黄敏
- 作品数：18 被引量：51H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血液病房分离280株病原菌及其耐药性分析被引量：13
- 2006年
- 目的通过对我院2000年1月—2004年6月血液病房分离的所有致病菌的分析,了解血液内科住院患者常见感染部位及病原菌分布特点和细菌耐药现状,指导临床诊断及经验性用药。方法药物敏感性试验采用Kirby-Bauer法,根据NCCLS标准判断细菌耐药性,用WHONET-4软件分析结果。结果共收集致病菌280株,其中革兰阳性球菌129株(46.1%),革兰阴性杆菌149株(53.2%),革兰阳性杆菌2株(0.7%)。主要标本来源为血液,占41.1%(115/280);其次为痰,占28.6%(80/280)。前5位细菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和金葡菌。17.6%(3/17)的金葡菌和69.9%(51/73)的凝固酶阴性葡萄球菌耐苯唑西林,未发现万古霉素耐药菌株。产ESBLs的克雷伯菌属及大肠埃希菌阳性率分别为35%(7/20)和40.5%(17/42)。革兰阴性杆菌对亚胺培南(91.1%)、阿米卡星(89%)、头胞吡肟(84.1%)和头孢哌酮-舒巴坦(81.1%)最敏感。革兰阳性球菌对万古霉素(100%)、替考拉宁(95.6%)最敏感。结论血液病患者最易发生血源性感染,且以条件致病菌为主。对疑似合并感染的患者应及时留取标本进行微生物鉴定并依据药敏试验调整用药,以便有效的控制感染和防止耐药性的产生。
- 黄敏孙自镛朱旭慧张义成刘文励周剑峰
- 关键词：血液病病原菌耐药性
- 人类Gfi1基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2011年
- 目的建立测定人类Gfi1mRNA表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为进一步研究新基因的功能奠定基础。方法以Gfi1基因为靶基因设计引物。构建携带Gfi1cDNA的质粒plox-Gfi1,经过纯化,质粒浓度测定,拷贝数的计算及10倍的梯度稀释制备标准品。应用ABI stepone PCR仪对Gfi1mRNA进行实时荧光定量PCR检测,建立标准曲线和熔解曲线。结果建立了Gfi1mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,本法线性范围为6.36×102～6.36×108copies/μl,线性相关系数γ2为0.996,熔解曲线为单峰,Tm值为(89.98±0.22)℃,标准品的循环阈值批内变异系数和批间变异系数分别为1.35%～3.61%和1.49%～3.42%。结论本研究建立的Gfi1mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性及稳定性好,可用于Gfi1基因的定量检测。
- 黄敏欧东梅徐金环张晓梅张义成
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
- 阿霉素对K562细胞Gfi-1表达的影响及其与相关凋亡基因关系的研究被引量：6
- 2007年
- 本研究探讨阿霉素体外作用于K562细胞的细胞效应及癌基因Gfi-1和相关凋亡基因表达变化的机制。用不同浓度的阿霉素作用于K562细胞24小时,然后应用DNA电泳和流式细胞术检测K562细胞凋亡;用RT-PCR、流式细胞术检测Gfi-1、Bcl-2、bax基因和蛋白表达的变化。结果表明:当阿霉素浓度在0、0.5、2.0mg/L作用K562细胞24小时,细胞凋亡增加,可见典型的DNA断裂电泳条带;同时,当ADM浓度自0.5增为2.0mg/L时,Gfi-1表达减少,bax表达增加;Bcl-2表达在ADM0.5-2.0mg/L之间变化不明显,mRNA及蛋白水平均无统计学差异;当阿霉素浓度大于2.0mg/L时,细胞凋亡率并不增加,而是下降,且出现细胞坏死。结论:一定浓度阿霉素能诱导K562细胞凋亡,细胞凋亡率表达的变化与阿霉素浓度呈一定的量效依赖关系,阿霉素诱导K562细胞凋亡可能与抑制Gfi-1基因的表达和激活bax基因的表达有一定的关系。
- 常伟孙汉英黄敏周剑锋张义成
- 关键词：阿霉素K562细胞细胞凋亡BCL-2BAX
- 氧化低密度脂蛋白抗体危险性的临床评估被引量：1
- 2009年
- 黄敏周洪莲姚汉华庄世虹聂斌
- 关键词：老年动脉粥样硬化氧化低密度脂蛋白抗体
- 应用量子点荧光探针检测Gfi1蛋白在结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的探讨应用量子点(QDs)荧光探针检测结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)中独立生长因子(Gfi1)蛋白的表达及其与临床预后的关系。方法收集67例确诊为ENKTCL患者的临床病理资料,并进行随访。Gfi1蛋白的表达分别用QDs荧光探针法及免疫组化法检测,并比较2种方法检测的阳性率。应用Kaplan-Meier法及log-rank检验对生存资料进行分析,并比较Gfi1蛋白阳性表达组与阴性表达组的5年总生存率。结果 QDs荧光探针法及免疫组化法检测Gfi1蛋白在ENKTCL中阳性表达率分别为85.07%、73.13%,2者相比差异有统计学意义(P<0.05);2种方法Gfi1蛋白定位相同(细胞核),但荧光探针法的荧光强度较大,亮度较高。Gfi1阳性表达组与阴性表达组的5年总生存率分别为12.90%、54.70%,Gfi1阳性表达组的预后差于Gfi1阴性表达组(P<0.05)。Gfi1蛋白表达是影响生存期的独立预后因素。结论 QDs荧光探针法较免疫组化法能有效识别ENKTCL瘤组织中的Gfi1蛋白,Gfi1蛋白在ENKTCL瘤组织中的表达与ENKTCL的预后有关,Gfi1可作为判断ENKTCL预后的重要指标。
- 张晓梅朱贤敏徐金环王佳琪黄敏张义成
- 关键词：结外NK/T细胞淋巴瘤预后
- 组织蛋白酶B在人腹主动脉瘤中的表达及其意义被引量：2
- 2007年
- 目的:研究组织蛋白酶B在人腹主动脉瘤(AAA)中的表达情况,以探讨其在AAA发生发展中的作用。方法:对17例AAA患者(AAA组)和6例正常腹主动脉尸体供肾者(正常腹主动脉组)的腹主动血管标本行苏木精-伊红染色、Van Gieson法染色和免疫组化技术染色,研究组织蛋白酶B对血管中膜的改变情况。结果:与正常主动脉组相比,在Van Gieson法染色中可见AAA组胶原含量有不同程度的增加。α-平滑肌肌动蛋白在AAA组和正常主动脉组中表达的平均吸收度分别是0.2634±0.0530和0.3335±0.0549,其表达水平明显降低(P<0.01)。组织蛋白酶B的平均吸收度2组分别为0.3465±0.0479和0.1306±0.0579(P<0.01)。结论:AAA患者血管平滑肌细胞表达的组织蛋白酶B水平增加,参与了血管壁的破坏和重建过程。
- 庄世虹周洪莲刘聪黄敏
- 关键词：腹主动脉瘤组织蛋白酶B血管平滑肌细胞
- 人Gfi1基因克隆及重组Gfi1慢病毒表达载体的构建被引量：2
- 2009年
- 目的克隆人Gfi1基因的全长cDNA,构建用于真核细胞表达的含有Gfi1基因ORF区的重组慢病毒表达载体pLOX-Gfi1,为研究Gfi1基因的功能打下基础。方法应用RT-PCR从人K562细胞系中扩增出Gfi1 cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态菌DH5α,通过蓝白筛选酶切鉴定出阳性菌落,质粒提取,BamHⅠ限制性内切酶酶切获得目的基因,插入慢病毒载体pLOX中并转化感受态细菌DH5α。质粒提取后进行酶切及PCR鉴定,对阳性克隆进行DNA序列分析。结果RT-PCR扩增获得含有约1.2 kb的DNA片段,酶切及PCR鉴定证实pLOX-Gfi1含有大小正确的正向Gfi1 cDNA,DNA序列分析的结果与发表于GenBank上的序列(NM005263)完全一致。结论成功克隆人Gfi1基因并构建用于真核细胞表达的重组慢病毒载体pLOX-Gfi1。
- 黄敏欧东梅赵霞徐金环张晓梅周剑峰张义成
- 关键词：克隆慢病毒载体
- 独立生长因子Gfi1在外周T细胞淋巴瘤的表达及其与预后的关系
- 2011年
- 目的探讨外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)患者骨髓中独立生长因子(growth factorindependence 1,Gfi1)的表达及其与临床预后的关系。方法选择确诊的63例PTCL患者为研究对象,其中外周T细胞淋巴瘤-非特异型(peripheral T-cell lymphoma,not otherwise specified,PTCL-NOS)29例,血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤5例,肠病型T细胞淋巴瘤8例,鼻NK/T细胞肿瘤17例,肝T细胞淋巴瘤4例。对照组是10例反应性增生性淋巴结炎(reactive hyperplastic lymphadenitis,RHL)。应用RT-PCR法扩增Gfi1引物,并进行琼脂糖凝胶电泳;应用组织形态学观察及免疫组织化学法(SP法)检测PTCL的淋巴瘤组织和作为对照组的RHL患者淋巴组织中Gfi1的表达情况。采用Kaplan-Meier方法对生存资料进行分析,用log-rank方法进行检验。结果 RT-PCR结果显示,PTCL患者的淋巴瘤组织中Gfi1表达呈阳性,RHL患者的淋巴组织中Gfi1表达为阴性。63例PTCL患者中只有42例保存有石蜡块标本,31例检出Gfi1蛋白阳性表达(73.81%,31/42),而Gfi1在对照组RHL中表达均为阴性。生存分析显示Gfi1是与患者生存期及预后相关的因素,其阳性表达组的预后明显差于阴性表达组(P<0.05)。结论 Gfi1是判断PTCL预后有价值的分子生物学指标。
- 张晓梅徐金环朱贤敏黄敏王佳琪张义成
- 关键词：外周T细胞淋巴瘤预后
- α-SMA、CD68在人胸主动脉瘤和腹主动脉瘤中表达的比较被引量：1
- 2008年
- 目的通过对胸主动脉瘤(TAA)、腹主动脉瘤(AAA)和正常主动脉的研究,探讨TAA和AAA的病理学特点。方法收集AAA标本17例、TAA标本11例和正常主动脉标本6例,进行α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CD68免疫组化技术染色,研究血管壁改变情况。结果TAA和AAA在病变类型、血管平滑肌细胞(VSMC)和巨噬细胞的分布方面基本相同,TAA和AAA病变处巨噬细胞增多,VSMC数量减少。但是与TAA相比,AAA常合并有AS病变和更多的巨噬细胞浸润。结论TAA和AAA病理特点大体相同,但在某些量化指标上存在差异。
- 庄世虹周洪莲黄敏刘聪
- 关键词：胸主动脉瘤腹主动脉瘤动脉粥样硬化
- 低氧模拟剂氯化钴对人单核细胞白血病细胞株SHI-1化疗敏感性的影响
- 2010年
- 【目的】研究氯化钴（CobaltChloride，CoCl2）模拟的化学性低氧是否能增强人单核细胞白血病细胞株SHI—l细胞对依托泊苷（VP-16）的敏感性，并探讨及其分子机制。【方法】在培养基中加入低氧模拟剂CoCl2（终浓度为100umol／L）模拟化学性低氧环境（低氧组），并用正常培养基作对照（对照组）。分别在对照组和低氧组中加入不同浓度的VFL16（0．5，1．0，2．0μg／mL），即VP16组和低氧＋VP-16组。检测各组的细胞的增殖抑制率（四甲基偶氮唑盐法），细胞凋亡率（流式细胞术），FAK、AKT、ERK、HIF-1α、Bcl-2及Pax基因mRNA表达（实时定量PCR方法）。【结果】①低氧组SHF-1细胞增殖受到抑制，并随作用时间延长而逐渐增强。②低氧模拟剂CoCl2也可在一定程度上诱导SHI-1细胞凋亡，并对VP-16诱导的SHI-1细胞凋亡有促进作用（P〈0．05）。③低氧模拟剂CoCl2可以增强FAK、AKT、ERK、HIF-1α、Bcb2及Pax基因mRNA表达（P〈0．05），且Bax／Bcl-2比值升高更为明显。CoCl2并不能使VP-16作用24h后SHF1细胞内FAK、AKT和Beg2基因mRNA表达发生明显变化，但可以使ERK、HIF-1α和PaxmRNA表达量增加（P〈0．05），且Pax／Bcl-2比值升高。【结论】CoCl2模拟化学性低氧对SHI-1细胞生物学活性有一定的抑制作用并能增强其对VP-16的化疗敏感性，其分子机制可能涉及ERK介导的信号通路对HIF_1a表达的调控作用，以及HIF-1α介导的信号传导通路对Pax和Bcl-2基因表达的不均衡调控。
- 李登举黄欣黄纯黄敏黄丽芳黄亮刘文励
- 关键词：白血病单核细胞
