课题更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 轮状病毒VP7-U基因在胡萝卜中表达的免疫原性分析被引量：3
- 2012年
- 轮状病毒是一种危害人类健康的腹泻病毒,缺乏可控性药物。将优化部分密码子的轮状病毒VP7基因(VP7-U基因)整合到胡萝卜(Daucus carota)植株中,并利用PCR、Western blot、ELISA等方法检测转VP7-U基因胡萝卜的蛋白表达情况。然后利用不同浓度的阳性VP7-U胡萝卜蛋白灌服小鼠,以灌服正常胡萝卜植株蛋白的小鼠为阴性对照,以灌服阳性细菌蛋白的小鼠为阳性对照,灌服4次后利用ELISA方法检测小鼠体内的IgG含量。结果表明,转VP7-U基因的胡萝卜植株在蛋白水平上有目的抗原的表达并且其表达含量有一定的增加。灌服阳性胡萝卜蛋白的小鼠IgG含量高于灌服阴性胡萝卜蛋白的小鼠,但低于灌服阳性细菌蛋白的小鼠。然而统计分析表明,阳性小鼠同阴性小鼠体内的IgG含量差异不显著。转基因胡萝卜口服疫苗的发展还有很多困难,需进一步深入研究。
- 刘满杏李霞刘荣堂杨慧赵丽李鹏
- 关键词：转基因胡萝卜口服疫苗
- 分泌抗重金属铜抗体的杂交瘤细胞克隆方法的建立
- 2011年
- 为了建立有效地克隆分泌抗铜抗体杂交瘤细胞的方法,试验用不同浓度的甲基纤维素半固体培养基法培养杂交瘤细胞。结果表明:培养杂交瘤细胞的甲基纤维素最佳浓度为1.6%;获得多株阳性细胞,其中阳性细胞株3B1-C5的染色体数在100个以上,腹水抗体效价达到1∶102 400,其分泌的抗体属IgM亚类,轻链为Kappa型;经间接ELISA方法检测,连续培养单细胞系93 d,3B1-C5细胞株能较稳定分泌抗体。说明含1.6%甲基纤维素的半固体培养法适合克隆分泌抗铜抗体的杂交瘤细胞。
- 赵丽王凤龙杨慧李鹏刘满杏李霞
- 关键词：铜杂交瘤细胞甲基纤维素克隆抗体
- 抗重金属汞离子抗体的制备及鉴定被引量：9
- 2010年
- 汞、镉、铅等重金属引起的环境污染已在世界范围内造成危害。快速、廉价地监测生境中重金属是减小其对人类及动物危害的先决条件。传统检测方法无法满足高通量的现场检测,建立更快速、更经济的免疫分析法检测汞离子是生产及经济发展的需要。本研究中,报道了汞特异性单克隆抗体的制备与筛选方法和结果。因Hg2+太小以至于不能引起免疫反应,所以用螯合剂(二乙烯三胺五乙酸,DTPA)将金属离子与载体蛋白(匙孔血蓝蛋白,KLH)连接起来。成功合成、鉴定汞复合物抗原后,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合获得了稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。用极限稀释法亚克隆,通过ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗汞离子抗体的细胞株(H2H5,H1H8)。小鼠腹腔注射1×107H2H5、H1H8细胞株制备腹水,腹水抗体效价都在1∶51200以上。经鉴定两株杂交瘤均为IgG1亚类,轻链为kappa型且分泌抗体稳定性较好。实验结果为汞离子残留免疫学检测方法的建立提供了技术基础,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义。
- 赵丽王凤龙杨慧李鹏刘满杏李霞
- 关键词：汞单克隆抗体酶联免疫吸附法
- 人源轮状病毒在胡萝卜中的表达
- 本实验利用胡萝卜作为生物反应器受体生产轮状病毒外壳蛋白VP6，VP7。通过PCR，RT-PCR，Western Blot，ELISA检测整合有轮状病毒外源基因的胡萝卜植株，即从基因水平到蛋白水平逐步检测，并将蛋白水平上表...
- 刘满杏
- 关键词：生物工程转基因植株轮状病毒基因表达
