何晶
- 作品数：8 被引量：49H指数：3
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- 小鼠毛乳头细胞体外分离培养方法的优化和评价
- 2023年
- 目的 :探索小鼠毛乳头细胞(DPCs)体外分离培养的改良新方法。方法 :选用雌性C57BL/6小鼠,以精细显微解剖获取毛乳头部位,联合胶原酶消化,并添加10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以优化培养体系,建立体外分离培养小鼠DPCs的改良新方法;以光镜下观察、细胞计数、碱性磷酸酶(ALP)特异性染色及荧光定量PCR鉴定DPCs的ALP mRNA表达水平,与传统方法比较进行相关评价。结果 :与传统方法比较,改良方法的毛乳头基本全部贴壁,细胞可更快迁出及生长融合,所获得的细胞数量是传统方法的5.85倍;经传代后传统方法的低代次DPCs有聚集性生长现象,随代次增加,细胞形态逐渐变大衰老,增殖明显迟缓,聚集性生长愈发不明显,至第5代聚集性现象消失。而改良方法的DPCs经传代后,第1、2和5代形态仍呈长梭形及多角形的特点,至第5代仍保有聚集性生长的特点;且具有更强的ALP活性,尤其是高代次(第5代)细胞更为明显,而传统方法的高代次细胞则几乎无ALP活性;改良方法的ALP mRNA表达水平与传统方法相比也明显上调,尤其是第5代细胞更加明显。结论 :改良方法可获取更多数量、并具有较好功能的小鼠DPCs,为开展毛囊相关研究提供可靠的细胞来源。
- 林享玉祝佳铭朱亮王哲宁何晶
- 关键词：毛乳头细胞显微解剖碱性成纤维细胞生长因子细胞培养小鼠
- 雪旺氏细胞体外培养不同方法的比较被引量：12
- 2006年
- 何晶李锋丁文龙
- 关键词：周围神经功能分离培养方法雪旺氏细胞损伤后修复SCS神经受损
- 体外培养雪旺氏细胞纯化方法的探讨被引量：12
- 2006年
- 本文比较了雪旺氏细胞体外培养的主要纯化方法,单纯酶消化法、阿糖胞苷抑制法、差速贴壁分离法、低浓度酶传代法、综合纯化法,以寻找有效的纯化方法。结果显示,综合纯化法获得的SCs纯度最高。
- 李锋何晶丁文龙
- 关键词：雪旺氏细胞体外培养纯化方法
- 脂肪干细胞在皮肤损伤再生及组织工程中的应用及进展被引量：3
- 2021年
- 皮肤损伤尤其是大面积皮肤缺损,是临床难以解决的问题。组织工程化皮肤构建则是有效途径之一。而脂肪干细胞(ASCs)作为成体间充质干细胞之一,因获得量大、供区损伤小及免疫原性低等独特优势,被认为在皮肤再生及组织工程中具有重要的应用潜力。现主要从ASCs在皮肤损伤再生及组织工程中的应用及其相关进展等方面进行论述。
- 朱亮林享玉何晶
- 关键词：脂肪干细胞皮肤再生
- 人参环氧炔醇对体外培养施万细胞表达神经营养因子的影响及可能机制的研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究人参环氧炔醇（PND）对体外培养施万细胞（SCs）神经营养因子（NTFs）表达的影响;并探讨其机制。方法用含有不同浓度的PND培养液分别处理SCs,以免疫组织化学法检测PND对SCs NTFs表达的影响;放射免疫方法测定SCs内环磷酸腺苷（cAMP）水平的变化,并进行图像处理及统计学分析。结果PND分别在2.5-20.0μmol/L及5.0--20.0μmol/L剂量范围内可分别促进体外培养SCs NGF及大脑衍生神经营养因子（BDNF）的表达（P〈0.05）,在10μmol/L剂量对两者促进作用均最明显（P〈0.01）;在2.5--20.0μmol/L剂量范围内PND可提高体外培养SCs胞内cAMP含量（P〈0.05）,而在10μmol/L剂量作用最显著（P〈0.01）。结论PND能明显促进体外培养SCs NGF、BDNF的表达和分泌;PND可提高SCs的胞内cAMP水平,并与PND促进体外培养SCs NGF、BDNF表达之间存在相关性,提示其可能是PND提高体外培养SCs NGF、BDNF表达的调控机制及信号传导通路。
- 何晶丁文龙李锋王文进朱浩
- 关键词：施万细胞神经营养因子环磷酸腺苷免疫组织化学放射免疫
- 人参皂苷Rb1和Rg1对海马神经元的影响被引量：19
- 2011年
- 目的探讨人参皂苷(ginsenoside)Rb1和Rg1(GRb1,GRg1)对海马神经元突起生长及神经保护作用及其机制。方法培养SD新生大鼠海马神经元,分为:正常组、Rb1组、Rg1组、Rb1+API-2(Akt抑制剂)、Rg1+API-2、Rb1+PD98059(MEK抑制剂)和Rg1+PD98059组,培养1 d,用免疫染色观察神经突起的生长。加入Aβ25-35制备海马神经元损伤模型,分为正常组、损伤组(Aβ3组)、Rb1组、Rg1组、Rb1+API-2、Rg1+API-2、Rb1+PD98059和Rg1+PD98059,培养48 h,用Hoechst33258染色观察活细胞与凋亡细胞。用Elisa观察培养上清液里神经营养因子的浓度(nerve growth factor,NGF;brain-derived neurotrophic factor,BDNF;neurotrophin-3,NT-3)。结果 Rb1和Rg1组神经突起生长高于对照组(P<0.05);API-2和PD98059显著抑制了Rb1和Rg1诱导的神经突起生长(P<0.01),API-2的抑制效果强于PD98059;Rg1+API-2组BDNF高于对照组和Rg1组(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05);Rg1组NT-3的浓度高于对照组(P<0.05);Rb1+PD98059组的NGF高于Rb1组。Rb1和Rg1组海马神经元的凋亡率显著低于损伤组(P<0.01);PD98059和API-2阻断了Rb1和Rg1对神经元的保护作用(P<0.01);神经营养因子水平各组间差异无统计学意义。结论 Rb1和Rg1促进海马神经元突起生长及抵抗Aβ25-35损伤,促进神经元的存活。其机制与Akt和ERK1/2的信号通路激活有关,与增加神经营养因子的分泌无关。
- 刘娟裘莹何晶文蕾管晓菲袁琼兰
- 关键词：海马神经元神经突起PD98059
- 人参环氧炔醇对雪旺细胞神经保护作用的影响及机制
- 2012年
- 目的：研究人参环氧炔醇（PND）对体外培养雪旺细胞（SCs）保护过氧化氢（Hz02）损伤的大鼠皮层神经元的作用并探讨其作用机制。方法：在培养1周的小鼠皮层神经元培养基中加入H202，建立神经元氧化损伤模型，与以PND（10／μmol／L）预处理体外培养SCs共培养，用CCK-8法检测细胞活力，ELISA检测突触素（synaptophysin，SYN）水平，共聚焦显微镜观察突触及细胞骨架；实时荧光定量-PCR、RT-PCR检测神经元凋亡相关基因bcl-2、bax的表达，进行图像处理及统计分析。结果：与正常组相比，H2O2组细胞存活率降低。与Hzoz组相比，PND（10μmol／L）组、SCs组及PND（10μmol／L）预处理SCs组细胞存活率升高，并且bcl-2mRNA表达上调、baxmRNA表达下调，各指标差异均有统计学意义，而以PND（10μmol／L）预处理SCs组作用最显著。结论：PND可促进SCs对H。02所致皮层神经元损伤的保护作用，其机制可能与PND预处理的SCs调节皮层神经元的细胞凋亡相关蛋白表达从而抑制凋亡有关。
- 何晶王凯袁琼兰黄良
- 关键词：雪旺细胞神经保护作用皮层神经元过氧化氢
- Klingler技术在中枢神经解剖实验教学中的应用被引量：3
- 2019年
- 众所周知,中枢神经解剖学是解剖学中的难点和重点,特别是脑,内容繁杂而抽象,重要的解剖结构多,联系复杂,概念抽象,理论逻辑性强,理解和记忆困难,很多学生对这一章节有恐惧心理,被学生们戏称为“神学”。如何帮助学生理解大脑的各个结构的空间位置,提高学生学习中枢神经系统的积极性,是值得研究的医学教学改革的重要课题[1]。Klingler纤维解剖技术[2-3]是利用脑组织冰冻过程中水分子结晶破坏了含水量较高的灰质、神经胶质等结构,而对含脂量高含水量低的白质破坏较少,冰冻溶化后易于将灰质从白质上剥离下来。
- 黄良何晶徐丹令张军芳袁琼兰
- 关键词：中枢神经系统神经胶质高含水量医学教学改革恐惧心理
