邢蔚
- 作品数:3 被引量:16H指数:3
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miR-182可以促进耳蜗前体细胞分化为毛细胞被引量:6
- 2014年
- 目的探讨miR-182诱导耳蜗前体细胞向毛细胞分化的作用及机制。方法从新生大鼠耳蜗中分离培养耳蜗前体细胞并用血清诱导分化,BrdU、Nestin免疫荧光染色鉴定细胞自我增殖能力;myosinⅦa和phalloidin免疫荧光染色鉴定其是否具有分化为毛细胞的潜能。分别利用miR-182 mimics和siRNA在新生大鼠耳蜗前体细胞中过表达和低表达miR-182,然后在细胞诱导分化7天后,用流式细胞仪检测分化细胞中myosinⅦa阳性细胞比例,用Western-blot检测支持细胞标志分子中Sox2的变化。结果使用miR-182 mimics进行过表达后,耳蜗前体细胞分化为myosinⅦa阳性表达的细胞比例显著高于对照组,使用miR-182 siRNA进行低表达后此比例显著低于对照组。Western-blot检测显示,Sox2在miR-182 mimics组较对照组降低,miR-182 siRNA组较对照组增加。结论过表达miRN182可以促进耳蜗前体细胞向毛细胞方向分化,ox2可能是此过程中的靶基因。
- 邢蔚闫辉米文娟陈俊邱建华
- 关键词:分化毛细胞
- 硫酸卡那霉素联合呋塞米快速致聋大鼠模型的研究被引量:5
- 2014年
- 目的观察硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,KM)与呋塞米(furosemide,Fur)联合用药建立药物性快速致聋大鼠动物模型的效果。方法 32只SD大鼠随机分为A组(KM+Fur后1天组)、B组(KM+Fur后7天组)、C组(KM+Fur后14天组)、D组(对照组),每组8只动物。A、B、C三组分别经一次性腹腔注射KM 500mg/kg,30分钟后再经腹腔注射Fur 0.2ml/kg,空白对照组按体重给予相同剂量生理盐水。各组在相应的时间点完成听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测当天,分别行耳蜗基底膜铺片及扫描电镜观察耳蜗毛细胞损伤情况,免疫荧光染色观察螺旋神经节细胞亡情况。结果 A、B、C组各频率ABR阈值较正常对照组明显升高(P<0.05);而A、B、C组各频率ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组耳蜗底回外毛细胞明显缺失,纤毛排列紊乱,螺旋神经节细胞的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的表达量较正常对照组均明显增加(P<0.05)。结论硫酸卡那霉素和呋塞米联合单次腹腔用药24小时后大鼠ABR反应阈明显增高,并可见耳蜗底回毛细胞的明显缺失,KM+Fur联合应用是简单、快速而有效的大鼠耳聋动物模型建模方法。
- 闫辉邢蔚宋勇莉王人凤陈俊邱建华
- 关键词:硫酸卡那霉素呋塞米耳聋动物模型
- 慢性锰中毒对大鼠听功能及耳蜗细胞的影响被引量:5
- 2014年
- 目的探讨锰中毒对大鼠听功能及耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞的影响。方法选取60只断乳21天的SD大鼠,随机分为染毒组和对照组,染毒组(30只)给予氯化锰水溶液(MnCl2·4H2O,100mg·kg-1d-1)连续灌胃12w,对照组(30只)以同法给予等量去离子水。于灌胃4、8和12w后分别检测两组大鼠血锰浓度,于灌胃12w对两组大鼠分别行ABR检测,基底膜铺片鬼笔环肽-异硫氰酸荧光素(Phalloidin-FITC)染色观察毛细胞形态及计数,HE染色观察螺旋神经节细胞形态及计数,透射电镜观察毛细胞及螺旋神经节细胞超微结构的变化。结果染毒组大鼠灌胃4、8、12w后血锰浓度分别为24.1±2.4、31.5±2.6、26.7±2.8ng/ml,明显高于对照组(分别为8.5±1.7、11.2±2.1、12.7±2.1ng/ml),差异有统计学意义(均为P<0.05)。灌胃12w后,染毒组大鼠4、8、16、24、32kHz ABR反应阈均明显高于对照组(P<0.05),其中高频阈值升高显著。灌胃12w后,染毒组耳蜗毛细胞缺失,以底回缺失明显;螺旋神经节细胞数量减少;毛细胞和螺旋神经节细胞线粒体嵴断裂或消失,呈空泡样变。结论慢性锰中毒可导致大鼠耳蜗毛细胞缺失和螺旋神经节细胞减少,进而导致大鼠听功能损伤。
- 唐晓旭丁忠家王人凤施泽涛邢蔚闫辉武瑾宋勇莉卢连军
- 关键词:锰中毒毛细胞螺旋神经节细胞听力损失