付小莉
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国科学院昆明植物研究所更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 从植物共生菌宏基因组文库筛选新的生物催化酶基因被引量：1
- 2012年
- 【目的】通过建立宏基因组文库的高通量保存与基于探针洗脱的多次膜杂交筛选方法,从植物共生菌宏基因组文库筛选具有生物催化潜力的新酶基因。【方法】首先根据滴度将初始文库噬菌体包装颗粒感染到EPI300-T1R E.coli,过夜培养后对应保存于96孔板;提取粘粒进行文库的杂交筛选。【结果】描述的洗脱条件可完全去除尼龙膜上与靶DNA结合的探针,并且尼龙膜上的靶DNA至少可用于7次探针杂交,从而明显提高宏基因组文库的筛选效率。【结论】以Enoate reductase(ER)和短链脱氢酶(SDR)的同源基因片段为探针,运用该方法经两轮筛选获得候选单克隆并进行了部分粘粒的测序,发现了新的ER和SDR同源基因,并克隆到相应的全长基因序列用于后续的表达与酶化学研究。
- 付小莉王浩鑫陈倩倩赵沛基曾英
- 关键词：宏基因组生物催化剂REDUCTASE
- 毛萼香茶菜二萜合酶IeCPS的立体特异性研究
- 2015年
- 对映-贝壳杉烷型二萜是药用植物香茶菜抗菌抗肿瘤的核心组分,其生物合成的酶分子机制尚未完全明了。前期我们克隆并鉴定了毛萼香茶菜二萜合酶柯巴基焦磷酸合酶基因Ie CPS1和Ie CPS2。本文通过与拟南芥对映-贝壳杉烯二萜合酶At KS配对进行偶联反应,以及GC-MS鉴定酶联反应产物,证实毛萼香茶菜二萜合酶Ie CPS1和Ie CPS2的立体特异性为对映型(ent-CPS)。
- 杜刚龚海艳高娟付小莉卢山曾英
- 关键词：生物合成
- 从宏基因组文库挖掘碳-碳双键不对称还原酶
- ＜正＞碳-碳双键不对称还原酶能在其它可被还原的官能团（如羰基）存在的情况下,选择性还原碳-碳双键,生成多至两个手性中心;催化过程高效、安全、环保,可谓手性合成"绿色化"的理想催化剂。
- 付小莉赵沛基曾英
- 关键词：宏基因组
- 文献传递
- 宏基因组文库的保存和筛选方法
- 提供一种宏基因组文库的保存和筛选方法，一是快速有效地保存海量宏基因组克隆的方法，包括用小量的文库包装颗感染一定量的感受态细胞，等分成96份或96的整倍数，进行文库扩增培养与保存；二是通过对同一张膜上的文库DNA模板用不同...
- 曾英付小莉王浩鑫
- 文献传递
- 从宏基因组文库挖掘碳-碳双键不对称还原酶
- 付小莉赵沛基曾英
- 关键词：宏基因组
