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鼠尾静脉流体力学转染技术对绿色荧光蛋白表达质粒器官靶向分布的影响被引量：7: 2007年; 目的:观察流体力学尾静脉注射对绿色荧光蛋白基因器官靶向性的影响,为今后质粒载体的基因治疗和功能研究寻找潜在的靶器官。方法:实验于2005-12/2006-04在江西省分子医学重点实验室完成。选用健康雄性昆明鼠40只,将32只小鼠按随机数字表法分为流体力学注射和常规注射两大组,每大组再分为转染组和对照组两个小组(n=8),并设正常对照组(n=8)。①流体力学转染组将100μg/只绿色荧光蛋白表达质粒溶液2mL在5s内快速注入尾静脉;对照组仅在5s内注入林格氏液2mL。②常规注射组则将2mL林格氏液或绿色荧光蛋白表达质粒溶液在30s左右注入尾静脉。注射结束后24h采集各组小鼠血清检测转氨酶,并采集肝、脾、心、肾、肺和脑组织进行冰冻切片,部分肝组织采用多聚甲醛固定后切片,荧光显微镜下观察。结果:40只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①流体力学注射组和常规注射组小鼠血清转氨酶与正常对照组比较差异均无显著性意义(P>0.05)。②常规尾静脉注射引起少数肾小球细胞表达绿色荧光蛋白,而肝、脾、心、肺及脑等组织未见明显绿色荧光蛋白表达。③流体力学注射引起肝内绿色荧光蛋白高水平表达,肝细胞表达率接近45%,其他组织则无绿色荧光蛋白表达。结论:流体力学方法是肝靶向性的活体基因转染方法,绿色荧光蛋白可作为该方法进行目的基因研究的一个可靠和方便的示踪剂。; 刘亮明罗杰张吉翔郭宏兴邓欢徐江晶尹东熊高飞; 关键词：发光蛋白质类质粒

丝/苏氨酸激酶Pim-1与肿瘤被引量：6: 2006年; 人类pim-1基因编码一种丝/苏氨酸激酶(serine/threon ine k inase):P im-1,它广泛表达于人类各种组织细胞中,并且能够磷酸化多种在细胞凋亡、细胞周期调控中起着重要作用的细胞因子,如:STATs、Bad、cdc25A等,从而在肿瘤发生及发展过程中发挥着重要的作用。pim-1激酶可以作为肿瘤基因以及药物治疗的靶物,为临床治疗提出新思路。; 邓欢刘亮明张吉翔; 关键词：肿瘤凋亡细胞周期苏氨酸激酶

丝/苏氨酸激酶Pim-3基因对急性肝功能衰竭肝保护效应的实验研究被引量：8: 2006年; 急性肝功能衰竭（ALF）是常见的临床急重病症，缺乏特殊有效的治疗药物，现基因治疗成为该病治疗研究的热点。作为丝/芬氨酸激酶Pim家族的重要成员，Pim-3基因在细胞生长通路中起重要作用，已知Pim-3基因在损伤周围组织和增殖活跃的肝组织内均出现极高水平的表达。这提示Pim-3基因可能在损伤肝组织的修复中扮演重要角色。; 刘亮明邓欢张吉翔罗杰孙水林尹东; 关键词：急性肝功能衰竭激酶氨酸治疗药物急重病症

共价闭合环状DNA在肝病发展中的作用被引量：5: 2007年; 肝病在国内是一种重要而难治的疾病,主要包括急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化和肝癌。多年研究发现,cccDNA在肝病发展的每个过程中起着重要的作用。尽管有些具体机制不是很清楚,此文就cccDNA在肝病中的作用作一综述。; 黄神安邓欢张吉翔; 关键词：共价闭合环状DNA 乙型肝炎肝硬化肝癌

肝炎病毒与原癌基因的激活被引量：3: 2007年; 了解肝炎病毒进入人体后与原癌基因的激活在致癌中的机制,对于肝癌的病因学以及治疗具有极大的促进作用。现就乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)对原癌基因的激活和抑癌基因的表达异常导致肝癌形成和发展的研究进展进行综述。; 郭宏兴邓欢张吉翔; 关键词：HBV HCV 原癌基因抑癌基因

DNA甲基化与细胞周期被引量：2: 2006年; 细胞基因的遗传性及表观遗传性变异所致细胞周期过程的改变是恶性肿瘤的重要发病机制。在诸多调控细胞周期的影响因素中,DNA甲基化造成的表观遗传改变逐渐引起了人们的重视。目前的研究发现,DNA甲基化与越来越多的细胞周期调控基因关系密切,但它们之间的确切作用机制仍不十分明确。现就目前国内外关于DNA甲基化对细胞周期影响的研究进展作一综述。; 邓欢黄年根张吉翔; 关键词：DNA甲基化细胞周期转录抑制

内毒素诱导D-半乳糖胺致敏大鼠急性肝衰竭的研究被引量：13: 2006年; 目的探讨内毒素(即脂多糖)诱导D-半乳糖胺致敏大鼠急性肝衰竭肝细胞凋亡情况及肝损伤发生机制。方法48只Wistar大鼠进行随机对照分组实验,分为6 h、24 h和48 h取材3大组(各16只),每个大组再分为处理组和对照组(各8只)。处理组大鼠以脂多糖(50μg／kg)+D-半乳糖胺(300 mg／kg),用1 ml无菌生理盐水溶解后腹腔内注射,对照组动物仅腹腔内注射1 ml生理盐水。在相应时间点,门静脉或下腔静脉采血查丙氨酸氨基转移酶(ALT);肝组织切片分别行透射电镜检查和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记分析(TUNEL分析);基因表达通过逆转录。聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测。结果所有处理组大鼠ALT水平均显著高于对照组(66 U／L±3 U／L),而6 h组ALT水平(399 U／L±83 U／L)显著低于24 h组(3178 U／L±63 U／L)和48 h组(1506 U／L±56U／L)。48 h组ALT水平则低于24 h组。透射电镜检查见正常对照组肝组织内罕有凋亡细胞,脂多糖／D-半乳糖胺处理6 h组凋亡的肝细胞明显较多,且多表现为早期细胞凋亡的特征,24 h和48 h组的肝细胞凋亡明显多于6 h组,并多表现为晚期凋亡的特征。肝组织的TUNEL分析显示,对照组可见少量凋亡的肝细胞(凋亡指数为2．6％±1．1％),6 h组凋亡的肝细胞明显增多(凋亡指数为7．3％±1.5％),24 h和48 h组肝组织内则可见大量肝细胞凋亡(凋亡指数分别为71．8％±10．3％和68．2％±11．9％)。iNOS mRNA在正常对照组无表达,脂多糖／D-半乳糖胺作用后早期(6 h)有高水平的表达,24 h和48 h则显著较低;p53基因在对照组和6 h组有低水平表达,在24 h和48 h组表达明显较高;p21waf1/cip1基因在对照组无表达,6 h出现低水平表达,24 h mRNA表达水平达峰值,在48 h则迅速下降到0。结论小剂量脂多糖可诱导D-半乳糖胺致敏大鼠发生急性肝衰竭;细胞凋亡是其重要的病理形态学改变;肝衰竭肝损伤的发生与iNOS基�; 刘亮明罗杰张吉翔邓欢孙水林熊高飞; 关键词：内毒素类半乳糖胺脱噬作用

裸质粒流体力学注射法-基因治疗研究的利器被引量：2: 2006年; 外源基因在动物活体组织的有效表达是基因治疗研究的基础．同时,作为一种疾病治疗方法,安全性也是一个不容忽视的问题．本文从基因治疗研究的角度,介绍了流体力学注射法的概念、器官靶向性、目的基因在靶器官内的转染效率、安全性和转染机制,以及该方法在疾病模型动物基因治疗方面的应用等等．总之,流体力学注射法以其高效、安全的肝靶向性活体基因转染、简单便捷的操作方法,正在逐渐成为人们进行基因治疗研究的重要工具．; 刘亮明罗杰张吉翔郭宏兴邓欢; 关键词：基因治疗肝靶向性

丝氨酸蛋白酶HtrA2/Omi与细胞存亡被引量：2: 2007年; The serine protease HtrA2/Omi is released from the mitochondrial intermembrane space following apoptotic stimuli.Once in the cytosol,HtrA2/Omi has been implicated in promoting cell death in caspase-dependent or caspase-independent pathway.On the other hand,HtrA2/Omi can refold and degrade misfolded proteins in the mitochondria during cell stress.; 邓欢刘亮明张吉翔; 关键词：线粒体细胞凋亡

IΚB激酶家族新成员：IKKε被引量：2: 2007年; IΚB激酶家族(IΚB kinases,IKKs)是NF-ΚB信号途径最为重要的成员之一,已发现其在先天性免疫以及炎症反应的调节中发挥关键作用.除IKKα/β/γ之外,作为IKKs的最新成员,IKKε不仅具有与IKKα/β/γ类似的作用,而且最近的研究数据证实IKKε还能通过凋亡蛋白抑制物(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)调节caspases的活性,参加caspases的凋亡和非凋亡依赖性信号途径.; 曾朋邓欢刘亮明; 关键词：CASPASE 凋亡

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