黄丽华
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析被引量：1
- 2007年
- 目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmAb。以ELISA法测定mAb的Ig亚类。采用流式细胞术和Westernblot鉴定mAb的特异性和结合活性。以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数。结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAbB6E和2B6B,其Ig亚类均为IgG2a。mAb2B6E的亲和常数为1.81×10-7mol/L,与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性。结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫,再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb,为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径,也为日后改造抗DAFmAb进行靶向治疗研究打下了基础。
- 潘娜石琳黄丽华周立何大水张宇光
- 关键词：DAFDNA免疫单克隆抗体
- CD3/CD22双特异性单克隆抗体的研制
- 2001年
- 佘鸣沈德诚孙同哲李洪钊白金芬黄丽华陈晓钎周立山芝芳张金香郭桂庆廖晓龙
- 关键词：双特异性单克隆抗体双功能抗体
- 人CD271基因的克隆及原核表达
- 2008年
- 目的克隆人CD271基因,并在大肠杆菌中表达。方法采用RT-PCR技术从人REH细胞系中扩增CD271基因,将其克隆入pET22b表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pET22b/CD271经双酶切鉴定,可见1197bp的目的基因条带。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约75000处可见表达条带。IPTG浓度为0.5mmol/L时,目的蛋白表达量最高。纯化后蛋白纯度为82.5%。Western blot检测表明纯化后的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了人CD271基因,并在大肠杆菌中获得表达。
- 徐艳红石琳张涛冯春玲刘红芹屈浩黄丽华朱卫彬张宇光
- 关键词：克隆原核表达
- CD3/CD19双特异性单克隆抗体的制备、鉴定及其再导向的研究被引量：3
- 1998年
- 目的制备ＣＤ３／ＣＤ１９双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）并研究其生物学作用。方法采用杂交－杂交瘤技术制备ＢｓＡｂ，以双亚类ＥＬＩＳＡ和细胞结合试验确证ＢｓＡｂ的存在，再用５１Ｃｒ释放试验证实ＢｓＡｂ的再导向细胞毒效应。结果获得３株ＣＤ３／ＣＤ１９四源杂交瘤细胞，其中１株已成为稳定分泌ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ的四源杂交瘤细胞株。细胞毒试验表明ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ上清、ＣＤ３／ＣＤ１９纯化抗体以及ＣＤ３／ＣＤ１９化学交联ＢｓＡｂ都能增强ＣＤ３激活杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）对Ｎａｌｍ－６靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．０５～０．００１）。结论ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ具有显著的再导向激活Ｔ细胞杀伤特异肿瘤靶细胞的功能，提示该ＢｓＡｂ有临床应用的潜在价值。
- 陈晓钎沈德诚孙同哲白金芬黄丽华佘鸣山芝芳李洪钊张金香刘俊霞郭桂庆周立
- 关键词：双特异性单克隆抗体CD3CD19
- 抗CD34单克隆抗体HI273的制备和鉴定
- 2000年
- 佘鸣沈德诚廖晓龙黄丽华周立李洪钊张金香郭桂庆陈辉树
- 关键词：CD34单克隆抗体
- 单克隆抗体体外大容量骨髓净化白血病的研究被引量：1
- 1994年
- 应用补体介导细胞毒法体外消除２例白血病骨髓中残存瘤细胞，并作自身骨髓移植。用国产ＣＤ７单抗（ＬＮ６７－８及ＬＳ９３－２，ＩｇＧ２ｂ）首次净化１例Ｔ－ＡＬＬ骨髓及ＣＤ１０单抗（５５，ＩｇＧ２ａ）净化１例ＣＡＬＬＡ＋－ＡＬＬ。靶细胞清除率均达３个对数级，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ回收率分别为５７．６％～７５．８％及５１．７％～７２．３％。Ｔ－ＡＬＬ病人移植后２６天获造血重建。现已完全缓解３年，首次证实国产单抗ＬＮ６７－８及ＬＳ９３－２净化骨髓有效、安全。
- 韩敬淑廖晓龙黄丽华马丽马冠杰郝玉书徐国珠严文伟葛淑珍姜蓉孙同哲沈德诚白炎陈勇
- 关键词：白血病骨髓移植单克隆抗体
