信丰学
- 作品数:2 被引量:4H指数:2
- 供职机构:江西农业大学理学院更多>>
- 发文基金:江西省自然科学基金国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 粟酒裂殖酵母N-糖酰胺酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析被引量:2
- 2008年
- 根据GenBank中公布的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)N-糖酰胺酶(Pnglp)cDNA序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR技术从粟酒裂殖酵母中克隆出糖酰胺酶cDNA。将得到的基因克隆到表达载体pET-15b中。重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导表达和纯化提取后,进行酶活测定。实验结果表明,该酶的分子量约为39 kD,纯化后的重组N-糖酰胺酶可以对变性处理的糖蛋白进行糖链的切除,且这种作用需要还原剂DTT的辅助作用;N-糖酰胺酶只对错误折叠的糖蛋白有作用,对天然的糖蛋白没有作用。等量粟酒裂殖酵母Png1p在不同温度、pH、DTT浓度和底物变性温度下对等量核糖核酸酶B(RNase B)的脱糖基化检测发现,重组酶的最适反应温度30℃,最适反应pH为7.0,需要的最适DTT浓度为10 mmol/L,底物在100℃处理10 min时酶的脱糖基化率最高。
- 信丰学王鹏钟盛华祁庆生
- 关键词:RIBONUCLEASE酶活测定
- 麦金属硫蛋白基因对酵母FD236-6A的转化及其对砷离子抗性的影响被引量:2
- 2008年
- 金属硫蛋白(Metallothionein简称MT)可通过半胱氨酸残基的巯基与金属离子结合形成无毒或低毒的络合物,从而消除重金属的毒害作用。为研究绊根草二型金属硫蛋白CdMTII络合AsO33-的能力强弱及其具有的特性,把目的基因转化到模式生物酵母中,通过酵母转化体表现的抵抗重金属的能力来检测目的基因的功能强弱,为该基因转化到植物体中培育可用于植物修复的工程植物品种以及在医学等其它领域的应用奠定基础。
- 信丰学钟盛华
- 关键词:砷离子