于晓林
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 高三尖杉酯碱诱导的白血病耐药细胞基因表达谱的变化
- 2009年
- 目的探讨高三尖杉酯碱（HHT）诱导的人白血病细胞耐药相关分子。方法在前期建立的HHT诱导的人白血病多药耐药细胞株K562／HHT的基础上，采用基因芯片技术比较K562／HHT细胞、其亲本K562细胞以及用耐药逆转剂米非司酮（RU486）作用后的K562／HHT（K562／HHT／RU486）细胞三者基因表达谱的差异，选择在这三种细胞中呈动态变化的骨髓细胞X染色体上酪氨酸激酶（BMX）基因用RT—PCR和Westernblot法在转录和翻译水平进行验证，进而转染BMX基因到K562和K562／HHT细胞，观察BMX过表达时这两种细胞内柔红霉素（DNR）含量的变化，确定BMX是否在K562／HHT细胞耐药形成中发挥作用。结果耐药细胞K562／HHT与其亲本K562细胞相比，共有117个基因表达有显著差异，其中57个基因表达明显上调，60个基因表达明显下调，耐药细胞K562／HHT中多药耐药基因mdr-1表达明显上调；K562／HHT／RU486细胞与K562／HHT细胞相比，13个基因表达明显上调，37个基因表达明显下调。这些差异表达的基因涉及耐药、细胞信号传导、细胞分化、细胞增殖、转录调节以及离子转运等。基因NM-001721（BMX）、NM-031459（SESN2）、NM-033642（FGF13）和AL049309（SFRS12）在两组芯片中的表达均有显著差异。其中BMX基因在K562／HHT细胞中的表达与K562细胞相比，明显上调，在K562／HHT／RU486细胞则较K562／HHT细胞减低。进一步用RT—PCR和Westernblot法检测得到了相同的结果。RT—PCR和Westernblot证实BMX质粒转染的K562及K562／HHT细胞BMX表达均上调，流式细胞术检测到K562及K562／HHT细胞内DNR含量荧光强度分别为79．28±4．04和29．84±2．67，均较转染前荧光强度158．52±8．08和58．58±6．53显著减低。结论BMX在高三尖杉酯碱诱导的人白血病多药耐药细胞株K562／HHT耐药性产生中发挥作用。
- 于晓林刘永王涓冬孔德晓陈春燕
- 关键词：K562细胞多药高三尖杉酯碱基因BMX
- 高三尖杉酯碱联合IFNα-2b可促进白血病源性树突状细胞成熟被引量：4
- 2009年
- 目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)、干扰素α-2b(IFNα-2b)和两者联合(HHT+IFNα-2b)对白血病源性树突状细胞(DCs)的促成熟作用。方法:在白血病多药耐药细胞K562/A02中加入细胞因子rhGM-CSF和rhIL-4,7d后Wright-Gimsa染色观察细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞免疫表型的变化,同种混合淋巴细胞反应、CTL杀伤效应、细胞因子IL-12的分泌来评价此白血病源性DC的成熟程度,然后在上述白血病源性DC中分别加入HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b,3d后以上述同样方法检测它们对此白血病源性DC的促成熟作用。结果:K562/A02细胞在rhGM-CSF和rhIL-4作用7d后,CD83、HLA-DR和CD86分子的表达分别为(65.50±8.40)%、(32.00±4.32)%和(18.65±3.20)%,经HHT作用后这3种分子的表达升高到(85.36±8.42)%、(39.58±7.68)%和(35.53±4.35)%;经IFNα-2b作用后升高到(87.15±7.59)%、(40.53±6.30)%和(38.45±6.42)%;经HHT+IFNα-2b联合作用后升高到(94.38±6.59)%、(52.75±8.51)%和(42.98±9.87)%,与作用前相比差异均显著。经HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b作用后具有典型DC形态的细胞增多。经HHT和IFNα-2b作用的DC均可刺激T细胞产生较强的增殖效应,诱导产生的CTL对靶细胞K562/A02的杀伤率明显增强且当效靶比为20:1时杀伤效率最强,IL-12分泌明显增高。结论:HHT和IFNα-2b对白血病源性DC有促成熟作用,且两者联用时作用最强。
- 孔德晓陈春燕王涓冬于晓林
- 关键词：高三尖杉酯碱干扰素Α-2BK562/A02细胞
