霍文婷
- 作品数:4 被引量:24H指数:3
- 供职机构:天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:“十一五”国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- NH_4^+对L-色氨酸发酵的影响被引量:5
- 2011年
- 目的:探究NH4+浓度对大肠杆菌E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸的影响。方法:通过外源添加试验,利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,考察E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸过程中生物量、L-色氨酸产量、有机酸含量、耗糖速率、发酵液中NH4+浓度及质粒稳定性变化。建立了大肠杆菌合成L-色氨酸的代谢流平衡模型,应用MATLAB软件计算出E.coli TRTH发酵中后期代谢网络的代谢流分布。结果:发酵结果显示,利用NaOH和氨水混合补料,控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,菌体能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了12.16%和19.80%。随着NH4+浓度的增加,发酵液中丙酮酸、乳酸及乙酸浓度均略有增加,细胞质粒稳定性下降。控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,E.coli TRTH发酵生产L-色氨酸的代谢流量分析结果表明,EMP途径的代谢流量降低7.31%,PP途径的代谢流量增加7.14%,TCA循环的代谢流量降低22.04%。结论:高浓度的NH4+导致菌体生长提前结束,耗糖速率降低,产酸受阻,控制NH4+浓度在120 mmol/L以下,解除了NH4+对菌体生长和产物生成的抑制,使得菌体生物量和L-色氨酸产量大幅提高,实现了高密度发酵培养的目的。
- 黄静史建明霍文婷徐庆阳谢希贤温廷益陈宁
- 关键词:大肠杆菌NH4+L-色氨酸高密度发酵
- 胞苷工程菌构建研究进展
- 为了提高胞苷产量,可以通过基因工程手段对胞苷生物合成途径中的关键酶基因cdd进行改造。通过Red重组系统敲除了大肠杆菌基因组上的胞苷脱氨酶基因(cdd),阻断了胞苷的分解代谢。然后构建了含解淀粉芽孢杆菌嘧啶操纵子结构基因...
- 霍文婷谢希贤徐庆阳
- 关键词:胞苷合成工艺基因工程菌株选育
- 氮源对L-色氨酸发酵的影响被引量:12
- 2011年
- 以L-色氨酸生产菌E.coli TRTH为供试菌株,研究了氮源对L-色氨酸发酵的影响。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,确定了最佳有机氮源和无机氮源分别为酵母粉和硫酸铵,进一步确定酵母粉和硫酸铵的最佳用量为1 g/L和10 g/L,最后采用NaOH和氨水混合补料控制发酵液中NH4+浓度在120 mmol/L以下,发酵38 h,菌体生物量和L-色氨酸产量分别达到53.42 g/L和32.6 g/L,实现了大肠杆菌的高密度培养。
- 黄静史建明霍文婷徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词:L-色氨酸氮源分批补料发酵
- 过表达carAB和pyrBI对大肠杆菌发酵胞苷的影响被引量:7
- 2012年
- 为了考察氨甲酰磷酸合成酶和天冬氨酸氨甲酰转移酶对大肠杆菌发酵生产胞苷的影响,以E.coli A39(△cdd)基因组为模板克隆carAB和pyrBI并与载体pSTV28连接构建出重组质粒pSTV28-carAB和pSTV28-pyrBI,将这两个重组质粒分别转入出发菌株A39(△cdd)后,通过摇瓶发酵研究重组质粒对菌体的生长、胞苷和尿苷产量及副产物乙酸积累的影响。结果显示,工程菌E.coli A39-AB和A39-BI的胞苷产量分别为583.5 mg/L、408.4 mg/L,与出发菌株相比,分别提高了85.3%、29.7%。这说明过表达操纵子基因carAB和pyrBI均可促进胞苷的积累。
- 吴晓娇孙家凯霍文婷谢希贤徐庆阳陈宁