谷景义 作品数:18 被引量:24 H指数:3 供职机构: 暨南大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省产业技术研究与开发资金计划项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 语言文字 文化科学 更多>>
尼克酰胺对人脐带间充质干细胞的保护效应 被引量:3 2015年 目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)输注损伤的效应。方法:空白对照组为0.3 m L生理盐水、MSC组为0.3 m L 1×106CFSE标记的h UC-MSCs,MSC+NAA组为0.3 m L 10 mmol/L NAA处理24 h的1×106CFSE标记的h UC-MSCs,分别与2.7 m L正常人全血混匀,注入改良Chandler Loop内,在37℃下,20 m L/min循环1 h,检测循环前后血小板、白细胞、h UC-MSCs和C3a的变化。结果:血小板消耗率空白对照组为(29.96±10.88)%、MSC组为(77.76±19.29)%、MSC+NAA组为(50.13±18.10)%;白细胞消耗率空白对照组为(37.82±13.81)%、MSC组为(64.57±17.08)%、MSC+NAA组为(41.52±17.26)%,MSC组和MSC+NAA组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MSC+NAA组的h UC-MSCs存活率较MSC组高(P<0.05)。空白对照、MSC和MSC+NAA组的C3a含量分别为(206.27±58.10)μg/L、(230.47±39.61)μg/L和(208.37±40.66)μg/L。结论:h UC-MSCs与正常人全血在改良Chandler Loop内共循环1 h可模拟血液介导即刻炎症反应(instant blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR),大量损耗MSCs和血液成分,导致C3a上升。NAA可抑制IBMIR、降低血液成分的损耗、提高h UC-MSCs的存活率,提示NAA能减轻MSCs的输注损伤。 杨晓蕾 陈智聪 廖继东 谷景义 于波 刘革修关键词:人脐带间充质干细胞 LOOP 尼克酰胺 靶向抑制miRNA-21提高白血病K562细胞对阿糖胞苷的敏感性 被引量:10 2011年 为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性及可能的作用机制,在LipofectamineTM2000介导下,将化学合成的AMO-miR-21转染K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测单独使用AMO-miR-21、Ara-C以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用,并计算抑制率和IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR(Real-time PCR)检测miRNA-21及其候选靶基因Pdcd4 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测Pdcd4蛋白的表达水平.结果显示Ara-C与AMO-miR-21联合使用后,IC50从1.95μmol/L降低到0.84μmol/L,敏感性提高到单用Ara-C的2.3倍.AMO-miR-21联合Ara-C组细胞凋亡明显增加(P<0.05).AMO-miR-21显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.05),同时Pdcd4的表达明显增加(P<0.05).提示AMO-miR-21可以提高K562细胞对Ara-C的敏感性,其作用机制与靶向抑制miRNA-21,进而诱导细胞凋亡有关. 朱雪姣 李育敏 谷景义 郭敏 费嘉关键词:MIRNA-21 阿糖胞苷 K562细胞 化疗敏感性 RALA基因的小干扰RNA在制备抗白血病药物中的应用 本发明公开了一种RALA基因的小干扰RNA及其在制备抗白血病药物中的应用。所述小干扰RNA的序列如下:正义链为:5′-CGUGGAAACAUCUGCUAAATT-3′;反义链为:5′-UUUAGCAGAU GUUUCCA... 费嘉 李育敏 谷景义 朱雪姣 姚君琳 林春燕 黄康康 李灿峰文献传递 脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体表达的比较 被引量:4 2013年 目的:比较脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体(TLRs)的表达情况,为新生儿相关疾病的临床治疗积累实验资料。方法:取脐血和成人外周血,用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离、收集粒细胞,流式细胞术鉴定粒细胞纯度,RT-qPCR检测TLRs 10个成员的mRNA表达水平,流式细胞术测定部分TLRs的蛋白荧光强度。结果:(1)流式细胞术检测结果:采用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离收集的脐血粒细胞CD19-CD24+为(95.66±1.73)%,CD3+为(4.27±1.22)%,成人外周血粒细胞CD19-CD24+为(95.48±2.13)%,CD3+为(4.82±1.07)%。(2)RT-qPCR结果显示:脐血粒细胞和成人外周血粒细胞TLR1(0.141±0.091 vs 0.691±0.447)、TLR2(0.388±0.337 vs 0.901±0.508)、TLR4(0.093±0.071 vs 0.254±0.147)、TLR6(0.056±0.045 vs 0.202±0.034)、TLR7(0.001±0.001 vs 0.004±0.003)和TLR8(0.046±0.040 vs 0.211±0.146)的表达差异有统计学意义(P<0.01),TLR3、TLR5、TLR9和TLR10的表达差异无统计学意义(P>0.05);其中TLR3、TLR7和TLR9在脐血和成人外周血粒细胞的相对表达水平均较低。(3)流式分析显示脐血与成人外周血粒细胞TLR2平均蛋白荧光强度(21.40±3.09 vs 30.50±5.69)差异有统计学意义(P<0.05);而TLR4平均蛋白荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脐血粒细胞TLR1、TLR2、TLR4和TLR6 mRNA及TLR2蛋白表达低于成人外周血粒细胞,提示新生儿粒细胞识别细菌性病原微生物感染的能力可能存在缺陷或尚未完全成熟。这是否与新生儿急性细菌性毒血症发病及病死率较高有直接联系,有待进一步研究。 刘俊 吴瑕 陈智聪 廖继东 谷景义 杨晓蕾 柳国胜 吴慧 李扬秋关键词:新生儿 脐血 粒细胞 TOLL样受体 基因表达 微小RNA在白血病中的作用及治疗策略 2011年 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类由19~25个核苷酸组成的非编码蛋白质的单链小分子RNA,其在白血病中扮演着癌基因和抑癌基因的角色,针对miRNA在白血病中的不同作用,可采取相应的治疗策略。对于在白血病中高表达的具有癌基因功能的miRNA,可采用反义寡核苷酸等技术下调或抑制miRNA;而对于在白血病中显著低表达、发挥着抑癌基因作用的miRNA,可采用基因治疗的方法,导入相应的外源miRNA,使其正常表达。因此,miRNA对于白血病的基因治疗或作为白血病治疗的新靶标具有广阔的应用前景。 谷景义 朱雪娇 李育敏 费嘉关键词:微小RNA 癌基因 抑癌基因 反义寡核苷酸 白血病 以mRNAs和microRNAs为靶标的反义寡核苷酸设计及抗肿瘤实验研究 费嘉 张洹 何冬梅 刘誉 李育敏 谷景义 1.用RNAstructure(version3.7)软件设计并经实验筛选获得2条高效VEGF反义核酸序列,并揭示反义核酸的抑制效率与Overall△G37负相关(论文见CELLBIOLINT,2005,29(9)737...关键词:关键词:抗肿瘤实验 白血病 RALA基因的小干扰RNA在制备抗白血病药物中的应用 本发明公开了一种RALA基因的小干扰RNA及其在制备抗白血病药物中的应用。所述小干扰RNA的序列如下:正义链为:5′-CGUGGAAACAUCUGCUAAATT-3′;反义链为:5′-UUUAGCAGAU GUUUCCA... 费嘉 李育敏 谷景义 朱雪姣 姚君琳 林春燕 黄康康 李灿峰PDCD4基因小干扰RNA的筛选及其对人白血病细胞药物敏感性的研究 被引量:1 2012年 目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选出能有效沉默PDCD4基因mRNA表达的序列,并用蛋白印迹法(Western blotting)检测该有效序列对细胞内PDCD4蛋白表达水平的影响。将有效序列转染k562细胞6 h后,分别与常用的抗白血病药物三氧化二砷(As2O3)、阿糖胞苷(Ara-c)、小檗碱(BB)联合作用72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测PDCD4 siRNA对细胞药物敏感性的影响。结果:用实时定量PCR成功筛选出一条有效干扰PDCD4mRNA表达的序列,用Western blotting法检测该序列可显著降低PDCD4蛋白的表达水平(P<0.05);与ATO,Ara-c,BB联合作用72 h后,PDCD4表达的下调降低了细胞的药物敏感性(P<0.05)。结论:沉默PDCD4能够显著降低白血病细胞的药物敏感性,PDCD4 siRNA能够显著挽救药物作用后的细胞活性。 谷景义 朱雪娇 费嘉关键词:PDCD4 白血病K562细胞 阿糖胞苷 小檗碱 药物敏感性 研究生双语带教的实践体会 被引量:1 2011年 研究生通过参与本科医学生物化学实验课程的实践教学,将规范的教学与标准的实验操作与适当的板书相结合,灵活利用多媒体,双语教学等手段融入到本科实践教学中,增加师生互动,拓展学生思维,这种方式除了可提高研究生的综合素质外,更有利于本科生的实践与创新能力的培养,从而达到本科生与研究生教育协同发展的目的。 谷景义 朱雪娇 李育敏 费嘉关键词:生物化学 实验课程 小核酸在白血病/肿瘤中的靶向抑制作用及其磷酸化信号通路研究 费嘉 胡海燕 张洹 古春明 阴钊 丰茂晓 朱雪娇 骆小闯 李育敏 谷景义 核酸属于生物大分子,而小核酸指小于50bp的核酸片断,通常称寡核苷酸。项目团队十余年时间致力于白血病/肿瘤中类似抑癌基因miRNA-181a的靶基因及抑癌效应、类似癌基因miRNAs(Oncomirs,mir-21、mi...关键词:关键词:白血病 肿瘤