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泥鳅杂交三倍体和二倍体胚胎发育的比较研究被引量：3: 2014年; 对杂交三倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus(2n♀×4n♂,DT)和二倍体泥鳅(2n♀×2n♂,DD)的胚胎发育进行观察,详细记录了其胚胎发育的形态特征和发育特点。结果表明:DT受精卵在水温(25±1)℃的条件下,整个胚胎发育过程约需36 h 19 min;对照组DD受精卵在水温(25±1)℃的条件下,整个胚胎发育过程约需35 h 57 min;DT(DD)的胚胎发育包括卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期和孵化出膜期6个时期,DT(DD)受精卵约40 min(40 min)后进入卵裂期,3 h 45 min(3 h 40min)后进入囊胚期,6 h 30 min(6 h 24 min)后进入原肠期,9 h 32 min(9 h 20 min)后进入神经胚期,15 h 45 min(15 h 30 min)后进入器官形成期,36 h 19 min(35 h 57 min)后出膜。研究表明,DT的胚胎发育时序及形态特征与DD基本相似,说明DT具有正常的胚胎发育过程,本研究可为杂交三倍体泥鳅苗种培育提供生物学依据。; 高养春李雅娟姜志强李霞王伟刘博王玉生庞义猛; 关键词：泥鳅二倍体胚胎发育

不同倍性泥鳅鳍细胞培养及染色体标本制备方法的研究: 本研究以天然二倍体、杂交三倍体(4n♀×2n♂)以及天然四倍体泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus)的鳍组织为材料,对短期培养的消毒方法、秋水仙素的浓度和处理时间以及低渗处理时间等细胞培养技术及染色体...; 刘博李雅娟李霞隋燚高养春王玉生马辰; 关键词：泥鳅二倍体细胞培养染色体; 文献传递

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不同倍性泥鳅鳍细胞系的建立及生物学特性分析被引量：8: 2014年; 采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养,采用胰蛋白酶消化法传代,目前二倍体、三倍体和四倍体细胞已经分别传至59代、68代和68代。三种细胞均为成纤维细胞样细胞。鳍组织无菌处理方法是:先用质量浓度为10%的碘伏浸泡15min;后用青霉素和链霉素的混合液(500 IU/mL青霉素,500μg/mL链霉素)浸泡30min;原代培养和早期传代培养所用的培养基为DMEM/F12,添加体积分数为20%的胎牛血清、10 ng/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 ng/mLI型胰岛素样生长因子(IGF-I)以及10μg/mL硫酸软骨素。30代以后所用培养基为20%FBS-DMEM/F12。细胞培养在25℃、5%CO2培养箱中。在此条件下,二倍体、三倍体和四倍体的倍增时间分别为48.43h、36.01h和41.45h;二倍体、三倍体和四倍体的特征染色体数目分别为50条、75条和100条;测定的二倍体、三倍体和四倍体细胞及核的体积比分别为1︰1.37︰2.37和1︰1.53︰1.97;细胞经液氮冷冻保存60d后,解冻复苏后测定存活率分别为(80.88±1.38)%、(84.48±1.13)%、(81.57±1.28)%。不同倍性的泥鳅细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,为揭示多倍体鱼类生长、遗传等机制打下基础。; 李霞马辰秦艳杰李雅娟吴迪白丽雯刘博; 关键词：泥鳅细胞系多倍体生物学特性

冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体的研究: 为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制,以大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)为研究对象,无须卵子失活,仅用冷休克诱导雄核发育单倍体,并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察...; 王玉生李雅娟于长宁姜志强李霞王伟刘博高养春李佳奇; 关键词：大鳞副泥鳅雄核发育单倍体; 文献传递

冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体被引量：7: 2014年; 为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制，以大鳞副泥鳅为研究对象，无须卵子失活，仅用冷休克诱导雄核发育单倍体，并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察等进行了系统分析。早期胚胎发育结果显示，0℃与3℃处理组的孵化率分别为0．83％和57．42％，二者之间孵化率差异显著（P〈0．05），0℃和3℃处理组均表现出单倍体综合征。染色体倍性鉴定结果显示，0℃处理组染色体分布为18～27，单倍体率为81．40％，3℃处理组染色体分布为20-30，单倍体率为68．97％。分裂胚细胞学观察结果显示，3℃处理组受精后60min，卵核和第二极体位于胚表面，有一同释放迹象。结果表明，对大鳞副泥鳅受精卵进行3℃冷休克处理60min，可以成功诱导雄核发育单倍体，研究推测冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育的细胞学机制是雌核和第二极体一同释放。; 王玉生李雅娟于长宁姜志强李霞王伟刘博高养春李佳奇; 关键词：大鳞副泥鳅雄核发育单倍体

不同倍性泥鳅杂交后代染色体数目组成的研究被引量：16: 2012年; 以泥鳅Misgurnus anguillicaudatus为研究对象,通过染色体计数法,对二倍体泥鳅与天然四倍体泥鳅正交(2n×4n)、反交(4n×2n)杂交后代的早期胚胎、6月龄及12月龄阶段的染色体数目进行了统计分析。结果表明:早期胚胎正、反杂交后代的染色体数目为67～81、67～82,在良好的中期分裂相(100、100个)中,染色体数目为75的整三倍体众数百分比最高(22%,20%),此外还有大量染色体数目<75的亚三倍体(37%,51%)和染色体数目>75的超三倍体(41%,29%);6月龄正、反杂交后代的染色体数目为68～79、66～80,在良好的中期分裂相(58、63个)中,整三倍体(3n=75)众数百分比最高(26%,41%),此外还有大量亚三倍体(34%,49%)和超三倍体(40%,10%);12月龄正、反杂交后代的染色体数目为68～82、69～83,在良好的中期分裂相(71、50个)中,三倍体(3n=75)众数百分比最高(28%,54%),此外还有大量亚三倍体(48%,20%)和超三倍体(24%,26%)。研究表明,二倍体泥鳅与天然四倍体泥鳅正、反杂交后代均出现大量能存活的非整三倍体个体,并随养殖时间的延长,非整三倍体率呈下降趋势。; 李雅娟钱聪印杰高敏高养春刘博王玉生; 关键词：泥鳅染色体数目

杂交三倍体泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)染色体CMA_3/DA/DAPI及FISH分析: 为阐明杂交三倍体泥鳅染色体的核仁组织区(NORs)数目,本研究对二倍体泥鳅与自然四倍体泥鳅正、反交(正交2n×4n,反交4n×2n)获得的杂交三倍体后代的早期胚胎染色体进行CMA3/DA/DAPI及FISH等系列研究。结...; 高养春刘博王玉生隋燚李佳奇徐雯李雅娟; 文献传递

天然二倍体和四倍体泥鳅鳍细胞系染色体组构成研究被引量：3: 2015年; 对传代20次的天然二倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞系进行染色体标本制备,并对其染色体核型、Ag-NORs及CMA3/DA/DAPI三重荧光染色等进行研究。结果显示,1二倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为2n=50,核型公式为:2n=10m+4sm+36t,NF=64;四倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为4n=100,核型公式为:4n=20m+8sm+72t,NF=128。2天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有2个Ag-NORs,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有4个Ag-NORs,均位于第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。3天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为2个,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为4个;均位于核仁组织区,即第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。结果表明,天然二倍体和四倍体泥鳅鳍培养细胞制备的染色体数目、核型和带型与体细胞一致。; 李雅娟隋燚赵睿李霞周贺刘博马海艳; 关键词：泥鳅二倍体四倍体细胞系染色体组 AG-NORS

不同倍性泥鳅鳍细胞培养及染色体标本制备方法的研究被引量：4: 2013年; 以天然二倍体、杂交三倍体(4n♀×2n♂)和天然四倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus的鳍组织为材料,对短期培养的消毒方法、秋水仙素的浓度(1.0、1.5、2.0μg/mL)与处理时间(2、3、4 h)和低渗处理时间(30、40、50 min)等细胞培养技术,及染色体标本制备方法进行了研究。结果表明:选择100 g/L的碘伏溶液杀菌效果良好,对于细胞生长影响较小,尤以处理15 min时的效果最明显,细胞迁出迅速;在终止培养前3 h加入秋水仙素至终浓度为1.5μg/mL,天然二倍体、杂交三倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞中期分裂相染色体众数最高,分别为93.33%、90.00%、70.00%;25℃下低渗处理40 min时,可以获得大量图像清晰、长度适中、分散良好、染色体数目完整的染色体中期分裂相。本研究中初步建立了以鳍组织培养法作为材料来源快速制备不同倍性泥鳅染色体标本的方法。; 刘博李雅娟李霞隋燚高养春王玉生马辰; 关键词：泥鳅二倍体染色体

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