陈佳玉
- 作品数：34 被引量：82H指数：5
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 丙型肝炎治疗性DNA疫苗的实验研究
- 为了进行丙型肝炎(HCV)治疗性DNA疫苗的研制,本实验成功建造了HCV感染的细胞模型。以红色荧光蛋白(RFP)和绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,将其分别插入乙肝核心抗原基因(HBc)的e1 loop和e2 loop处...
- 陈佳玉
- 关键词：丙型肝炎治疗性疫苗乙肝核心抗原T细胞表位细胞免疫反应
- 文献传递
- 中药紫草素对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨紫草素(shikonin)对体外鼻咽癌细胞增殖及凋亡的影响。方法经紫草素处理后的人鼻咽癌细胞株CNE-2和永生化非癌性人鼻咽上皮细胞株NP-69,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖抑制情况;在荧光显微镜下利用Hoechst33258荧光染色法观察药物处理后细胞的凋亡现象;应用流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡率的变化。结果不同浓度紫草素对CNE-2细胞的增殖均有抑制作用,与无药物处理对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并呈时间和浓度依赖性,其中10μg/ml紫草素处理CNE-2细胞72 h后的抑制率高达84.64%;Hoechst33258染色检测发现典型的凋亡细胞核形态学变化;流式细胞仪检测显示,CNE-2细胞实验组的凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论紫草素能明显抑制体外鼻咽癌CNE-2细胞的生长,呈浓度与时间依赖性,并诱导其凋亡。
- 陈武兵蔡志毅金巧智陈佳玉孙栋勋
- 关键词：紫草素鼻咽癌细胞增殖细胞凋亡
- 以HBc颗粒为载体的真核表达载体pcDNA3.1-HBc^(NheⅠSpeⅠ)的构建被引量：1
- 2006年
- 目的构建含乙肝核心C基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBc^(NheⅠSpeⅠ),为预防性及治疗性表位疫苗的研制打下基础。方法采用分子克隆技术在原核表达质粒pTrc-core的HBcAge1-loop及e2-loop内分别添加NheⅠ及SpeⅠ酶切位点,双酶切此重组载体pTrc-coreNheⅠSpeⅠ及真核表达载体pcDNA3.1,产物经纯化、连接,构建成真核表达质粒pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ,并通过酶切、PCR及测序对该质粒加以鉴定。为了证实质粒pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ作为表达载体的可行性,实验中以GFP为报告基因,利用基因重组技术在该质粒的基础上构建了真核表达质粒pcDNA3.1-HBc-GFP,并将其转染HeLa细胞,共聚焦显微镜观察HeLa细胞内绿色荧光蛋白的表达情况。同时将质粒pcDNA3.1-HBc-GFP转化大肠杆菌JM109,密度梯度离心回收并纯化其表达产物HBcAg-GFP,电镜下观察其成颗粒性。结果酶切、PCR及测序结果均与预期结果相符,共聚焦显微镜下观察到HeLa细胞内绿色荧光蛋白的成功表达。电镜下观察到重组蛋白HBcAg-GFP为颗粒性蛋白。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ,该载体可作为治疗性及预防性DNA疫苗的候选载体,为深入研究预防性及治疗性表位疫苗提供了资料。
- 陈佳玉李景利李凡
- 关键词：免疫反应表位疫苗
- 乙肝核心抗原为载体进行HCV治疗性疫苗的实验研究
- 2007年
- 目的以乙肝核心抗原为载体进行HCVT表位的表达,并对表达产物进行免疫原性分析。方法利用DNA重组技术将HCVT表位(131-140aa)插入HBcAgel-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-HCV(T),并在JM109中进行表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T,该蛋白经免疫原性检测、纯度分析及定量后,以pTrc-core表达产物HBcAg作对照免疫Balb/C鼠。适时进行抑瘤实验、HBcAb检测、流式细胞仪进行T细胞分类,以观察HBcAg-T的免疫原性。结果抑瘤实验中HBcAg-T免疫组小鼠仅形成一个瘤块,数量和大小均低于对照组,ELISA结果显示HBcAg-T免疫组HBcAb滴度相似于HBcAg免疫组,流式散点图显示HBcAg-T免疫组CD8+T细胞所占比例明显增高。结论HBcAg-T诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选。该实验为HCV治疗性疫苗的成功研制奠定了基础。
- 陈佳玉李景利李凡
- 关键词：丙型肝炎T细胞表位免疫反应
- 乙型肝炎核心抗原为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验被引量：3
- 2007年
- 目的以HBcAg为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验研究。方法利用DNA重组技术将HCV T表位(131～140位氨基酸)和(1 445～1 453位氨基酸)分别插入HBcAg el-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-T1和pTrc-core-T2,并在大肠埃希菌DH5α中表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T1和HBcAg-T2。以T1和T2表位肽混合物、HBcAg- T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫Balb/C小鼠,并设空白对照,适时行抑瘤实验;流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+、IL-4及IFN-γ、IL-5,ELISA法检测IL-12;并行细胞杀伤实验,以观察混合蛋白的免疫原性。结果PCR法鉴定质粒pTrc-core-T1和pTrc-core-T2正确。抑瘤实验中HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫组仅1只小鼠形成瘤块,直径0.1 cm,低于对照组的平均直径1.3 cm、T1T2混合肽免疫组的0.9 cm;混合蛋白免疫组脾细胞内CD8^+T细胞占(20.21±2.01)%,高于混合肽免疫组的(15.33±1.45)%和空白对照组的(5.09±1.66)%(P<0.01);3组内脾细胞内IFN-γ阳性细胞百分比分别为(1.58±0.05)%、(0.88±0.02)%和(0.53±0.03)%(P<0.01);血清中IL-5较混合表位肽组有所下降(P<0.01);而ELISA检测混合蛋白组IL-12高于T1T2混合表位肽免疫组;混合蛋白免疫组小鼠HCV特异细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性明显高于T1T2混合表位肽免疫组(P<0.01)。结论HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选。
- 陈佳玉李凡
- 关键词：肝炎丙型肝炎核心抗原乙型
- 医学实验动物学开放式实验教学模式的探索与实践被引量：3
- 2014年
- 开放式实验教学可以充分调动学生的学习兴趣,激发学生勇于开拓创新的能动性,发掘不同层次学生的潜质,提高了学生的综合实验素质。采用开放式实验教学方法为临床培养应用型人才是完全可行的。
- 陈佳玉
- 关键词：实验动物学教学模式开放式实验教学
- Polysaccharide from celery inhibits lung cancer growth by increasing immune response and ECRG4 expression
- Celery is plant of Apiaceae family that has been shown to play anti-tumor properties in several tumor models.H...
- 刘池波陈佳玉金晓燕杨林军
- 文献传递
- HCV细胞感染模型的建立被引量：1
- 2008年
- 目的研究人宫颈癌细胞(Hela)对丙型肝炎病毒(HCV)的易感性,建立HCV细胞感染模型。方法将Hela细胞与慢性HCV患者血清共同温育8 h,收集不同时间点标本,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测细胞培养上清液中正负链RNA,S-P法检测细胞内HCV NS1特异性抗原的表达情况。结果培养上清中可持续检测到HCV正链RNA,并可间断地检测到HCV负链RNA;HCV NS1特异性抗原能在感染细胞内稳定表达,阳性物质多位于胞浆中。结论Hela细胞不但对HCV易感,而且可以支持HCV体外复制表达。
- 陈佳玉陈佳琪金显云
- 关键词：丙型肝炎病毒HELA细胞
- 丙肝病毒siRNA表达载体构建及抗病毒作用研究
- 2009年
- 目的进行丙型肝炎病毒(HCV)RNA干扰(RNA interference RNAi)作用研究。方法本实验选择HCV NS3基因片段作为靶序列,合成含有靶序列的DNA片段并克隆到pGCsi-U6/Neo/GFP/siNeGative载体中,构建可表达具有发夹结构双链siRNA的真核表达质粒pGCsi-U6/Neo/GFP/A,并转染Hela细胞,用HCV攻击该细胞,通过TCID50和HCV负链RT-PCR检测该载体对HCV感染细胞的保护效果。结果通过测序及荧光显微镜观察证明载体构建成功,实验组TCID50明显高于对照组,且RT-PCR结果显示pGCsi-U6/Neo/GFP/A转染组的HCV负链RNA表达量显著低于对照组。结论证实重组质粒表达产物能成功地使模型细胞中的HCV NS3基因沉默,并间接抑制了病毒的复制,本实验的成功无疑为HCV的治疗及蛋白功能的研究打下坚实的基础。
- 陈佳玉
- 关键词：丙型肝炎病毒HELA细胞RNA干涉
- ECRG4蛋白与细胞膜上胆固醇之间的相关性研究
- 2013年
- 目的探讨ECRG4在脂筏中分布及与细胞膜胆固醇含量的相关性。方法通过RT-PCR及Westernblot鉴定ECRG4阳性表达细胞株,用甲基-β-环糊精去除细胞膜上的胆固醇,超速离心的方法分离细胞膜,Western blot检测ECRG4蛋白含量变化。密度梯度离心制备脂筏,通过Western blot检测ECRG4蛋白水平。结果ECRG4在DU4475细胞中高表达,降低细胞膜上胆固醇后,ECRG4水平未发生明显变化;同时Western blot结果证实ECRG4未分布于脂筏。结论 ECRG4蛋白未定位于脂筏,且与细胞膜胆固醇之间无相关性。
- 陈佳玉张宇王泰鑫张丽婷
- 关键词：胆固醇脂筏
