邓刚
- 作品数:11 被引量:7H指数:2
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部高等学校骨干教师资助计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- Jembrana病毒反式激活因子Tat结构和功能的研究
- JDV在种属上是典型的慢病毒,然而它却能快速发病并导致很高的死亡率。JDVTat不仅能激活自身LTR,还能激活BIV和HIV两种差异明显的LTR,且激活能力甚至强于BIV和HIV自身Tat,目前其多效性的具体机理尚不清楚...
- 邓刚
- 关键词:细胞因子
- 文献传递
- JDVTat反式激活LTR与HIV-1Tat采用类似的细胞因子被引量:2
- 2004年
- 为分析 JDV Tat 在反式激活 JDV 及 HIV-1 LTR 过程中是否采用与 HIV-1 Tat 类似的细胞因子,本文构建了包含完整激活域的 jTat70 和 hTat47,同时构建了 cyclin T1 和 CDK9 真核表达及反义转译质粒。过量表达 hTat47和 jTat70 对 hTat 反式激活 HIV-1 LTR,jTat 反式激活 JDV 和 HIV-1 LTR 均有明显的抑制作用推测 jTat 和 hTat 的反式激活作用可能涉及类似的细胞因子。通过 cyclin T1 和 CDK9 的反义转译质粒对 jTat 反式激活的抑制作用证实这两种细胞因子参与了 jTat 对 JDV 和 HIV-1 LTR 的反式激活。
- 邓刚莎日娜母俊杰乔文涛耿运琪陈启民
- 关键词:人免疫缺陷病毒
- JDV LTR应答元件的精细结构和功能分析
- 陈启民王金忠乔文涛王世珍刘子敬尹红艳邓刚
- 证明了AP-4蛋白JDV LTR起始转录和反式激活因子Tat蛋白激活LTR所必须的细胞因子; 首次证明了转录因子AP-4 在体外可与JDV LTR上的AP-4应答元件直接结合,而不需要其他细胞因子的协助;证明了JDV 的...
- 关键词:
- 关键词:慢病毒TAT蛋白
- JDV与三种牛反转录病毒相互关系的初步研究被引量:1
- 2004年
- 为研究JDV与其它三种牛反转录病毒BIV、BLV、BFV的相互作用关系,将以JDV、BIV、BLV、BFV的LTR为启动子,以Luc为报告基因的质粒和以上病毒反式激活因子的表达质粒共转染BL12细胞系,通过瞬时表达分析试验证明了JDV和BIV的LTR和Tat之间亲缘关系很近,能够相互激活;JDVTat可以反式激活BLVLTR,BLVTax不能激活JDVLTR;JDVLTR上存在BFVTas的应答元件;BLV、BFV和BIV的LTR和反式激活因子间不存在相互激活。
- 尹红艳邓刚莎日娜乔文涛耿运琪陈启民
- 关键词:反转录病毒基因表达牛病毒性腹泻病毒
- 三种急性和缓性慢病毒Tat激活模式及其与宿主关系的比较研究
- 张翠竹邓刚王维马喆苏旸史颖娇孙庆
- 该项目借助真核双杂及GST-pulldown系统广泛筛查jTat,bTat和hTat与各种属的CyclinT1、CDK9及乙酰化相关蛋白间的相互作用,找出导致不同Tat反式激活存在差异的关键因子,并通过RNA电泳迁移率变...
- 关键词:
- 关键词:TAT慢病毒宿主细胞
- Jem brana病毒LTR及细胞因子AP-4调控机制的研究被引量:4
- 2002年
- Jembrana病毒 ( Jembrana disease virus,JDV)是一种新近分离到的病毒 ,在分类学上属于反转录病毒科牛慢病毒属 ,与牛免疫缺陷病毒 ( Bovine immunodeficiency virus,BIV)亲缘关系很近 .序列分析显示在 JDV LTR中存在许多潜在的转录因子如 NF-κB、SP-1、核心增强子和 AP-4 ( activatorprotein 4 )的应答元件 ,R区含有反式激活因子 Tat( transactivator of transcription)的应答元件 ( transactivation responese element,TAR) ,暗示有多个转录因子协同参与 JDV LTR的转录调控 .本研究将带有 luc报告基因的 JDV LTR系列缺失质粒分别与 JDVTat表达质粒 p RSV-JTAT共转染 BL-1 2细胞系 ,体外瞬时表达分析显示 ,当 LTR从 nt-2 36缺失到 -1 2 1时 ,基本转录活性提高了 2 .5倍 ,表明 nt-2 36到 -1 2 1间存在负调控元件 .在 He La细胞中的转染结果显示 ,细胞因子参与由 Tat诱导的反式激活作用 .而细胞转录因子 AP-4对 JDV LTR起始转录具有正、负调控作用 ,正、负调控的开关受自身蛋白产量的影响 .
- 刘子敬王金忠邓刚尹红艳耿运琪陈启民
- 关键词:细胞因子TATLTR反转录病毒科分子生物学
- RNA结合域决定JDV Tat具有较强的激活能力
- 2006年
- 为分析JDV与BIV、HIV-1LTR和Tat相互激活能力差异的原因,在氨基酸序列对比及HIV-1Tat功能域划分的基础上构建了JH、HJ、JB、BJ几种嵌合Tat蛋白,并克隆到真核表达载体。将上述表达质粒与以JDV、BIV和HIV-1LTR为启动子,以luc为报告基因的质粒共转染Hela细胞,证实了三种不同Tat激活能力的差异主要来自其结合域RNA结合能力的差异,排除了结构域不完整和细胞因子缺乏造成JH不激活HIV-1LTR的可能性。
- 邓刚苏旸母俊杰李悦乔文涛耿运琪陈启民
- 关键词:HIV-1BIVLTR嵌合蛋白
- Jembrane病毒反式激活因子Tat结构和功能的研究
- 陈启民张翠竹孙庆王世珍邓刚尹红艳毕昌昊
- 通过对JDV反式激活因子Tat的研究,推动探索全新的HIV治疗方式。
- 关键词:
- 关键词:细胞周期蛋白
- Jembrana病毒LTR上的AP-4应答元件被引量:1
- 2003年
- 通过反义转译实验和凝胶电泳迁移率变动分析,证实在牛肺细胞中AP-4蛋白可与JDV LTR上的AP-4应答元件直接结合.对AP-4应答元件进行的一系列定点与盒式诱变证明,JDV LTR上CAGCTG(-65~-60)6个碱基可能为AP4的识别序列,并且每个碱基在AP-4蛋白与DNA结合过程中所起作用的重要程度不同,当前两位碱基突变为GC时,对JDVLTR表达功能影响非常明显.
- 刘子敬尹红艳邓刚袁玉华王金忠耿运琪陈启民
- 关键词:LTR碱基定点诱变基因表达调控
- SARS-CoV棘突蛋白片段在E.coli中的表达及免疫活性分析被引量:2
- 2005年
- SARS-冠状病毒(SARS-CoV)棘突蛋白(Spike,S)是构成病毒包膜突起的主要成分,属于I型膜糖蛋白,全长1255 aa,在病毒入侵宿主细胞中起重要作用.本文利用生物信息学技术,界定冠状病毒SARS-CoV S蛋白的抗原决定区域,通过PCR扩增相应片段,克隆至原核表达载体pET-H,得到四个重组质粒pET-H S1、pET-H S3、pET-H S4、pET-H S5.经序列测定证实后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导获得表达,产物经紫外薄层扫描显示目的蛋白占菌体细胞总蛋白量的20%~30%.经Western blot检测,表达蛋白与恢复期SARS病人血清呈高反应原性.纯化相应蛋白免疫小鼠,所获抗血清效价达1:3×103.与SARS诊断试剂反应呈阳性,这一工作将为进一步研究S蛋白的定位、功能及SARS诊断提供帮助.
- 莎日娜谈娟邓刚胡文治赵季红岳继华乔文涛陈启民
- 关键词:多克隆抗体