任宏伟
- 作品数：48 被引量：243H指数：8
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>
- 人细胞核dUTPase的克隆表达及其酶学活性被引量：5
- 2003年
- 以阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)患者脑cDNA文库质粒为模板 ,用PCR方法扩增得到人细胞核dUTP焦磷酸酶 (dUTPase)的cDNA ,将其克隆到谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合表达载体pGEX 4T 1中 ,并在大肠杆菌BL2 1中获得高效表达 .表达的融合蛋白GST dUTPase经过谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,凝血酶酶切和SephacrylS 10 0纯化 ,得到高纯度dUTPase蛋白 .通过SDS PAGE ,氨基酸组成分析 ,N端氨基酸序列测定以及HPLC测Mr 结果与期望值一致 .通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸 (PPi)来测定表达产物dUTPase蛋白及GST dUTPase融合蛋白的酶活性 ,发现两蛋白都具有正常的酶水解dUTP活性 ,但融合蛋白的活性比dUTPase蛋白低 7～ 8倍 .同时研究了Mg2
- 陈巧林任宏伟康巧华王宗元茹炳根
- 关键词：DUTPASE克隆酶学活性
- 牦牛MT-Ⅰ/-Ⅱ cDNA分子克隆及其蛋白质结构分析被引量：6
- 2005年
- 利用基因特异引物YMTSP1和YMTSP2,通过RT-PCR从牦牛肝脏组织RNA中克隆出了牦牛 MT-Ⅰ(Genbank Accession No:AY513744)和MT-Ⅱ(Genbank Accession No:AY513745)基因编码区全 长。将牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ cDNA序列在CBI上进行同源性搜索发现,牦牛MT-Ⅰ/-Ⅱ编码区序列在 不同哺乳动物中相当保守。牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ编码的MT-Ⅰ和MT-Ⅱ蛋白分别由61个氨基酸组 成,其具有保守的短肽结构如:C-X-C,C-C-X-C-C,C-X-X-C等,其决定MT蛋白分子的整个三维结 构,在分子进化上十分保守。同时对牦牛MT的疏水性和跨膜区分析表明,牦牛MT蛋白可能不 存在跨膜区,也不存在信号肽,是1种非分泌蛋白。并通过同源比较模建,预测和构建了牦牛 MT-Ⅰ和MT-Ⅱ蛋白的分子空间结构,表明牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ由α-和β-两个结构域组成,在α-结构 域含有5个Cys短肽结构,β-结构域有4个Cys短肽结构,且2个结构域由保守的三肽序列KKS 相连。
- 马彬云任宏伟吴建平徐明旭张利平向云贺鹏飞蔡欣
- 关键词：蛋白质结构分析牦牛CDNA序列基因编码区CYSMT
- 金属硫蛋白对大鼠重复高G应激后心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨金属硫蛋白(MT)对+Gz暴露后心肌细胞凋亡及其Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法将16只Wistar雄性大鼠随机分为+Gz组和+Gz+MT组,每组各8只,两组均经受6次峰值为+10 Gz的G暴露,每次30 s,间隔1 min。+Gz+MT组大鼠在+Gz暴露前72 h和48 h腹腔注射21%乳酸锌0.3μmol/kg以诱导体内MT合成;+Gz组鼠给予等量生理盐水。应用极谱法测定心肌MT含量,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸末端标记法观察两组心肌细胞凋亡,应用免疫组织化学法观察Bcl-2和Bax蛋白的表达,并结合彩色病理图像分析系统进行Bcl-2和Bax蛋白的表达分析。结果与+Gz组比较,+Gz+MT组心肌MT含量明显增高(P<0.05),心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05),Bcl-2表达明显增高(P<0.05)。结论MT可以通过影响心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达,减少高+Gz暴露后的心肌细胞凋亡。
- 师绿江尹昭云任宏伟杨毅陈勇胜宋蕾孙雪蕾张雁歌武留信
- 关键词：金属硫蛋白心肌脱噬作用BCL-2蛋白BAX蛋白
- 金属硫蛋白抗D-半乳糖拟衰老效应的研究
- 本实验采用小白鼠皮下注射D-半乳糖造成的亚急性衰老模型,观察皮下注射不同剂量MT对小鼠在T-型游泳迷宫作业能力及小鼠心、肝、脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)会计师和超氧化物歧化酶(Superoxi...
- 任宏伟李崎李文彬崔旭陈巧林茹炳根
- 关键词：金属硫蛋白D-半乳糖衰老丙二醛超氧化物歧化酶学习记忆能力
- 文献传递
- 一种抑制新生血管生成的融合多肽及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种抑制新生血管生成的融合多肽及其编码基因与应用，该融合多肽是靶向性抑制金属基质蛋白酶的活性十肽、恩度的前25肽和血管生长抑素的kringle 5结构域组成的三靶点多肽。细胞试验表明，该融合多肽可以有效的抑制...
- 顾军任宏伟王厚斌
- 酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用
- 2002年
- 金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体 ,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明 :MT 3与MT 3之间在酵母细胞内能发生相互作用 ,进一步用酵母双杂交实验还表明MT 3与MT 1间也存在弱相互作用。由此提示 ,在机体细胞中 ,MT 3可以以同源或异源二聚体的形式存在。
- 康巧华陈巧林刘峰任宏伟茹炳根
- 关键词：金属硫蛋白-3酵母双杂交系统相互作用神经生长抑制因子分子生物学方法
- 酶解淀粉样前体蛋白的β分泌酶研究进展被引量：3
- 2001年
- β淀粉样蛋白（β－Ａｍｙｌｏｉｄ，Ａβ）是阿尔茨海默症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）病人脑中老年斑（ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｇｕｅｓ， ＳＰ）的主要成分。 β分泌酶（β－ｓｅｃｒｅｔａｓｅ）是水解淀粉样前体蛋白（ａｍｙｌｏｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，ＡＰＰ）产生β淀粉样蛋白所必须的。多年来众多科学家一直在寻找β分泌酶。最近三个研究组通过不同的研究途径各自独立发现了具有β分泌酶活性的酶，该酶很可能就是寻觅已久的β分泌酶。β分泌酶的发现不仅为药物设计提供了依据，而且为β淀粉样蛋白的生物学研究提供了线索。
- 桑华春任宏伟王文清茹炳根
- 关键词：Β分泌酶Β淀粉样蛋白阿尔茨海默症老年性痴呆
- 金属硫蛋白抗自由基损伤研究被引量：23
- 1992年
- 采用电子自旋共振技术(ESR),以马来酰亚胺自旋标记完整血红细胞和细胞膜,监测氧自由基引起的ESR波谱的变化,研究了不同亚型、不同结合金属的兔肝金属硫蛋白(MT)清除·OH和其对辐射损伤的防护作用。首次观察到四种MT清除·OH及抗辐射的能力与其亚型和结合金属种类有以下顺序的关系:ZnMT_2>ZnMT_1>CdMT_2>CdMT_1。而且还观察到MT对自由基损伤具有修复作用,其作用的强弱和清除·OH的能力大小顺序一致。对实验结果的分子机制进行了某些探讨。
- 张保林王文清任宏伟卢景雰茹炳根
- 关键词：金属硫蛋白自由基损伤自旋标记
- G蛋白Rab3a cDNA的克隆与表达被引量：7
- 2002年
- 利用PCR法 ,从人胎盘总cDNA中扩增得到Rab3acDNA的全编码区 .序列分析表明 ,扩增得到的Rab3acDNA有 5个核苷酸发生了变异 ,但翻译的氨基酸与发表的完全一致 .将扩增得到的Rab3acDNA克隆于原核融合表达载体pGEX 4T 1中 ,在E .coliBL2 1中经IPTG诱导表达 .为了进一步鉴定表达产物 ,对纯化后的Rab3a蛋白进行了SDS PAGE、N端氨基酸测序、质谱分子量测定及氨基酸组成分析鉴定 .结果显示 ,表达蛋白的分子量约 2 5kD ,N端氨基酸序列为MASATDSR ,氨基酸组成分析表明 。
- 康巧华陈巧林季清洲任宏伟茹炳根
- 关键词：G蛋白RAB3A克隆
- 金属硫蛋白的聚合反应动力学被引量：2
- 1993年
- 金属硫蛋白(Metallothionein,简称MT)是一类低分子量(哺乳动物MT的分子量为6500)、富含半胱氨酸(一般占氨基酸残量的30％)且具有高度可诱导性的金属结合蛋白。关于其结构与功能的研究是当今化学、生物学和临床医学等领域的重要课题之一。但是,有关各种生物MTs水溶液的热力学稳定性的研究尚未见报道。本文通过对在pH 7.40、4℃下放置不同时间的家兔肝脏(Cd,zn)_7MT水溶液进行HPLC分离,首次观察到MT在水溶液中的缓慢聚合现象,得到聚合反应的表观二级反应速率常数,发现MT-2比MT-1更易聚合。
- 张保林任宏伟王文清
- 关键词：金属硫蛋白动力学
